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摘要:摘要：目的：利用白念珠菌烯醇化酶重组蛋白质为抗原，建立测定人血清中抗白念珠菌烯醇化酶IgG类抗体的ELISA法，评估其在侵袭性念珠菌病（IC）诊断中的应用价值。 方法：收集各类确诊IC患者（66例）和白念珠菌定植者（32例）血清，用重组白念珠菌烯醇化酶包被ELISA微孔板，测定血清中的抗烯醇化酶抗体，确定cut off值并对方法的精密度和特异性进行考察。 结果：以重组烯醇化酶抗原建立的ELISA法批内变异系数(CV）为5.7%，批间CV为14.6%；重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为93.0%。经ROC曲线分析，选择吸光度值0.37作为cut off值，对IC的诊断敏感性为77.3%，特异性为98.0%。念珠菌定植者阳性率为31.3%(10/32)，IC患者阳性率为77.3%(51/66),两组差异有统计学意义（P<0.05）。动态观察发现，IC患者中47.0%(31/66)可以在血培养阳性前检测到抗烯醇化酶抗体。 结论：建立了检测抗白念珠菌烯醇化酶抗体的ELISA法，在IC早期诊断中具有潜在应用价值。

摘要:摘要：目的：用微量稀释法检测念珠菌对抗真菌药物敏感性，比较肉眼观察和体视显微镜观察结果的优缺点及一致性。 方法：参考美国临床实验室标准化委员会（CLSI）的微量稀释法M27-A3，检测203株念珠菌对4种唑类药物（咪康唑、酮康唑、益康唑、联苯苄唑）及4种非唑类药物（制霉菌素、利拉萘酯、萘替芬、特比萘芬）的体外敏感性，并同时用肉眼和体视显微镜两种方法观察结果。 结果：唑类药物两观察方法结果的一致性为 87.7%~96.1%；非唑类药物的一致性为91.6%~99.5%。与肉眼观察法比较，体视显微镜成像有立体感，可以观察到肉眼看不见的微量菌生长，易于区分待测菌和污染菌生长。除利拉萘酯、萘替芬和联苯苄唑外，咪康唑、酮康唑等均对念珠菌有良好的体外抑菌作用。 结论：微量稀释法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性，体视显微镜观察与肉眼读取结果有较好一致性，两种方法结合有助于判断念珠菌对抗真菌药物的敏感性。

摘要:摘要：目的:制备白念珠菌烯醇化酶N端基因重组肽段ENO1-319P并检测其抗原性。 方法:选择与人烯醇化酶蛋白α-ENO同源性低的白念珠菌烯醇化酶肽段ENO1-319P，将其编码DNA序列克隆到表达载体pET28a(+)，并在大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导带有His标签的重组肽段的表达。用SDS-PAGE电泳分析，TALON金属亲和层析柱纯化重组蛋白，其抗原性用侵袭性白念珠菌感染（ICAI）患者血清进行western blot评估。 结果:成功表达并纯化了目的肽段，该蛋白可与ICAI患者血清发生特异性反应。 结论:获得了白念珠菌烯醇化酶N端肽段ENO1-319P的基因表达工程菌株，为将此重组肽段用于制备特异性更高的抗体打下基础。

摘要:摘要：目的：探讨血浆1,3-β-D-葡聚糖的检测（G 试验）对侵袭性真菌感染（IFI）的早期诊断价值。 方法：收集2009年6月至2010年3月IFI患者113例，非真菌感染者44例，体检健康者53例。采用MB-80微生物动态快速检测系统及配套G试验试剂盒定量检测血浆1,3-β-D-葡聚糖的含量，用ROC曲线进行评估。 结果：IFI组的1,3-β-D-葡聚糖水平显著高于对照组，而两对照组之间水平无显著差异；ROC曲线分析，1,3-β-D-葡聚糖的临界值定为 25.3 pg/mL时，其敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为84.1%、90.0%、89.4%、84.9%，可达最佳诊断效果。 结论：血浆1,3-β-D-葡聚糖检测是IFI实验室诊断的有效方法。

摘要:摘要：目的：探讨盐水介质试管法（试管法）、ABO正反定型/RhD定型卡（血型卡）和低离子/抗人球蛋白微柱凝胶卡（LISS/Coombs卡）在ABO血型不合造血干细胞移植（HSCT）患者血型鉴定中的应用价值，指导临床安全输血。 方法：以血型卡、试管法和LISS/Coombs卡对24例ABO不合造血干细胞移植患者血型抗原、抗体进行监测，评价3种方法监测血型的优缺点。 结果：血型卡与试管法均能检出非受者型红细胞，但前者能观察供、受者红细胞嵌合比例的变化，且不受主、次侧移植模式的限制。直接抗人球蛋白试验（DAT）阳性将影响LISS/Coombs卡正定型结果的判读，但其监测抗供者IgG抗体通常较试管法监测IgM抗体延后消失。首次检出供者红细胞的时间主侧平均为36 d、次侧平均为20 d，血型完全转变为供者型的时间主侧为11~22周，次侧为10~13周。 结论：血型卡能满足ABO不合HSCT患者血型抗原嵌合体的监测，但易漏检抗供者IgG抗体。为保障输血安全，建议在主侧不合移植者反定IgM抗体消失后增加IgG抗体的监测。

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摘要:摘要:目的：建立甲基化敏感性限制性内切酶-PCR(MSRE-PCR )法检测OPCML基因，探讨其在卵巢癌中的意义。〖HT5”H〗方法〖HT5”K〗〓用亚硫酸氢钠修饰测序法检测5例卵巢癌组织及正常卵巢组织中OPCML基因甲基化，分别用MSREPCR和巢式甲基化特异性PCR (MSP)检测组织DNA中OPCML基因甲基化发生率。〖HT5”H〗结果〖HT5”K〗〓DNA序列中存在6个Bsh1236I酶切位点，酶切24 h能完全消化非甲基化DNA，MSREPCR和巢式MSP检测卵巢癌组织中OPCML基因甲基化发生率分别为86.7 %和84.4 %，正常卵巢组织两法均阴性。〖HT5”H〗结论〖HT5”K〗〓MSREPCR检测卵巢癌组织OPCML基因甲基化发生率与巢式MSP相比没有显著性差异，是一种操作简便、敏感的甲基化检测方法。

摘要:摘要:目的：建立实时荧光定量PCR(real-time PCR)法对唐氏综合征（DS）标准型与罗宾逊易位型进行鉴别诊断。 方法：收集17例体检健康者、17例典型DS标准型患者及6例DS罗宾逊易位型患者外周血，以人21号染色体短臂上张力蛋白同源转膜磷酸酶（TPTE）基因的特异性序列PMC310823P6为引物，并以胰岛素样生长因子-1（IGF-1）为内参照，real-time PCR 检测其表达水平。 结果：DS标准型患者血中TPTE水平（6.07±0.70）高于健康人对照组（2.21±0.40），差异有统计学意义（t=2.653,P<0.05）。DS罗宾逊易位型患者TPTE水平(1.30±0.30)低于健康人对照组(3.24±0.50)，差异有统计学意义（t=2.516,P<0.05）。 结论：经过进一步规范方法和扩大病例验证后，建立的real-time PCR法有望能快速诊断DS标准型，同时能鉴别罗宾逊易位型。

摘要:摘要：目的：评价3-氨基苯酚硼酸（APB）增强试验同时检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的效果。 方法：用加APB的头孢他啶、头孢噻肟、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸纸片检测31株产质粒型AmpC酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌合并产ESBLs情况，并与仪器法、经典方法(K-B法)检测ESBLs结果进行对比。同时采用此方法检测239株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs酶的情况。并采用加与不加APB的头孢他啶、头孢噻肟、头孢西丁检测其是否高产AmpC酶。 结果：31株产质粒型AmpC酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中合并产ESBLs酶的菌株，经典方法漏检ESBLs 6株，漏检率23.08%(6/26)。而Vitek-60微生物仪漏检率达65.38%（17/26）。239株菌中检测出产AmpC酶10株（4.18%）。其中有5株同时产ESBLs 酶和AmpC酶；产ESBLs 酶106株（44.35%）。 结论：目前产ESBLs、高产AmpC酶的菌株检出率较高，APB增强法能快速、简便、较准确检测同时产ESBLs和AmpC酶菌株，适合临床实验室应用。

摘要:摘要：目的：了解南昌地区多重耐药肺炎链球菌（Streptococcus pneumonia，SP）的分子流行病学特征。 方法：收集南昌地区3家教学医院临床分离的SP 66株，用盒式聚合酶链反应（BOX-PCR）对23株临床分离的SP进行基因分析；用多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST)对其中7株多重耐药SP进行分子遗传学分析，了解其与国际流行株关系。 结果：23株SP用BOXPCR检测共分为11型，15个亚型。7株多重耐药SP MLST分型共检出７种序列型，分别为ST320、ST236、ST983、ST790、ST5747、ST5748、ST5749，其中ST5747、ST5748、ST5749为国际上首次发现。 结论：南昌地区多重耐药SP增加是由于耐药克隆株的播散，主要克隆株来自国际流行克隆CC236 (Taiwan^19F-14 Clone)的传播。

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摘要:摘要：目的：探讨促乳素（PRL）对血小板功能的影响，了解PRL与脑梗死的关系。 方法：用含正常、中、高水平PRL的血浆复溶冻干洗涤健康人血小板，检测ADP诱导的血小板最大聚集率和CD62P阳性率；检测88例脑梗死患者和40例健康人血浆PRL水平及纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体（D-D）、vWF抗原（vWF:Ag）、C反应蛋白（CRP）、高半胱氨酸（Hcy）和平均血小板体积（MPV）等指标，分析其关联性。 结果：含正常、中、高水平PRL血浆间最大血小板聚集率和CD62P表达率间差异无统计学意义(P>0.05)；脑梗死组与对照组间PRL、CRP、Hcy、D-D水平差异有统计学意义(P<0.05)，MPV、Fib、vWF:Ag水平无统计学意义(P>0.05)。脑梗死患者CRP与PRL水平呈正相关(r=0.352，P<0.05)，与Fib、D-D、vWF:Ag、Hcy、MPV无相关性(P>0.05)。 结论：PRL与血小板活化关系不明显，但可能与某些炎症反应、血栓形成指标一起参与脑梗死发病过程。

摘要:摘要：目的：探讨非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者血清sB7H3的表达水平及其临床意义。 方法：用ELISA夹心法检测36例NSCLC患者和33例体检健康者血清sB7-H3的表达水平，同时检测上述标本中Cyfra21-1的含量进行比较。 结果：NSCLC患者血清sB7-H3水平为(92.7±33.6) ng/mL，健康对照组为（71.7±21.0）ng/mL，两者有显著性差异（t=2.756，P<0.01）；且NSCLC患者血清sB7-H3与Cyfra21-1的水平呈正相关，其敏感性（88.9%）和诊断效率（82.6%）均高于Cyfra21-1。 结论：sB7-H3在NSCLC患者血清中水平升高，其对NSCLC的诊断和病期进展的判断具有潜在的临床应用价值。

摘要:摘要：目的：探讨类风湿关节炎（RA）易感基因PTPN22-1123G>C多态性不同基因型别间血清葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）水平差异。 方法：采用ELISA法检测68例RA患者、69例非RA自身免疫性疾病(AID)患者和77例体检健康者血清GPI水平，PCR-RFLP技术检测PTPN22-1123G>C多态性分布。 结果：RA患者血清中GPI 浓度显著高于非RA AID患者和健康对照组（P均<0.01）。在RA活动组和非活动组，亦有显著差异（P<0.01）。PTPN22-1123G>C多态性位点在RA中的分布为：CC 19例、CG 25例和GG 24例，GG型RA患者的GPI浓度显著高于CC型（P<0.05）。 结论：PTPN22-1123G>C不同基因型RA患者血清GPI浓度具有显著性差异，提示T淋巴细胞的抗原刺激反应性对GPI浓度可能有影响。

摘要:摘要：目的：观察SLE患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF）及B淋巴细胞成熟抗原（BCMA）水平的变化，探讨其与SLE疾病活动性的关系，分析两蛋白质分子间的相关性。 方法：用ELISA测定32例活动期和20例非活动期SLE患者血清MIF、BCMA浓度，并以30例健康人作对照，观察SLE患者血清MIF、BCMA水平的改变，分析MIF、BCMA水平与疾病活动性及相互之间相关性。 结果：SLE患者血清MIF、BCMA水平较对照组显著升高，且与SLE疾病活动指数（SLEDAI）呈显著正相关（r分别为0.76和0.78，P值均<0.01）。SLE患者血清中BCMA浓度与抗dsDNA抗体、抗核抗体浓度显著相关（r分别为0.75和0.64），MIF浓度与抗dsDNA抗体显著相关（r=0.65），与抗核抗体浓度无显著相关性（r=0.15）。MIF与BCMA间无相关性。 结论：血清BCMA、MIF水平可作为反映SLE活动性的重要指标之一。T、B淋巴细胞活化均参与SLE发病机制，B淋巴细胞活化程度与SLE活动性有关。

摘要:摘要：目的：构建HSP70启动子与绿色荧光蛋白重组真核表达载体，并在人Chang′s肝细胞表达，建立一种新的体外药物肝毒性早期预测细胞模型。 方法：提取人Chang′s肝细胞基因组DNA，钓取HSP70启动子基因，构建重组载体，经脂质体转染人Chang′s肝细胞，用G418筛选稳定转染细胞，用荧光显微镜观察绿色荧光表达情况，用实时荧光定量PCR检测EGFP基因表达量的变化。 结果：成功钓取HSP70启动子基因并导入真核表达载体pEGFPN1；G418以300 ng/mL的终浓度筛选出稳定转染的单克隆细胞；荧光显微镜观察到肝毒性药物酮康唑刺激人Chang′s肝细胞后，可诱导HSP70启动子调控增强型绿色荧光蛋白发出绿色荧光，药物刺激组EGFP mRNA相对表达量与正常对照组比较有统计学意义（t=-14.21，P＜0.05）。 结论：成功构建HSP70启动子与绿色荧光蛋白共表达真核表达载体，获得稳定转染单克隆细胞，并证实HSP70在肝毒性药物刺激下的应激表达，为建立新的体外药物肝毒性早期预测细胞模型进行高通量筛选新药奠定了基础。

摘要:摘要：目的:分离并鉴定喉癌患者癌组织和癌旁组织的差异表达蛋白质，探讨喉癌发生、发展的分子机制。 方法:收集喉癌患者癌组织和癌旁组织标本各10例，二维电泳分离总蛋白质，鉴定有明显表达差异的蛋白质点，并对其进行质谱分析。 结果:获得了分辨率和重复性均良好的凝胶蛋白质图谱，筛选出46个有明显表达差异的蛋白质点，共有17个蛋白质点被成功鉴定，其中在喉癌组织中低表达的有5个，高表达的有12个。 结论:喉癌患者癌组织蛋白质的表达相对于癌旁组织存在明显差异，差异蛋白质的鉴定有望成为筛选喉癌特异性肿瘤标志物及药物治疗靶点的依据。

摘要:摘要：目的：探讨血管紧张素Ⅱ-1型受体（AT1R）1166A/C和醛固酮合酶（CYP11B2）-344T/C基因多态性与原发性高血压(EH)的相关性。 方法：用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）对100例EH患者和100例体检健康者AT1R 1166A/C和CYP11B2-344T/C基因多态性进行检测。 结果：EH组AT1R 1166A/C AC型和C等位基因的频率高于健康对照组；AC基因型的血压值、TG，TC，LDL-C均明显高于AA基因型。HDL-C低于AA型CYP11B2各基因型频率和等位基因频率无显著性差异（P＞0.05）。各组内等位基因T的频率高于等位基因C（P＜0.05）。两基因联合分析显示，相对于AA-TT联合基因型，同时携带AC-CT联合基因型的人群患高血压的危险性增加了2.25倍。 结论：AT1R 1166A/C多态性与EH易感性相关，CYP11B2-344T/C基因多态性与EH无关，携带T1R 1166A C型基因以及AC-CT联合基因型的人群患高血压的危险性大。

摘要:摘要:目的：检测蛋白酶激活受体2（proteaseactivated receptor 2， PAR2）和组织因子（tissue factor，TF）在反复自然流产（recurrent spontaneous abortion，RSA）患者外周血中性粒细胞的表达。 方法：用real-time PCR、western blot及TF活性分析方法，在mRNA、蛋白质及活性水平检测35例RSA患者和35例健康非孕或健康孕妇外周血中性粒细胞PAR2和TF的表达。 结果：与健康非孕或健康孕妇比较，RSA患者外周血中性粒细胞PAR2和TF在mRNA、蛋白质及活性水平均显著升高，且PAR2和TF mRNA水平呈明显正相关（r=0.864，P＜0.05），PAR2蛋白质水平与TF活性水平间有正相关关系（r=0.942，P＜0.05）。 结论：RSA患者外周血中性粒细胞高表达PAR2和TF，为进一步研究PAR2和TF在RSA中的作用提供了依据。

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摘要:摘要:目的：探索提高检验人员形态学辨识能力的长效机制。 方法：由血常规室、体液室和微生物室的资深形态学检验人员担任培训教师，形态学培训与考核每月交替进行；标本选择按照先易后难的原则；对每次人均得分情况、易错形态、人员和岗位等要素进行分析。 结果：在基本形态培训和少见、异常形态培训的2个阶段，人均得分均逐步提高。易错形态主要集中在血涂片中的少见、异常细胞，其次是尿液中的结晶。新、老员工考核得分相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；从事形态学工作的人员考核得分高于未从事形态学工作的人员，差异有统计学意义（P＜0.01）。 结论：持续的培训和考核是提高检验人员形态学辨识能力的有效措施之一，在强化形态学培训的同时，应注意加强岗位轮转。

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摘要:摘要：目的:观察卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)患者外周血中T_H17细胞与FOXP3⁺CD25^highCD4⁺调节性T(Treg)细胞比例及相关因子表达的变化并探讨其意义。 方法:取30例POF患者及12例健康妇女外周血，流式细胞术检测T_H17和Treg细胞占CD4⁺T细胞的比例；实时定量PCR测定外周血单个核细胞(PBMC)中T_H17和Treg细胞相关因子IL-17、RORγt、FOXP3、TGF-β、IL-1β及IL-6 mRNA的相对表达量。 结果:POF患者外周血中T_H17/CD4⁺T细胞的比例明显高于健康妇女(P<0.01)，Treg/CD4⁺T细胞的比例较健康妇女有增高趋势但无统计学差异，T_H17/Treg细胞比例的比值明显高于健康妇女(P<0.01)。POF患者PBMCs中，IL-17、RORγt、FOXP3的mRNA相对表达量明显高于健康妇女(P<0.01)，而IL-1β、IL-6则明显低于健康妇女(P<0.01,P<0.05)，TGF-β无明显差异(P>0.05)。 结论:POF患者可能处于一种TH_H17细胞明显增多并趋于优势地位的炎性状态，这一机制可能参与了POF的发生、发展，但其中细胞因子的作用尚待进一步研究。

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摘要:摘要：目的：用实验室间样本分割法作为替代方案，对我室尚未开展室间质量评价（EQA）的检测项目——总胆汁酸（TBA）和胆碱酯酶（ChE）进行结果一致性评价。 方法：收集40份门诊患者血清并分装，一式2份，同时在2个实验室内检测TBA和ChE，参照NCCLS GP29-A文件评估结果间的可接受程度。 结果：TBA的测定值均落在可接受范围内，室间一致性可接受；ChE的31个测定值落在可接受范围内，室间一致性不可接受。 结论：未参与EQA活动的检测项目可用样本分割法来评价实验室间测定值的一致性。

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