• 2006年第3期文章目次
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    • 继续医学教育试题(3)

      2006(3).

      摘要 (414) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:一、选择题1.Calcein一AM因有以下特点,可用于检测早期细胞凋亡。() A.可通过细胞膜和线粒体内膜;B.本身无荧光; C.本身发绿色荧光;D.Co,十(CoC12)可使所发荧光碎灭。2.为了检出对万古霉素耐药或中介耐药的金黄色葡萄球菌,最好选用以下方法。() A.微量肉汤稀释法;B.M一H平板纸片扩散法; c.微生物分析仪法;D.E一test法。3.为了克服三酞甘油(TG)试剂,总胆固醇(TC)试剂对总胆汁酸(TBA)测定的干扰,可采用以下方法。() A.用酸清洗剂加强冲洗;B改变检测顺序,将TBA测定放在TG、TC测定前; C.在TG、TC测定与TBA测定之间间隔2个…

    • 感染性疾病实验室诊断研讨会征文通知(国家级)

      2006(3).

      摘要 (298) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:继SARS在国内流行后,今年禽流感又在国内部份地区流行。如何利用实验室有效资源,整合血液、生化、免疫、分子生物学等指标,用于病原体的诊断和鉴别诊断是临床检验工作者目前急需解决的问题。为此,江苏省医学会临床检验杂志编辑部拟在2006年9月在无锡市举办“感染性疾病实验室诊断”研讨会,会上将邀请国内有关专家讲解新病原体的概念、最新检测方法及有关诊断标准,让与会者有一个系统的、专业的解决病原体鉴定及临床应用评价方案。有关事项通知如下:

    • 细胞核抗原Sm B′的基因克隆和原核表达

      2006(3).

      摘要 (480) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定。结果PCR产物约为700 bp,与预期657 bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-Sm B′重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000,具有与抗Sm B′抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B′,为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。

    • 丙型肝炎病毒5′utr分型和C区基因分型结果的比较

      2006(3).

      摘要 (1125) HTML (0) PDF 0.00 Byte (18) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较丙型肝炎病毒(hepatitis C vims,HCV)不同基因分型方法的一致性。方法采用5′非编码区(NCR)型特异性引物分型法和核心区型特异性引物分型法分别对95例和其中的31例HCV RNA阳性患者的血清样本进行基因分型,分析不同分型方法的灵敏度和稳定性异同。结果两种分型方法的一致性达到93.5%,对于混合感染的发现能力C区分型较强,稳定性无差异。结论C区分型方法更加精确。

    • FISH检测意义未明单克隆γ球蛋白病患者13号染色体及p53基因缺失

      2006(3):161-163.

      摘要 (797) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的了解意义未明单克隆γ球蛋白病(MGUS)患者13号染色体及p53基因缺失情况。方法磁珠分选系统(MACS)技术分选浆细胞后,采用D13S319和17p13 DNA特异性探针和荧光原位杂交(FISH)技术对23例MGUS患者的浆细胞进行13号染色体及p53基因缺失的检测。结果23例MGUS中4例(17.4%)有del(13q14),其阳性细胞率在19%-80%之间;未见p53基因缺失。结论FISH结合MACS是检测MGUS遗传学异常的有效方法,del(13q14)可能是疾病过程中的继发事件,其预后意义及其与疾病进展的关系有待进一步探讨。

    • 血清Ⅳ型胶原时间分辨荧光免疫分析检测法的建立和临床应用

      2006(3):164-165.

      摘要 (474) HTML (0) PDF 0.00 Byte (15) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的研究建立时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)检测血清中Ⅳ型胶原(CⅣ),并探讨其临床应用价值。方法以CⅣ多克隆抗体包被板条,Eu3 标记CⅣ单抗,发光增强系统为以β-二酮体为主的增强液。建立CⅣ的夹心TrFIA测定法,并检测127例肝病患者和30例正常对照血清中CⅣ含量。结果CⅣ夹心TrFIA法的灵敏度12.8μg/L;批内和批间平均CV分别为4.54%和8.06%;平均回收率为98.6%。30例正常献血员血清CⅣ含量为(46.06±22.21)μg/L,急性肝炎患者为(47.25±22.58)μg/L,慢性轻度肝炎患者为(129.01±53.68)μg/L,慢性中度肝炎患者为(277.90±92.36)μg/L,慢性重度肝炎患者为(413.90±162.24)μg/L,肝硬化患者为(568.60±210.40)μg/L。除急性肝炎外,均显著高于正常对照组(P<0.01)。结论建立的测定CⅣ的夹心TrFIA法灵敏度和特异性高,重复性好。

    • >论著
    • 细胞核抗原Sm B''''的基因克隆和原核表达

      2006(3):166-168.

      摘要 (448) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B’。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B’全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在异丙基-β—D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定。结果PCR产物约为700 bp,与预期657 bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-ST-Sm B’重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS—PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000,具有与抗Sm B’抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B’,为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。

    • 从血气胸患者胸水中分离出河弧菌1例

      2006(3):168-168.

      摘要 (510) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:2005年4月10日从血气胸患者胸水中分离出1株河弧菌(V.fluvialis),报道如下。1病历摘要患者,男,53岁,汉族,农民。因摔伤致右7、8肋骨折,右胸疼痛伴气促3 d于2005年4月4日入院。体温37.9℃,血象WBC 13.4×109/L,N:0.82,L:0.18,X线检查右7、8肋骨折,血气胸。行手术(右胸腔闭式引流),术中取胸水培养,分离到河弧菌(V.fluvialis)。2细菌鉴定胸水标本经增菌肉汤增菌24 h后,接种血平板、巧克力平板、麦康凯平板35℃培养24 h。血平板上形成灰白色、圆形、温润、扁平、不透明、无溶血环、中等大小纯培养菌落。麦康凯平板上菌落较小。涂片染色为短小、弯曲成

    • 根据NCCLS-EP9-A2评价2种发光免疫分析法的一致性

      2006(3):169-171.

      摘要 (597) HTML (0) PDF 0.00 Byte (19) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的根据NCCLS-EP9-A2对2种发光免疫分析法进行比对试验,研究2种方法检测结果的一致性。方法收集40例临床血清标本,分别使用Access分析仪和Elecsys2010分析仪同时测定血清标本IgE水平,分析2组结果的相关性和2种方法检测结果的一致性。结果2种方法所得的结果相关性良好(r=0.994),2组结果预期偏差在允许偏差范围内,可以接受。结论在严格按操作规程进行校准和质控在控的前提下,使用这2种发光免疫分析方法测定血清中IgE水平的结果基本一致,在同一实验室可以同时使用这2种方法检测相同项目。

    • >个例报道
    • 植皮术后继发总状毛霉病1例

      2006(3):171-171,223.

      摘要 (748) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:1病历摘要患者,女,20岁。2005年6月20日因车祸致左腿外伤收住入院,入院时左下肢从大腿中部至踝部皮肤完全剥脱,左胫腓骨双骨折,行全麻下清创、植皮、跟骨牵引术,术后给予抗炎、止血、补液等对症支持治疗。2005年7月7日换药时见患肢小腿外侧敷料有脓性渗出物,敷料下方有1块4 cm×5 cm的皮瓣颜色变黑,继续使用头孢他啶、洛美沙星抗炎、对症治疗。1个月后患区仍有较多脓性渗出物,新植

    • 湖北汉族人群2型糖尿病患者线粒体基因突变检测及临床意义

      2006(3):172-175.

      摘要 (517) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的研究线粒体DNA(mtDNA)16S rRNA基因(T3200C、C3206T)和ND1基因(A4136G、A4164G和T4216C)突变在湖北汉族2型糖尿病人群中的发生率及临床意义。方法采用等位基因特异性PCR(AS-PCR)、PCR-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)分析及PCR产物直接测序,对175例2型糖尿病患者和200例正常对照的线粒体基因突变进行检测,并用Primer、Antherprot和Mfold软件对检出的突变位点进行分析,对RNA突变后最小自由能下的二级结构变化和ND1基因突变后蛋白质的二级结构改变进行预测。结果2型糖尿病组检出3200(T→C)突变2例(1.14%),3206(C→T)突变11例(6.28%),4216(T→C)突变3例(1.71%),4136位点未发现突变。发现2个未曾报道的新突变位点4164(A→G)7例(4.00%),4200(A→T)1例(0.57%)。对照组中检出3206(C→T)突变8例(3.92%),4164(A→G)突变5例(2.45%),两位点突变率在两组中比较差异无显著性(P>0.05)。RNA二级结构预测显示3200(T→C)突变引起16S rRNA基因最小自由能和二级结构的改变,可能引起疾病。4164(A→G)和4200(A→T)突变分别为Met和Leu的无义突变,4216(T→C)突变可使线粒体呼吸链中一个中性酪氨酸被亲水性组氨酸取代,蛋白质二级结构预测显示该突变可引起NDl蛋白质二级结构改变。研究还显示线粒体基因突变率在≥40岁个体呈上升趋势。结论mtDNA 3200(T→C)和4216(T→C)突变可能增加糖尿病的易感性;3206(C→T)和4164(A→G)为基因多态性改变;4136位点未发现突变。以上结果提示糖尿病的发生在线粒体基因突变上存在一定的异质性。

    • >个例报道
    • 血液培养分离出溶藻性弧菌1例

      2006(3):175-175,181.

      摘要 (363) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:2004年8月,我们从1例肝硬化并糖尿病患者的血液中培养分离出溶藻性弧菌(V。 algnolytiacus)报道如下。

    • 实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立

      2006(3):176-178.

      摘要 (816) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因表达的方法。方法在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中GC-C mRNA含量,并以GC-C mRNA和β2M mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标。结果本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101pg/ml-109pg/ml,样本批内和批间CV值分别为6.87%一11.12%和8.86%- 15.19%。30例健康献血员和11例大肠良性病变患者的外周血单个核细胞(PBMC)中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者PBMC的GC-C mRNA检出率为83.8%(31/37),表达水平为0.88±0.06。10例大肠癌组织和T84细胞株均检出GC-C mRNA,表达水平分别为每μg组织(0.86±0.07)和每个细胞0.0082。结论成功建立RFQ-PCR检测GC-C mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度、特异性和可重复性。

    • 慢性髓细胞白血病患者染色体分析及bcr/abl融合基因转录本定量的临床意义

      2006(3):179-181.

      摘要 (963) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的探讨慢性髓细胞白血病(CML)患者染色体分析与bcr/abl融合基因定量的临床应用价值。方法17例CML患者采用骨髓细胞短期培养法制备染色体,应用G、R显带技术进行染色体分析,同时采用实时定量RT-PCR技术进行bcr/abl融合基因定量检测,并对其中的9例患者进行了跟踪观察。结果全部患者均检出Ph染色体及表达bcr/abl融合基因,阳性患者之间19cr/abl表达水平差异很大。常规药物治疗后稳定于慢性期的4例患者,bcr/bal表达水平轻度上升或下降,未发现新的染色体异常;进入急变期的3例患者bcr/abl表达平均上升了9.06倍,均出现新的附加染色体异常;2例异基因骨髓移植的患者bcr/abl表达水平随临床治疗而发生变化;bcr/abl变化趋势相同而细胞遗传学结果不同的患者,对药物治疗的反应不同,预后也不一样。结论染色体分析结合bcr/abl基因定量较为全面地反映了CML患者的生物学特性,与疾病进展密切相关,对CML的诊断、疗效评价、预后判断反映白血病细胞负荷有较大的临床价值。

    • >实验研究
    • Calcein-AM和Annexin V在流式细胞术检测早期细胞凋亡的敏感性比较

      2006(3):182-184.

      摘要 (1001) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法。方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)染色,然后用流式细胞仪分析凋亡率,通过比较诱导后不同时间点的凋亡率来分析Calcein-AM和Annexin V对于检测细胞早期凋亡的敏感性。结果在喜树碱诱导模型中,加药后2 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而3 h后才能用Annexin V检测到;在紫外线诱导模型中,照射后1 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而要在2 h后才能用Annexin V检测到。结论Calcein-AM用于检测活细胞早期凋亡比Annexin V更为敏感,是一种稳定、可靠、灵敏度高并且较为经济的检测细胞早期凋亡的活细胞染料。

    • 金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性试验方法评价

      2006(3):185-187.

      摘要 (838) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较不同方法检测金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性试验结果。方法将1株从临床标本中分离的异质性耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(h-VRSA)在含有不同浓度的万古霉素培养基上连续转种诱导,得到一系列对万古霉素不同程度耐药的菌株,分别用琼脂筛选法、微量肉汤稀释法、E-test法、纸片扩散法和仪器法对万古霉素的敏感性进行检测。结果琼脂筛选法、微量肉汤稀释法和E-test法可以检测出金黄色葡萄球菌对万古霉素中介耐药(VISA),而纸片扩散法和仪器法则不能检出VISA。结论微量肉汤稀释法和E-test法是检测金黄色葡萄球菌对万古霉素敏感性可接受的方法。若以纸片扩散法和仪器法为常规药敏试验的实验室,应增加含6μg/ml的万古霉素脑心浸液琼脂进行筛查,以加强对VRSA和VISA的监测。

    • 戊型肝炎病毒ORF2基因在人胚肾293细胞中的表达

      2006(3):188-190.

      摘要 (493) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的探讨戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)ORF2基因在人胚肾293细胞的表达。方法利用聚合酶链反应(PCR)技术,以HEV ORF2为模板扩增其部分基因片段,克隆入真核表达载体pcDNA 3.1中,构建真核表达载体质粒,转染人胚肾293细胞,用G418(Geneticin,遗传霉素)加压筛选得到稳定表达株。用western-blot方法对表达产物进行免疫学特性初步研究。结果含ORF2结构基因部分片段的重组质粒在人胚肾293细胞中得到表达。结论表达的ORF2重组蛋白具有抗HEV抗体识别的抗原表位和一定的抗原性,为进一步研制HEV的诊断试剂奠定了基础。

    • >检验与临床
    • SLE患者血清急性巨细胞病毒pp65的抗原及IgM类抗体检测

      2006(3):190-190,192.

      摘要 (515) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:系统性红斑狼疮(SLE)患者是巨细胞病毒(CMV)感染的易患人群,且CMV可能是诱发或加重SLE的因素之一。因此,早期诊断SLE患者CMV感染并进行有效的抗病毒治疗是非常必要的。

    • >实验研究
    • 肾结石患者血清中纳米细菌的分离与培养

      2006(3):191-192,i0001.

      摘要 (412) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的分离培养肾结石患者血清中纳米细菌,探讨纳米细菌感染与肾结石发病之间的关系。方法取40例肾结石患者血清,经0.22μm滤膜过滤后,用RPNI 1640细胞培养基于37℃,5%CO2环境中培养,用显微摄影技术记录结果;以40例健康成人血清为对照。结果22例(55%)肾结石患者血清、8例(20%)对照血清中分离到纳米细菌。经X^2检验,差异具有显著性(P〈0.05)。结论肾结石患者血清中纳米细菌检出率高于正常人血清,提示纳米细菌感染与肾结石发生可能有关。

    • >研究生园地
    • GPⅠa/Ⅱa和GPⅣ在血小板-胶原黏附中的功能

      2006(3):193-195.

      摘要 (499) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的探讨GP Ⅰa/Ⅱa和GPⅣ在血小板-胶原黏附过程中的功能。方法 采用流式细胞术,在有或无抗GP Ⅰa/Ⅱa抗体、GPⅣ抗体阻断条件下,用抗CD42b-PE标识血小板并检测血小板与FITC标记胶原黏附过程中FITC荧光强度的变化。结果抗GP Ⅰa/Ⅱa抗体能抑制血小板与胶原的黏附,对活化态血小板的抑制作用更明显(P〈0.01);抗GPⅣ抗体在黏附早期能延迟黏附进程(P〈0.05),但最终不能抑制血小板与胶原的黏附过程(P〉0.05)。结论GPⅠa/Ⅱa 在血小板与胶原黏附过程中有重要作用,阻断GP Ⅰa/Ⅱa 能降低血小板对胶原的结合;GPⅣ在血小板与胶原黏附过程的早期有辅助加速作用。

    • 系统性红斑狼疮患者血浆狼疮抗凝物和D-二聚体的联合检测

      2006(3):195-195.

      摘要 (785) HTML (0) PDF 0.00 Byte (19) 评论 (0) 收藏

      摘要:系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血栓形成的确切机制目前仍不清楚。狼疮抗凝物质(lupus anticoagulant,LA)是一种磷脂依赖性的病理性循环抗凝物质,为IgG、IgM或两者混合型的抗磷脂(ApL)抗体。D-二聚体(D-Dimer,DD)是交联纤维蛋白在纤溶酶作用下所产生的纤维蛋白降解产物,是证实体内存在继发性纤溶的特异指标。LA和DD的升高可能与SLE患者的血栓形成有关。1资料与方法1.1检测对象SLE患者38例,为我院2004-2005年的住院病人,男10例,女28例,年龄17-65岁,平均36.7岁。诊断符合1982年美国风湿病学会诊断标准。正常对照为健康

    • 氧化低密度脂蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

      2006(3):196-198.

      摘要 (703) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的制备抗氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)单克隆抗体(Ox-LDL mcAb)。方法以Ox-LDL为抗原,免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立稳定分泌抗Ox-LDL mcAb的杂交瘤细胞,用protein A柱亲和层析法纯化腹水中mcAb,用ELISA,western- blot等鉴定其生物学活性。结果获得2株能稳定分泌Ox-LDL mcAb的杂交瘤细胞(6E9D,7G3C),均为IgG1亚型;染色体数目为100-106条;腹水效价为105;western-blot分析和ELISA检测证实2株mcAb均与Ox-LDL有较高的特异性。结论本实验成功制备了2株抗Ox-LDL特异性的mcAb,可用于Ox-LDL免疫检测方法的建立。

    • 芯片技术用于APC基因启动子甲基化定量检测

      2006(3):199-202.

      摘要 (568) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的研制抑癌基因APC启动子1A的甲基化定量检测芯片,对临床标本进行初步定量检测分析。方法采用脐带血DNA克隆体作为阴性、阳性质控品建立芯片,提取6例健康人的肺组织DNA、6例肺癌患者的肺组织和癌组织DNA,进行亚硫酸盐化学修饰,以甲基化特异性引物进行基因扩增,与探针杂交检测,并进行甲基化特异性序列分析。结果甲基化阳性、阴性质控品的芯片检测与测序结果吻合。687、707、714、719和726共5个位点的荧光强度标准曲线的R2为0.93-0.99。687、707、714、719和726共5个位点非甲基化的检测范围:(0±8.7)%、(0±17.6)%、(0±17)%、(0±13)%、(0±8)%;甲基化杂合型的检测范围:(50±3.6)%、(50±6.9)%、(50±3.5)%、(50±8.5)%、(50±7.3)%。标本的芯片检测与测序结果一致。结论本研究首次建立了以微阵列技术为基础的APC基因启动子甲基化定量检测芯片。

    • 液相色谱法测定HbA1c标本的前处理

      2006(3):202-202.

      摘要 (476) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:液相色谱法检测糖化血红蛋白HbAlc时色谱柱的寿命常常与上机样品的质量有关。我们推荐一种减少管路堵塞和延长色谱柱寿命的方法。1材料与方法1.1临床资料2004-2005年,来本院就诊的150例糖尿病患者,诊断均符合WHO的糖尿病修订标准。男91例。女59例,年龄范围52-65岁,平均56.3岁。1.2试剂与仪器糖化血红蛋白试剂盒购自Bio-Rad公司,仪器为DiaSTAT糖化血红蛋白仪分析系统。1.3研究方法两试管中均加入同一受试者肝素抗凝血10μl,分别加入1 ml溶血剂,放置10 min后,其中一管不离心立即检测(未离心组),另一管经3 500 L/min离心10 min取上清液检测(离心组),再取试管底部的沉淀物涂片,晾干后

    • 内蒙古地区汉族人群TNFβ基因多态性与IgA肾病的相关性

      2006(3):203-205.

      摘要 (334) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的研究内蒙古地区汉族人群IgA肾病与TNFβ基因多态性的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对79例IgA肾病患者及80例正常对照TNFβ1 069位点等位基因A→G单碱基突变多态性进行分析。结果内蒙古地区汉族IgA肾病患者TNFβ*1/1纯合子和TNFβ*2/2纯合子检出率与正常对照组比较均有较大差异(均P< 0.05);TNFβ*2等位基因频率(68.99%)较正常人(53.75%)显著升高(P<0.01)。结论TNFβ*2基因可能与IgA肾病易患性相关。

    • IgM、IgG、IgA类类风湿因子及抗CCP抗体对RA的诊断意义

      2006(3):205-205.

      摘要 (1303) HTML (0) PDF 0.00 Byte (48) 评论 (0) 收藏

      摘要:抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗聚角蛋白微丝蛋白抗体(AFA)的共同抗原决定簇为环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP),可经人工合成。用ELISA检测抗CCP抗体,对诊断类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)具有较高的特异性。本研究用ELISA联合检测lgM、lgG、lgA 3类RF(IgM-RF、IgG-RF、IgA-RF)及抗CCP抗体,探讨它们在诊断RA中的临床意义。1研究对象与方法1.1研究对象RA患者56例,男17例,女39例,年龄20 -74岁(平均38.5岁),均符合美国风湿病学会(ARA)1987年修订的诊断分类标准。其他风湿病患者68例,包括系统性红斑狼疮(SLE)32例、强直性脊柱炎16例和混合性结缔组织病20例,男21例,女47例,年龄18-78岁(平均36.4岁),均符合国内或国际相应的诊断标准。体检健康者60例,男15例,女45例,年龄18-59岁(平均33.5岁)。常规抽取静脉血,分离血清置-20℃保存待检。

    • 丙型肝炎病毒5''''utr分型和C区基因分型结果的比较

      2006(3):206-208.

      摘要 (583) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)不同基因分型方法的一致性。方法采用5’非编码区(NCR)型特异性引物分型法和核心区型特异性引物分型法分别对95例和其中的31例HCV RNA阳性患者的血清样本进行基因分型,分析不同分型方法的灵敏度和稳定性异同。结果两种分型方法的一致性达到93.5%,对于混合感染的发现能力C区分型较强.稳定性无差异。结论C区分型方法更加精确。

    • 不同保存条件对血液酒精浓度检测的影响

      2006(3):208-208.

      摘要 (662) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:检测血液酒精浓度(blood alcohol concentration,BAC)是认定车辆驾驶人员是否酒后驾车的重要依据。做好实验室检测条件的控制,保证检测结果的准确性,对受检人员饮酒程度进行公正认定及做好标本保存复查工作尤其重要。目前关于不同保存条件对BAC检测影响的研究较少,我们从实际出发进行了实验分析,报告如下。1材料与方法1.1仪器及试剂仪器为美国Abbott公司AXSYM全自动酶免疫发光仪。试剂为仪器配套的酒精浓度测定试剂盒及

    • 两种方法检测脑脊液蛋白质的比较

      2006(3):209-210.

      摘要 (682) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较干化学法(A法)和改良的邻苯三酚红钼络合显色法(B法)测定脑脊液蛋白质的特点,选择一种快速、准确、适合临床常规检验的方法。方法A法、B法分别采用改良双缩脲法和改良邻苯三酚红钼络合显色法。对2种方法的精密度、线性予以评价。按照美国国家实验室标准委员会(NCCLS)EP9-A文件,以A法为比较方法,B法为实验方法进行对比,同时对2法进行药物干扰试验。结果线性范围:A法为0.2-3.5 g/L,B法为0.3-2.1g/L。批内CV:A法分别为2.28%、2.40%,B法分别为2.87%、2.62%;批间CV:A法分别为2.50%、2.80%,B法分别为3.01%、3.10%。2种方法的相关系数r =0.994,线性回归方程:Y=0.979X-0.036。结论2种方法都可用自动生化仪进行检测,能减少人为误差。A法准确、线性范围较宽,灵敏度高;B法准确,药物干扰较少。

    • 流式细胞术在细胞活率检测中的应用

      2006(3):211-212.

      摘要 (417) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的探讨流式细胞术在细胞活率检测中的应用。方法测试管中用CD45-PerCP单抗标记动员后采集物中的单个核细胞,用碘化丙锭(PI)染色其中死亡的细胞。对照管中不加PI,其余与测试管相同。结果(1)随着温育时间的延长,PI拒染率逐渐降低,温育时间以15 min为宜。(2)PI拒染率与台盼蓝拒染率呈显著正相关(r=0.998);其精密度优于台盼蓝拒染试验。结论流式细胞术适用于细胞活率的检测。

    • 抗人球蛋白微柱凝胶法和试管法检测孕妇lgG抗A(B)的比较

      2006(3):213-214.

      摘要 (512) HTML (0) PDF 0.00 Byte (19) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较抗人球蛋白微柱凝胶法和传统试管法检测O型孕妇血清中ABO血型免疫性抗体的滴度差异及方法的灵敏度。方法用抗人球蛋白微柱凝胶法和传统试管法平行检测53例与丈夫ABO血型不合的O型孕妇血清IgG抗A(B)水平,经配对t检验,比较两种方法检测结果的差异。结果微柱凝胶法及试管法检测的平均抗体滴度分别是1:160和1:45,前者比后者高3.56倍,两法差异非常显著(P<0.001),但检测结果有相关性(r=0.829,P<0.001)。另外,以微柱凝胶法检测398例O型孕妇,抗体滴度1:64以上所占的孕妇比率显著高于以试管法检测的文献报道结果。结论微柱凝胶法比试管法具有更高的灵敏度,且实验操作简便、快速,更适合于广泛应用,但因灵敏度过高,需对其决定值进行界定。

    • >实验技术
    • 荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤18号染色体异常

      2006(3):215-215,i0001.

      摘要 (637) HTML (0) PDF 0.00 Byte (13) 评论 (0) 收藏

      摘要:本室用18号染色体着丝粒探针和间期荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术,对22例多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者进行18号染色体数目异常的检测,以探讨间期FISH技术在MM染色体倍体异常检测中的应用价值。

    • TaqMan PCR技术同步检测沙眼衣原体及肺炎衣原体的DNA

      2006(3):216-217.

      摘要 (414) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:我们自行设计了针对沙眼衣原体、肺炎衣原体的特异性引物、Taq Man荧光探针,对这2种病原体核酸进行双重扩增荧光探针杂交检测,取得满意结果。

    • 1002例延边朝鲜族健康儿童静脉血细胞参考值调查

      2006(3):217-217.

      摘要 (459) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:为了解延边地区朝鲜族健康儿童血液分析仪检测静脉血细胞的参考值,对延边地区部分朝鲜族健康儿童进行了测定,报告如下。1对象与方法1.1对象1 002例健康朝鲜族儿童为延吉、汪清、和龙、龙井、图们等各个幼儿园健康查体者,无遗传、血液、消化系统疾病及慢性病史,发育情况良好。男性562例,平均年龄3.5岁;女性440例,平均年龄4岁。1.2仪器与试剂使用日本东亚公司生产的SysmexK-4500全自动血液分析仪,试剂为Sysmex公司生产的配套试剂。1.3质量控制使用迈克公司生产的全血质控物(批号

    • >实验技术
    • 液体染色培养基用于白色假丝酵母菌的鉴定

      2006(3):218-218,i0001.

      摘要 (680) HTML (0) PDF 0.00 Byte (18) 评论 (0) 收藏

      摘要:芽管试验是鉴定白色假丝酵母菌的关键试验,传统的芽管检测的试剂多为动物血清。我们研制了一种液体染色培养基,用来检测白色假丝酵母菌的芽管和厚膜孢子,临床应用效果良好,报道如下。

    • 葡萄球菌对克林霉素诱导型耐药的检测及分析

      2006(3):219-219.

      摘要 (596) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药率呈明显上升趋势,且出现诱导型克林霉素耐药的菌株。我们对临床分离到的葡萄球菌进行了红霉素、克林霉素耐药性的检测,报告如下。1材料和方法1.1菌株试验菌株为本院2003-2005年临床分离到的金黄色葡萄球菌(SA)153株,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS) 137株。所有菌株均经Vitek细菌分析仪鉴定确认。纸片法药敏试验的质控菌株为ATCC25923金黄色葡萄球菌。1.2仪器与试剂35℃恒温箱,Vitek细菌分析仪、GPI细菌鉴定卡(生物梅里埃公司),红霉素药敏纸片(15μg)、克林霉素药敏纸片(2μg),M-H琼脂(Oxoid)公司。1.3药敏试验按2004 NCCLS中的D-试验的规程操作。

    • 三酰甘油、总胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰及排除

      2006(3):220-220.

      摘要 (644) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:在日常工作中,我们发现三酰甘油(TG)试剂与总胆汁酸(TBA)试剂相邻时,可造成胆汁酸测定结果偏高,考虑可能为试剂之间的交叉污染。为此试验了多种试剂,发现三酰甘油、总胆固醇(TC)试剂可对TBA测定造成干扰,并比较了排除干扰的几种方法。1仪器与试剂日立7170A型生化分析仪。总胆固醇试剂,浙江宁波美康公司生产,批号:20050527。主要成份:三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH7.0)0.15 mmol/L、胆固醇酯酶(CE)800 U/L、胆固醇氧化酶(CO)400 U/L、胆酸钠3.5 mmol/L、4-氨基安替比林(4-APP)1.0 mmol/L、过氧化物酶(POD)1 000 U/L、4-氯酚0.5 mmol/L、表面活性剂适量。TG试剂,浙江宁波美康公司生产,批号:20050602。主要成分:三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH7.0)0.15 mmol/L、甘油激酶(GK)500 U/L、脂蛋白酯酶(LPC)3 000 U/L、胆酸钠3.5 mmol/L、甘油磷酸氧化酶(GPD)3 000 U/L、4-氨基安替比林(4-APP)2.5 mmol/L、过氧

    • 阴道加德纳菌分离培养及快速鉴定

      2006(3):221-221.

      摘要 (1176) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:细菌性阴道病(bacterial vaginnosis,BV),也称非特异性阴道炎,临床表现为阴道分泌物增加并伴有典型的腥臭味,呈灰白色,均匀一致,稀薄,黏度很低。该病主要病原体之一是阴道加德纳菌(Gardnerrela vaginalis,Gv)本文报告阴道加德纳菌分离培养及快速鉴定方法。1材料与方法1.1标本来源妇科门诊细菌性阴道病疑似病人136例。用无菌棉拭子采集阴道分泌物。1.2改良人血哥伦比亚选择培养基用哥伦比亚琼脂19.5 g,添加多蛋白胨2.5 g,10g/L酵母浸膏溶于蒸馏水450 ml,加热溶解调整pH为7.0-7.4。高压灭菌,冷却至50℃左右无菌手续添加人血30 ml、组合抑菌剂1瓶(购于Oxoid公司,含庆大霉素2.0 mg、二性霉素B 1.0 mg、奈啶酮酸15.0 mg)混匀,倾注平板。

    • 两种HBV前S1蛋白试剂盒检测结果的比较与临床价值

      2006(3):222-223.

      摘要 (379) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的比较两种前S1蛋白(preS1)试剂盒检测乙型肝炎的结果及临床价值。方法采用两种preS1试剂盒对248例HBsAg( )、41例HBsAg(-)血清进行检测,并与常见HBV血清标志物及HBV DNA结果作比较分析。结果HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( /-)7l例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为97.2%、70.4%和31.0%。HBsAg ( )、HBeAg(-)、抗HBe( )、抗HBc( )156例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为57.1%、39.1%和16.7%。HBeAg(-)、HBsAg( )、抗HBc( )21例,HBV DNA、试剂1 preS1和试剂2 preS1的阳性率分别为76.2%、47.6%和9.5%。41例HBsAg(-)血清未检出preS1和HBV DNA。结论preS1反映HBV复制情况较HBeAg更敏感,但试剂盒的不同影响检测结果。对于HBeAg(-)患者,preS1是一个判断HBV复制的有价值的指标。

    • >检验与临床
    • 随意尿蛋白/尿渗透压和随机尿蛋白/尿肌酐比值的临床评价

      2006(3):224-224,230.

      摘要 (821) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:一般认为,晨尿(随意尿)尿蛋白和尿肌酐比值(Upro/Uer)可作为24 h尿蛋白定量的替代检测方法;但也有学者提出,由于年龄和疾病类型及程度的不同,肌酐的排泄存在很大的差异,建议使用晨尿(随意尿)尿蛋白和尿渗透压比值(Upro/Uosm)作为替代方法。我们用两种方法对80例肾脏病患者进行了研究,结果报告如下。

    • 检测孕妇血浆中游离胎儿DNA行产前诊断的研究进展

      2006(3):225-227.

      摘要 (357) HTML (0) PDF 0.00 Byte (14) 评论 (0) 收藏

      摘要:及早获取胎儿组织进行产前诊断,对于有效预防和控制新生儿遗传性疾病的发病率及死亡率十分重要。传统的产前获取胎儿组织的方法,如羊膜腔穿刺和绒毛膜取样等均为创伤性检查,对胎儿和孕妇都有一定的危险。1997年,Lo等首次证实孕妇血浆(清)中存在游离的胎儿DNA(fetal DNA,fDNA),并将其用于性连锁遗传病的产前诊断,为无创性产前诊断开辟了新的途径。本文就近年来利用血浆fDNA行产前诊断的进展及存在的问题作一简要综述。1孕妇血浆fDNA的基本特性孕妇血浆中fDNA的基本特性为:①含量高于孕妇血液中胎儿细胞的DNA。孕妇血浆总的游离DNA是fDNA和母体自身DNA的混合物。妊娠早期fDNA的平均含量为25.4

    • 尿微量清蛋白检测对重症急性胰腺炎的价值

      2006(3):227-227.

      摘要 (567) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:重症急性胰腺炎(SAP)并发多器官功能障碍综合征(MODS)时死亡率高。因此,早期诊断和识别并发症给予对症治疗是降低病死率的关键。微量清蛋白尿(MA)是一种广泛血管损伤的标志物,本文通过观察SAP患者尿MA的变化,结合临床病情转归探讨其临床意义。1材料与方法1.1临床资料2003-2004年间我院收治SAP患者32例,轻症急性胰腺炎(MAP)患者45例。SAP组:男21例,女11例,平均年龄47岁。MAP组:男25例,女20例,平均年龄45岁。根据1995年全国危重病急救医学学术会议制定的MODS诊断标准SAP组32例中未发生MODS的23人发生MODS

    • 肠球菌分类与鉴定新进展

      2006(3):228-230.

      摘要 (776) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:肠球菌属(Enterococcus)细菌为兼性厌氧、触酶阴性、链状排列的革兰染色阳性球菌,其DNA的G C含量为(37- 45)mol%。多数菌种产生D抗原,有些菌种可产生Q抗原。为人和动物胃肠道正常菌群之一,可引起抵抗力低下宿主的多种机会感染,现已成为医院感染的重要致病菌。1分类肠球菌最初被分类为肠内的革兰阳性球菌,之后归入链球菌属。1930年,随着Lancefield血清分型系统的建立,肠球菌被分类为D群链球菌,并可应用不同的生理生化特性区别于非肠球菌D群链球菌,如牛链球菌。由于该群菌10℃、45℃、65g/L NaCl中均生长,耐受60℃30 min,并在40%胆汁

    • L-肉毒碱功能及其检验

      2006(3):231-233.

      摘要 (715) HTML (0) PDF 0.00 Byte (14) 评论 (0) 收藏

      摘要:肉毒碱是广泛存在于自然界中的一种高极性、小分子季胺类化合物,为人体必需营养素,有重要的生化功能和临床应用价值。人类对肉毒碱的需求主要是通过生物合成和摄人饮食来满足。近年来,L-肉毒碱在心脑血管疾病、消化道疾病、儿童疾病的预防、治疗以及血液透析病人的营养支持和运动医学及生殖医学等领域,都得到广泛研究和应用。本文就肉毒碱的理化性质、生物学功能及其检验方法作一概述。

    • 4种国产戊型肝炎IgG抗体检测试剂的结果比较

      2006(3):233-233.

      摘要 (514) HTML (0) PDF 0.00 Byte (15) 评论 (0) 收藏

      摘要:目前HEV感染主要依据HEV-IgM和IgG抗体测定判断,因此,同时检测HEV-IgM和HEV-IgG可大大减少HEV感染的漏检率。为此,我们对市场常见的4种国产HEV-IgG试剂作了比较,报道如下。1材料与方法1.1标本来源本院确诊的戊肝病人(美国Genelabs公司提供检测试剂)血清96份;体检正常献血员血清32份及甲型肝炎患者血清2份、乙型肝炎患者血清3份、丙型肝炎患者血清2份作为阴性标本。各型肝炎诊断符合2000年(西安)全国肝病会议诊断标准。

    • 血凝仪用质控物的研制及临床应用

      2006(3):234-234.

      摘要 (687) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)含量测定、凝血酶时间(TT)的室内质控物主要依赖进口,价格较贵,我们研制了正常范围质控血浆(N值)和病理范围质控血浆(P值)作为该凝血四项室内质控物,经一年应用,效果满意。1材料和方法1.1材料正常献血员新鲜血浆;羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(HEPES)稳定剂(100 g/L);含HEPES的枸橼酸钠抗凝剂(用100 g/L HEPES配制109 mmol/L含2个H2O分子的枸橼酸钠);小牛血清(购于中科院研究所);法国Stago-compact全自动血凝仪及配套试剂。1.2方法N值质控物制备正常献血员静脉血与抗凝剂按9:1比例,混匀,分离血浆,2 000×g离心15 min共2次,按一年所需量将血浆以每份0.8 ml的量分装塑料带盖离心管内,标示N值。

    • 2006年版CLSI/NCCLS有关抗生素敏感试验操作标准的更新要点

      2006(3):235-239.

      摘要 (1409) HTML (0) PDF 0.00 Byte (41) 评论 (0) 收藏

      摘要:2006年1月美国临床和实验室标准化协会(the Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI,原名NCCLS)公布的第16版抗生素敏感试验操作标准(M100-S16)对15版进行了更新,以取代2005年及以前版本的内容。其主要变化源于2005年召开的抗生素药物敏感试验的专业会议。第16版的更新要点如下:(1)再次阐明奇异变形杆菌ESBLs检测的筛选与确认试验;(2)新增铜绿假单胞菌、不动杆菌属、洋葱伯克霍尔德菌、嗜麦芽窄食假单胞菌的纸片扩散和MIC解释标准的4个独立表格;(3)删除达托霉素(daptomycin)纸片扩散法的解释标准,修改了葡萄球菌属和链球菌属(除肺炎链球菌外)关于达托霉素琼脂稀释法药敏试验的建议,指出肠球菌属达托霉素琼脂稀释试验尚未被确认; (4)增加了万古霉素敏感性降低之金黄色葡萄菌的万古霉素BHI琼脂筛选试验;(5)修正了万古霉素对葡萄球菌属的

    • >经验交流
    • 精子对Diasys R/S 2003尿沉渣定量分析工作站流动计数室的影响

      2006(3):239-239.

      摘要 (361) HTML (0) PDF 0.00 Byte (17) 评论 (0) 收藏

      摘要:Diasys尿沉渣分析工作站可连续检测尿沉渣,具有稳定、精确、快速、安全、标准化等优点。我院于2002年12月引进该系统,在工作中发现尿液中的精子对流动计数室影响较大。报告如下。

    • 胱抑素C在糖尿病肾病早期诊断中的应用

      2006(3):240-240.

      摘要 (1135) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:临床上多用测定血清肌酐(SCr)和内生肌酐清除率(CCr)来分析肾小球滤过率(GFR),但影响它们的肾外因素很多。胱抑素C(Cystatin C)是一类小分子蛋白质,在体内由有核细胞产生,不受肾外因素的干扰,其产生速率恒定,且只通过肾小球滤过排泄,具备作为GFR理想标志物的条件,实验研究SCr、CCr、Cystatin C之间的相关性,以阐明Cystatin C在糖尿病肾病早期诊断中的应用价值。1材料和方法1.1病倒来源病理组为本院内分泌科住院糖尿病患者21例,以国际标准尿中白蛋白(MAU)的排出量30 mg/24 h为标准,分为肾功能正常组(A组)(MAU<30 mg/24 h)和肾功能损害组(B组)(MAu>30 mg/24 h);健康组80例,为本院体检健康者。

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