• 2007年第3期文章目次
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    • HER-2/neu、IFN-γ检测对良、恶性胸腔积液的鉴别价值

      2007(3).

      摘要 (395) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:良、恶性胸水的鉴别诊断是临床十分常见和棘手的问题。50%的肺癌病人在疾病过程中会出现胸水[1],即使经胸水脱落细胞学检查、胸膜穿刺活检、纤维支气管镜等反复检查后,仍有20%的胸腔积液病因不明,其中大多最终被确诊为癌性胸水[2]。我们对92例胸水进行HER-2/neu和IFN-γ含量检测,以探索鉴别良、恶性胸腔积液的新途径。1材料及方法1.1研究对象中南大学湘雅医院及湘雅三医院2003年~2005年住院的恶性胸水患者40例,均经病理细胞学检查或胸膜活检、纤支镜活检等确诊,其中腺癌25例、鳞状细胞癌10例、小细胞癌5例;结核性胸水患者40例,根据胸部X…

    • 以2-甲氧基-4-(2''-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷为底物测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性

      2007(3).

      摘要 (374) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 读者·作者·编者

      2007(3).

      摘要 (242) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • >专家论坛
    • 要重视血清酶学测定的标准化工作

      2007(3):161-164.

      摘要 (661) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目前临床以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天(门)冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、γ-谷氨酰基转移酶(γCT)、碱性磷酸酶(ALP)、淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)、腺苷脱氨酶(ADA)和胆碱酯酶(ChE)应用最为广泛.血清酶测定有免疫学方法和催化活性浓度测定法两种。正常人血中酶的含量一般都在pg或ng水平,以免疫学方法直接测定困难,测定过程缓慢又难以标准化。

    • >论著
    • 金纳米颗粒基因探针检测HBV DNA

      2007(3):165-167.

      摘要 (742) HTML (0) PDF 0.00 Byte (30) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA.方法 制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率.在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察.结果 制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520 nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524 nm.Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%.在液相中与HBVDNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体.结论 成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测.

    • 不同类型乙型肝炎患者HBV基因型的分布

      2007(3):168-169.

      摘要 (627) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)各种基因型在不同类型乙型肝炎患者中的分布.方法 用PCR结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测56例HBV感染的肝癌、58例肝硬化、60例慢性乙型肝炎患者以及60例HBV无症状携带者血清HBV基因型.结果 无症状携带者中B基因型为46.7%(28/60),C基因型为33.3%(20/60),D基因型为20.0%(12/60);慢性乙型肝炎组B基因型为41.7%(25/60),C基因型为36.7%(22/60),D基因型为21.7%(13/60);肝癌患者中B基因型为33.9%(19/56)、C基因型为60.7%(34/56)、D基因型为5.4%(3/56);肝硬化患者中B基因型为31.0%(18/58)、C基因型为63.8%(37/58),D基因型为3.5%(2/58).结论 在慢性乙型肝炎和无症状携带者中以B基因型为优势感染毒株,而肝硬化和肝癌患者则以C基因型为优势感染毒株.

    • 拟杆菌属细菌的分子生物学鉴定

      2007(3):170-171.

      摘要 (930) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 用聚合酶链反应(PCR)技术鉴定拟杆菌.方法 以该属细菌的标准16S Rrna基因序列为靶基因设计通用引物,对该属标准菌株及不同来源的临床株进行PCR扩增,然后对扩增产物进行基因测序验证引物的特异性和敏感性.结果 设计的引物能扩增13株拟杆菌,而40株肠杆菌科细菌、本实验室分离和保存的其他非拟杆菌不能被扩增;13株拟杆菌所得的PCR产物经基因测序、比对相应标准菌的16S Rrna,同源性在81%~100%.结论 建立的方法可特异的鉴定拟杆菌,敏感性为100个细菌的基因组.

    • 高效液相色谱法定量分析HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

      2007(3):172-173.

      摘要 (779) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对高效液相色谱法(HPLC)定量分析血红蛋白A2(HbA2)用于筛查β珠蛋白生成障碍性贫血(地中海贫血,地贫)基因携带者做出方法学评价.方法 地贫筛查中随机选择的75对夫妇及140对地贫高危夫妇,以地贫基因分析结果为金标准,通过比较样品内和样品间HbA2的HPLC测定值的变异系数评价该法的精密度和稳定性;通过分析阳性样品的基因型评价HPLC检测地贫的准确性.结果 用HPLC分析当地健康成人的HbA2的95%频数分布范围为2.28%~3.42%,HPLC诊断β地贫杂合子的HbA2临界值(cut off value)为≥4.35%.在基因分析确诊的65例β地贫杂合子、19例αβ复合地贫、2例HbE病及8例HbH病中,HPLC仅1例漏诊,无误诊.结论 高效液相色谱法是一种快速、稳定性强、精密度好的HbA2测定方法,可用于β地贫杂合子的筛查.

    • 检测尿液CK20的胶体金试条研制及初步应用

      2007(3):174-176.

      摘要 (722) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立用于筛查膀胱癌的尿液细胞角蛋白20(CK20)单克隆抗体胶体金检测试条,并与常用方法比较.方法 用自行研制的CK20单克隆抗体,建立检测CK20的胶体金试条,对膀胱移行细胞癌(TCC)、泌尿系统良性疾病和健康人尿液进行检测,同时与尿液膀胱癌金标检测板(UBC)和膀胱肿瘤抗原(BTA)检测板的检测结果比较.结果 CK20试条法与UBC、BTA法的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比之间均无显著性差异(P>0.05).3种方法敏感性随TCC病理分级而增高,但3法差异不显著(P>0.05).对20例TCC患者术后监测,3法结果也一致.结论 CK20试条法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速,一般实验室可开展的特点,可用于膀胱癌快速筛查和疗效观察.

    • >质量管理
    • 2005~2006年江苏省采供血机构血液检验室间质量评价分析

      2007(3):176-176,206.

      摘要 (526) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:江苏省血液中心于2005年和2006年上半年3次发放室间质控品,对全省28家采供血机构(其中血液中心2家,中心血站12家,基层血站12家,中心血库2家)进行血液检验能力的室间比对,现将结果总结如下.

    • >论著
    • 人血浆DNA双重实时荧光定量PCR检测法的建立

      2007(3):177-179.

      摘要 (585) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立带有内参照的双重实时荧光定量PCR方法检测血浆DNA含量.方法 构建重组质粒DNA作为内参照物,采用共用下游引物的双重实时荧光定量PCR技术同步扩增人看家基因β-actin和重组质粒载体中人工合成DNA序列,定量检测健康成年人血浆DNA含量.结果 本法能在同一个反应管中对目的基因和内参照进行同步扩增,两者的扩增无相互干扰,特异性好;重组质粒DNA的平均扩增效率达90%,β-actin基因的平均扩增效率接近100%;本法批内变异系数(CV)11%,批间CV17%.结论 成功建立含有内参照的双重实时荧光定量PCR方法,可对血浆DNA进行定量检测.

    • 丽春红S共振光散射光谱法测定尿蛋白

      2007(3):180-181.

      摘要 (444) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立一种快速灵敏的尿蛋白质测定方法.方法 以Ph 4.2 B-R缓冲液为介质,在λex=λem=306 nm测定丽春红S(poncesu S,PS)与蛋白质结合产物的共振光散射(RLS)强度,用清蛋白标准液绘制工作曲线.结果 结合物RLS强度与蛋白质浓度成线性关系,直线回归方程:△I=2.24c-0.41,相关系数r=0.999,线性范围为0~1 500 mg/L,最低检测限1.48mg/L.平均回收率为102.8%,批内、批间变异系数分别为2.09%、5.40%.标本测定结果与丽春红S法相比无显著差异.结论 丽春红S共振光散射法测定尿蛋白,方法简单、快速、灵敏度高.

    • PCR阻断联合荧光探针检测HBV基因前C区G1896A突变株

      2007(3):182-184.

      摘要 (475) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究和评估PCR扩增阻断联合荧光探针检测乙型肝炎病毒(HBV)基因前C区1896位点突变的新方法.方法 根据HBV DNA前C区1896位点的突变设计一系列引物,引物3′末端位于1896位,并与突变模板1896位碱基互补.在引物的倒数第2及第3位碱基设计为错配碱基,以增加反应的特异性.结果 以2个错配碱基的突变型引物对野生型质粒进行PCR扩增,具有显著的阻断作用,对1896位突变型质粒无阻断作用,而且对其检测的最低拷贝数可达5×10^3拷贝/ml.选用该引物对95例随机采集的HBv阳性标本进行HBV前C区G1896A位碱基突变的检测,8例为阳性,其突变率为8.4%.结论 本法在临床标本检测中是一种有效的和简便的方法.

    • >调查研究
    • 大连地区乙型肝炎病毒基因型与病毒复制水平调查

      2007(3):184-184.

      摘要 (327) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:乙型肝炎病毒(HBV)可分为8个基因型(A-H),呈一定的地理区域性分布.不同基因型之间的病毒载量、生化和组织学、病情的转归,以及药物治疗的反应都有一定的差异.本文对HBV感染者的血清进行基因分型,以了解大连地区HBV基因型分布与HBV DNA复制水平,现报告如下.

    • >实验研究
    • 人源多肽抗生素LL-37真核表达载体的构建

      2007(3):185-188.

      摘要 (537) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 构建抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,转化毕赤酵母GS115以获得表达LL-37的工程菌.方法 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽LL-37的基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,PCR鉴定及序列分析后转化毕赤酵母GS115.MM、MD平板筛选His^+Mut^+、His^+Mut^-表型,PCR扩增鉴定基因的插入.结果 PCR鉴定及序列分析表明抗菌肽LL-37基因正确插入载体pPIC9,MM、MD平板筛选及PCR鉴定获得10个His^+Mut^+、9个His^+Mut^-克隆.结论 获得含LL-37基因的工程菌.

    • >经验交流
    • STA-R全自动血凝仪检测孕妇vWF方法的改进

      2007(3):188-188.

      摘要 (430) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:用法国STA全自动血凝仪测定vWF(血管性血友病因子)活性时,血浆先进行1∶2稀释,当vWF活性>105%时仪器自动进行1∶8稀释测定得出测试结果.妊娠时vWF活性增高,尤其是妊娠高血压综合征(妊高征)患者,一般均>105%,因此本文建立一种新的孕妇vWF检测方法.

    • >实验研究
    • 维生素K3诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡及其survivin基因表达的变化

      2007(3):189-191.

      摘要 (827) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 观察维生素K3(VK3)对人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡的影响及其survivin基因表达的变化.方法 CCK 8试剂检测VK3对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33342荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察凋亡细胞核的形态,用流式细胞仪检测细胞凋亡率(Annexin V/PI法),RT-PCR法检测SMMC-7721细胞survivin mRNA的表达水平.结果 (2、5、10、20、25μmol/L)VK3作用SMMC-7721细胞48 h后,生长抑制率分别为33.8%、50.1%、63.9%、78.5%、84.7%;细胞的凋亡率分别是33.28%、63.97%、77.69%、87.30%、92.40%;survivin mRNA在凋亡的SMMC-7721细胞内的表达明显下降.结论 VK3能抑制SMMC-7721细胞增殖,并诱导其发生凋亡,survivin表达水平的下降可能与VK3诱导的SMMC-7721细胞凋亡有关.

    • CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞TH1/TH2细胞因子的表达

      2007(3):192-193,196.

      摘要 (382) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞(PBMC)中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平.方法 取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24 h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平.结果 CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用.培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高(P<0.01),IL-2、IL-4和IL-10无明显改变(P>0.05).结论 CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答.

    • 荧光定量两探针法检测HCV RNA的研究

      2007(3):194-196.

      摘要 (576) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立荧光定量两探针检测HCV RNA方法.方法 对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较.结果 荧光定量两探针法阳性率分别为89.5%(94/105)和2.3%(5/220).两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4%(75/105)和0.45%(1/220);69.5%(73/105)和1.8%(4/220).结论 荧光定量两探针法检测HCV RNA有较高的敏感性和特异性.

    • 猪链球菌2型感染动物模型的建立

      2007(3):197-198.

      摘要 (665) HTML (0) PDF 0.00 Byte (19) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 用猪链球菌2型经不同途径感染小鼠,研究其感染途径,建立动物模型.方法 6周龄小鼠分别经腹腔注射丝裂霉素0.2 mg/只,降低其免疫力,然后分别经皮肤创面、灌胃和腹腔注射猪链球菌2型,同时以粪肠球菌ATCC 29212作对照,进行临床观察和微生物学检查.结果 猪链球菌2型经口灌胃感染的小鼠病死率60%,病死日7~10 d.经皮肤创面感染的小鼠病死率60%,病死日2~5 d.从病死鼠的心脏穿刺液中均分离到猪链球菌2型.经腹腔注射猪链球菌2型的小鼠和对照小鼠未见死亡.结论 猪链球菌2型经消化道和皮肤创面可以感染免疫力低下的小鼠,呈现猪和人感染该菌后的部分症状,并可引起超过半数小鼠的死亡.

    • >研究生园地
    • 不同甲基化检测技术对模拟肺癌患者血浆中APC基因甲基化的检测

      2007(3):199-201.

      摘要 (809) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研究模拟肺癌患者血浆DNA中APC基因甲基化最低检测限,确定不同甲基化检测技术在早期肺癌诊断中的价值.方法 用普通甲基化特异性基因扩增(methylation specific PCR,MSP)方法检测肺癌细胞株NCI-H460细胞APC基因,以酚-氯仿经典方法提取NCI-H460细胞DNA,紫外分光光度计定量并以10倍稀释的浓度梯度依次投入相同的健康人血浆200μl中去,得到模拟肺癌患者血浆,利用磁珠核酸提取方法从模拟血浆样本中提取血浆DNA.对血浆DNA模板进行亚硫酸氢盐化学修饰,并以Sybr-Green Ⅰ为染料进行实时荧光定量MSP检测,同时进行普通MSP检测.结果 NCI-H460细胞中的APC基因启动子1A区719位点存在甲基化,实时荧光定量MSP检测模拟肺癌患者血浆APC基因甲基化的最低检测限为在200 μl血浆中能检测出10^2个肿瘤细胞的DNA,而以普通MSP检测,200 μl血浆中需投入10^3个以上肿瘤细胞的DNA才有弱阳性条带.实时荧光定量MSP检测技术比普通MSP检测的敏感性至少高出10倍.结论 实时荧光定量MSP比普通MSP检测灵敏度高,该技术用于肺癌患者血浆DNA甲基化检测,可能有助于肺癌早期诊断.

    • 改良的纸片表型筛选法用于AmpC酶的检测

      2007(3):202-203.

      摘要 (644) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立并评价一种检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶的新方法.方法 采用改良的纸片表型筛选法,以头孢西丁三维试验和多重PCR法作为对照,对临床分离的耐第三代头孢菌素的164株大肠埃希菌和40株肺炎克雷伯菌进行AmpC酶的检测.结果 164株大肠埃希菌中,改良的纸片表型筛选法检出8株产AmpC酶的阳性菌株(8/164,4.88%),其中有2株同时产ESBLs酶;40株肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶菌株,但检出2株(2/40,5.00%)诱导产AmpC酶菌株.头孢西丁三维试验在大肠埃希菌中检出AmpC酶阳性菌株8株(8/164,4.88%),在肺炎克雷伯菌中未检出产AmpC酶株.多重PCR法检出大肠埃希菌AmpC酶耐药基因阳性9株(9/164,5.49%),肺炎克雷伯菌阳性2株(2/40,5.00%).结论 改良的纸片表型筛选法可用于检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶和诱导产酶株,并可同时检测产ESBLs酶菌株,该法操作简便、结果可靠、无需特殊仪器,可在普通临床实验室应用.

    • 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型与耐药性分析

      2007(3):204-206.

      摘要 (728) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解本地区MRSA菌株SCCmec基因型分布和各种基因型的耐药特征.方法 用PCR扩增SCCmec分型的特征性基因,对MRSA菌株分型;采用Vitek 32微生物分析仪检测MRSA对抗菌药物敏感性.结果 84株MRSA菌株中包括SCCmecⅡ型9株(10.7%),SCCmecⅢ型70株(83.3%),SCCmecⅣ型5株(6.0%).所有菌株对利福平的耐药率均较低,对万古霉素和利奈唑烷完全敏感,各型别间无显著差异(P>0.05),对其他非β-内酰胺类抗菌药物的耐药率由高到低分别为SCCmecⅢ型、SCCmecⅡ型和SCCmecⅣ型,SCCmecⅡ型和Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,其耐药率显著高于SCCmecⅣ型(P<0.05).结论 SCCmecⅢ型菌株为本地区MRSA主要流行菌株,该型菌株对抗生素呈多重耐药.

    • TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血单个核细胞TRAIL-mRNA

      2007(3):207-209.

      摘要 (768) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×10^3~2.9×10^9)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P<0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.

    • 慢性髓细胞白血病增殖细胞核抗原基因的异常表达

      2007(3):210-211,214.

      摘要 (590) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解慢性髓细胞白血病(CML)基因表达谱规律,对在CML中高表达的PCNA基因进行分析鉴定.方法 应用基因表达谱芯片技术,对CML患者和正常人的外周血单个核细胞(PBMC)基因表达差异进行分析.对于其中表达显著上调的增殖细胞核抗原(PCNA)基因,根据其核苷酸序列设计并合成该基因序列特异性引物,以CML PBMC的总RNA为模板,RTPCR技术扩增PCNA基因;用蛋白印迹法分析PCNA蛋白的表达.结果 从4 096个基因中筛选出差异表达基因共591奈,其中288条基因表达增强,303条基因表达降低.在表达增高的基因中,PCNA表达增高8.725倍.在病人的标本中扩增出PCNA基因,蛋白印迹证明CML病人PCNA蛋白表达增高.结论 基因表达谱芯片检测发现CML中PCNA基因高表达,并在mRNA转录水平及蛋白表达水平证明其异常表达,提示PCNA的表达增高与CML的发病存在一定的关系.

    • 实时定量逆转录PCR在白血病标志物检测中的应用

      2007(3):212-214.

      摘要 (543) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)检测各种急慢性白血病的特征性分子生物学标志物,评价其在疾病诊断和微小残留病(MRD)监测中的意义.方法 设计TaqMan探针和引物,建立RQ-RT-PCR法对各种融合基因转录本和ABL阳性模板进行扩增,并检测177份白血病标本的转录本含量,同时做细胞遗传学检查.结果 RQ-RT-PCR法最低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但重复性较差,而(10^8~10^2)拷贝/μl的重复性良好,正常对照无扩增信号.与细胞遗传学相比,RQRT-PCR的敏感性和特异性更强,对白血病标志物的阳性检出率更高.对12例不同类型白血病患者的MRD随访监测表明:患者体内融合基因转录本的含量随病情进展逐渐升高,随病情好转逐渐下降,并且早于细胞遗传学预测疾病复发.结论 RQ-RT-PCR方法更敏感、可靠,与疾病的关系更密切,可用于白血病的诊断和MRD随访.

    • 不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA表达水平的研究

      2007(3):215-217.

      摘要 (549) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,研究不同分期胃癌患者外周血淋巴细胞Foxp3 mRNA的表达水平.方法 普通RT-PCR结合胶回收制备Foxp3 mRNA-CDS标准品,利用标准品制备定量PCR标准曲线,对曲线进行灵敏度、精密度和特异性分析,用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测40例胃癌和8例正常对照外周血Foxp3 mRNA.结果 获得Foxp3全长CDS标准品,标准曲线范围(2.8×10^2)~(2.8×10^8)拷贝/μl,最低检测值280拷贝/μl,批内和批间变异系数(CV)<5%.Foxp3基因在胃癌患者外周血表达水平显著高于健康对照(P<0.01),表达水平与肿瘤分期显著相关(P<0.05).结论 Foxp3基因上调表达与胃癌的发生、发展和预后有关.

    • >实验技术
    • 黏滑口腔球菌快速鉴定的方法学探讨及耐药性检测

      2007(3):218-219.

      摘要 (483) HTML (0) PDF 0.00 Byte (30) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对临床标本中分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,试图建立一种简便的鉴定黏滑口腔球菌的方法,并了解其对临床常用的7种抗生素的耐药特性.方法 常规方法分离菌株,对分离株进行系统的生化鉴定,同时采用K-B法对分离菌株的耐药性进行检测,参考CLIS标准(2006年)中葡萄球菌的药敏判断标准进行判断.结果 从临床标本中分离出246株黏滑口腔球菌,该菌菌落大多牢固黏附于血琼脂平板上,灰白色、不溶血,镜下多呈四联状排列,革兰阳性,也可见成双排列者,触酶阴性,在50 g/L NaCl琼脂上不生长,杆菌肽、呋喃唑酮均敏感,据此可予以简单、快速鉴定.黏滑口腔球菌对β-内酰胺类抗生素敏感,β-内酰胺酶阴性.结论 通过对分离的246株黏滑口腔球菌进行系统鉴定,总结出可以利用菌落黏性、镜下形态、触酶试验等简便的鉴定试验对临床标本中的黏滑口腔球菌进行快速鉴定.

    • 以2-甲氧基-4-(2′-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷为底物测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性

      2007(3):220-221.

      摘要 (999) HTML (0) PDF 0.00 Byte (30) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 评价以2-甲氧基-4-(2′-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MNP-NAG)为底物的全液体试剂两点终点法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性.方法 尿样中NAG作用于底物MNP-NAG水解产生游离MNP,其生成速率与酶活性在一定范围内成正比.结果 该法显色最大吸收波长为505 nm,试剂1和试剂2最适pH值分别为4.6和10.2,最适底物浓度为16 mmol/L,线性范围达198 U/L,批内变异系数(CV)和批间CV分别为2.2%和3.8%.166例健康体检者尿样NAG活性参考范围为:(6.21±4.53)U/gCr(-↑x±1.96 s).结论 MNP-NAG底物法测定尿NAG灵敏度高,操作简便,结果可靠,适合临床应用.

    • 用β葡萄糖苷酶快速鉴定细菌和假丝酵母菌

      2007(3):222-222.

      摘要 (346) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:β葡萄糖苷酶在传统细菌学鉴定中很少应用.近年由于人工合成了此酶的色原底物,已较多地用于自动或人工细菌鉴定装置而受到重视.我们用国产底物建立了此酶的快速检测法并用于细菌和假丝酵母菌的鉴定,报告如下.

    • >检验与临床
    • 原发性胆汁性肝硬化患者外周血颗粒溶素表达增高及其意义

      2007(3):223-224.

      摘要 (506) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)中外周血颗粒溶素的表达及意义.方法 用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测60例PBC患者颗粒溶素的mRNA表达,用ELISA法检测血清中颗粒溶素水平,以100例体检健康者、80例肝炎后肝硬化患者和80例SLE患者为对照组.结果 PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中颗粒溶素mRNA的平均拷贝数(2.8±1.9)×10^8高于肝炎后肝硬化患者(5.6±2.9)×10^6、SLE患者(9.5±2.4)×10^6和体检健康者(2.5±1.4)×10^6(P<0.01).血清中颗粒溶素的水平为(16.12±2.24)ng/ml,也显著高于体检健康者、肝炎后肝硬化患者、SLE患者.结论 FQ-PCR法检测颗粒溶素的mRNA水平及ELISA方法检测血清中颗粒溶素的浓度,有助于了解PBC患者体内免疫状态,为临床诊治和研究提供依据.

    • >经验交流
    • 多台血液分析仪对低值血小板测定结果比较

      2007(3):224-224,235.

      摘要 (496) HTML (0) PDF 0.00 Byte (34) 评论 (0) 收藏

      摘要:血液分析仪经新鲜血校准后,参考范围内测定值准确度高,随血小板降低,准确度降低.对于血液病及放、化疗低血小板患者,临床医生结合观察临床体征及其他出凝血指标,可更好理解血小板测定值.

    • >检验与临床
    • 常规凝血纤溶实验指标在DIC诊断中的应用

      2007(3):225-226.

      摘要 (386) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagulation,DIC)的实用实验诊断指标.方法 收集临床确诊的DIC患者33例,早期可疑DIC最后确诊为DIC的患者30例,体检健康志愿者35例进行检测.用凝固法检测凝血酶原时间(PT)、激活部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT),用免疫比浊法检测血浆D-二聚体(D-D),乳胶凝集半定量试验检测纤维蛋白(原)降解产物(FDP),发色底物法检测抗凝血酶活性(AT:A).结果 DIC患者组D-D和FDP显著升高,AT:A显著下降,PT、APTT、TT均显著延长;D-D和FDP的阳性率均达100%,AT:A和血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3 P)的阳性率分别为88%和82%,与早期可疑DIC组及正常对照组比较有统计学意义(P<0.05).在早期可疑DIC阶段,D-D、AT:A、FDP的阳性率分别为87%、63%和53%,而PT、APTT、TT、3P试验的异常率仅为40%、33%、23%和20%.结论 D-D、FDP、AT:A检测在DIC早期诊断中具有重要价值,敏感性高于PT、APTT、TT等.

    • HER-2/neu、JFN-γ检测对良、恶性胸腔积液的鉴别价值

      2007(3):227-227.

      摘要 (346) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:良、恶性胸水的鉴别诊断是临床十分常见和棘手的问题.50%的肺癌病人在疾病过程中会出现胸水,即使经胸水脱落细胞学检查、胸膜穿刺活检、纤维支气管镜等反复检查后,仍有20%的胸腔积液病因不明,其中大多最终被确诊为癌性胸水.我们对92例胸水进行HER-2/neu和IFN-γ含量检测,以探索鉴别良、恶性胸腔积液的新途径.

    • FQ-PCR检测C-erb B2基因表达水平在乳腺癌诊断中的应用

      2007(3):228-228.

      摘要 (380) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:本研究用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR,通过扩增乳腺癌相关基因C-erb B2 mRNA,对139例不同疾病患者及40例健康志愿者外周血中C-erb B2 mRNA表达情况进行分析,探讨FQ-PCR检测在C-erb B2 mRNA乳腺癌诊断中的应用,现报道如下.

    • 孕妇血浆纤维蛋白原、D-二聚体和AT-Ⅲ动态检测的临床意义

      2007(3):229-229.

      摘要 (733) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:妊妇常处于生理性高凝状态,超出一定范围的高凝便是病理变化,如妊娠高血压综合征(妊高征)时出现的异常高凝状态.本研究检测了133例妊妇不同时期的纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(DD)和抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)含量,以探讨妊娠期间凝血和纤溶功能动态变化,为预防和诊断妊高征提供帮助.

    • 血清S-100 B蛋白在脑实质损伤与脑血肿中的诊断价值

      2007(3):230-230.

      摘要 (357) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:研究表明,S-100B蛋白对中枢神经系统的损伤有高度的敏感性和特异性,其含量变化与临床病理及影像学改变密切相关,是颅脑损伤较好的生物化学标志物.我们通过测定40例颅脑损伤患者血清S-100B蛋白的浓度,观察其在脑实质损伤和脑血肿的临床诊断及预后判断中的意义.

    • >质量管理
    • 葡萄糖即时检验院内室间质控品的制备和评价

      2007(3):231-232.

      摘要 (996) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 配制葡萄糖即时检验室间质控品并做评价.方法 肝素抗凝全血即刻分离血浆,在日立7600-110生化仪上测定葡萄糖作为对照组,剩余的全血联合加入多种抗糖酵解剂,并在室温(22℃)保存2、8、24、48 h后测定葡萄糖的浓度,在生化仪、雅培MediSense Optium^TM快速血糖仪、强生SureStepTM Plus稳步型血糖仪、罗氏Glucotrend 2乐康全血糖仪上测定,并将各仪器各时间段的结果作组间比较.结果 含有复合抗酵解剂的全血标本,可使血中葡萄糖浓度在24 h内保持稳定,24 h内各时间段之间的结果差异无显著性意义(F=1.52,P>0.05);48 h的葡萄糖结果有所下降,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01).结论 自制的葡萄糖即时检验室间质控品配制简单,葡萄糖浓度24 h内保持稳定,且不会干扰快速葡萄糖仪的测定,符合葡萄糖即时检验室间质控要求.

    • >实验室管理
    • 指纹识别技术在实验室信息系统中的应用

      2007(3):233-233.

      摘要 (564) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:1 密码验证在实验室信息系统(LIS)中应用的局限性   LIS首先要考虑的是安全性问题.在病历、医疗纠纷和药物验证中,检验数据是有法律作用的证据,在LIS中正确辨认人员的身份是极其重要的.

    • >质量管理
    • 新鲜全血用于多台血液分析仪校准的效果评价

      2007(3):234-235.

      摘要 (352) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:同一实验室的多台血液分析仪,由于生产厂家、型号、使用年限、检测原理等诸多因素的影响,同一份标本在各台仪器上的检测结果差别较大.我们用新鲜全血为校准物对本室的四台血液分析仪进行了校准和评价,结果报道如下.

    • >调查研究
    • 直接抗球蛋白试验阳性对ABO及Rh血型鉴定的干扰

      2007(3):236-237.

      摘要 (582) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:直接抗球蛋白试验(DAT)阳性患者,由于红细胞上存在致敏自身抗体和/或血清中存在游离的自身抗体,干扰血型鉴定、抗体筛查及交叉配血.本文探讨DHA阳性对ABO及Rh血型定型的干扰.

    • >产品应用研究
    • FE复合酶对临床分离微生物的体外抑菌试验观察

      2007(3):237-237.

      摘要 (333) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:FE复合酶是一种新型抗菌剂,为溶葡萄球菌酶和多种辅酶复配而成,为了解其对临床常见微生物的抗菌效果,对临床分离的100株微生物进行了药物敏感试验并与其他抗生素作对比分析,结果如下.

    • >个例报告
    • 痰涂片镜检辅助诊断单纯性肺嗜酸性粒细胞浸润症1例

      2007(3):238-238.

      摘要 (390) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:1.1 临床资料 杜某,女性,52岁,于2006年10月初受凉后出现低热,最高37.5℃,伴有咳嗽,全身乏力不适,无鼻塞流涕,无咳痰,外院予以抗生素治疗,体温降至正常,但咳嗽未见好转,逐渐加重,咳少量白痰,夜间明显。11月21日外院胸片示右上肺野片状密度增高影;血常规示WBC10.8×10^9/L,N0.448.L0.128。M0.047,E0.356,B0.O009,RBC4.12×10^12/L,Hb131g/L,PLT210×10^9/L。2006年11月22日我院门诊拟诊“右上肺阴影待查,嗜酸性粒细胞性肺炎?”收治住院。[第一段]

    • >检验与临床
    • 血清高半胱氨酸水平与糖尿病微血管病变的相关性分析

      2007(3):239-239.

      摘要 (455) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:高半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是人体内的一种含硫非必需氨基酸,是蛋氨酸的代谢物.Hcy是冠心病的独立危险因素的报道较多,与糖尿病的相关性的研究也已经开展.本文对124例不同微血管病变糖尿病(DMAP)患者Hcy水平进行检测,探讨高Hcy血症与DMAP相关性.

    • >经验交流
    • 单克隆IgM、IgG混合抗D血清在Del鉴定中的应用

      2007(3):240-240.

      摘要 (470) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:Del即D洗脱阳性,是指部分D抗原阴性者的红细胞和抗D抗体做吸收放散试验时,证实这些D阴性的红细胞上带有微弱的D抗原。如将他们的红细胞输给Rh(D)阴性者,后者可能会产生抗D抗体。我们用3种不同厂家的单克隆混合抗D血清与人源性抗D血清作对比,对40例Rh(D)阴性者行Del鉴定,以确定单克隆IgM、IgG混合抗D血清鉴定Del的价值,现报告如下。

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