• 2013年第31卷第10期文章目次
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    • >述评
    • 提供耐药监测质量,指导临床合理用药

      2013, 31(10):721-722.

      摘要 (841) HTML (0) PDF 320.98 K (1743) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:细菌对抗菌药物的耐药现象日益严重,已成为世界性难题。进行全球范围内耐药监测是控制耐菌株出现和传播的重要手段。目前,国内外已建立多个细菌耐药监测网络。我国在耐药监测方面虽取得了长足进步,但仍需提高监测水平,建立主动耐药监测网。只有规范药敏试验操作,合理分析解读药敏试验结果,才能指导临床合理用药,并使各地区间药敏监测结果的比较成为可能。

    • >专家论坛
    • 提升微生物实验室能力,加强细菌耐药监测

      2013, 31(10):723-725.

      摘要 (691) HTML (0) PDF 362.95 K (1559) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:加强细菌耐药监测和临床微生物实验室能力建设是世界卫生组织抵御细菌耐药性的6项重要政策之一,也是临床合理应用抗菌药物的核心内容。我科临床微生物实验室以细菌耐药监测中存在的问题为改进切入点,从“建平台、抓人才、重规范、改模式”入手,通过优化实验室布局与流程、建立较完善的全程质量管理体系、加强人员培训与能力评估、改进岗位设置与工作模式等措施,提升实验室的专业服务能力,提高临床满意度。

    • 分析细菌耐药表型的专家系统刍议

      2013, 31(10):726-727.

      摘要 (712) HTML (0) PDF 309.71 K (1442) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:在抗菌药物滥用的背景下,细菌的耐药机制越来越复杂。面对如此庞大的信息库,即使是知识比较全面的技术专家也很难在短时间内根据耐药表型对耐药机制作出准确的判断。计算机软件系统为处理庞大繁杂立体化的数据提供了最有用的平台。目前的专家系统有条例式和表型符合式两种。条例式专家系统是根据药敏折点所划分的敏感、中介和耐药结论,对检测结果是否准确和涉及的耐药机制进行推断;表型符合式专家系统是将分离菌所测得的最低抑菌浓度(MIC)值,与系统数据库中不同组合机制的MIC值概率进行比较,找出最可能的耐药机制和表型。理解和掌握专家系统的应用,可更合理和更准确地发出药敏报告。

    • 生物信息学技术在细菌耐药机制研究中的应用

      2013, 31(10):728-730.

      摘要 (1049) HTML (0) PDF 439.34 K (4040) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:生物信息学(bioinformatics)是基于分子生物学理论,并与生物学、数学、计算机科学、信息学融合而成的交叉复合学科。收集、整理、解析生物学实验数据是生物信息学的主要任务。本文扼要介绍了该技术在与细菌耐药相关基因分析中的应用。包括可将测得序列与数据库比对,测得的变异基因序列翻译成氨基酸序列委托Swiss Model Workspace作三维结构同源建模,进行可视化分析与分子对接分析。将测序所得细菌全基因组序列上传至基因自动注释网站,可获得编码基因序列和相应的蛋白质序列;上传至日本京都基因和基因组百科全书(KEGG)在线注释工具KAAS,可获得细菌代谢途径示意图。利用基因组数据库也可进行全基因组数据分析。

    • >细菌耐药监测
    • 2012年江苏地区12家医院细菌耐药监测评价

      2013, 31(10):731-735.

      摘要 (791) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:监测评价2012年江苏地区12家医院细菌耐药情况。 方法:收集48 683株非重复细菌信息,用仪器法或K-B纸片扩散法进行药敏试验,结果按美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2011年版标准判读,用WHONET 5.6软件进行统计分析。 结果:8 786株葡萄球菌中,对苯唑西林耐药者占63.8%。2 744株肠球菌中粪肠球菌对各类抗菌药物较屎肠球菌敏感,但对万古霉素中介的粪肠球菌比率达7.1%。155株肺炎链球菌中,按非脑膜炎的折点判读,对青霉素的敏感率超过80%;按脑膜炎的折点判读,对青霉素的敏感率明显降低。20 245株肠杆菌科细菌中对碳青霉烯类药物的敏感率最高,其中亚胺培南敏感率为93.2%,敏感率超过70%的有阿米卡星(82.5%)和哌拉西林/他唑巴坦(76.3%)。非发酵菌中5 658株鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率高达67.9%和72.5%,对所测的其他11种药物的耐药率均超过60%。6 393株铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率明显低于鲍曼不动杆菌。156株流感嗜血杆菌对阿奇霉素的敏感性为100%,敏感率在75%以上的有哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟和左氧氟沙星。 结论:耐甲氧西林葡萄球菌仍是革兰阳性菌中所占比例最高的细菌。屎肠球菌分离率的升高预示着临床治疗肠球菌引起的感染将更加棘手。碳青霉烯类药物对肠杆菌科细菌虽保持较高的活性,但是敏感率已经有所下降。非发酵菌中,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类的耐药率升高最快。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率已超过对第三代和第四代头孢菌素的耐药率。

    • 碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌基因型研究

      2013, 31(10):736-739.

      摘要 (699) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨临床分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌的基因型。 方法:收集2010年1月至2013年6月临床标本中分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌110株,K-B纸片扩散法检测细菌对临床常用药物的敏感性,纸片扩散表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),改良Hodge试验(MHT)检测碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序及BLAST比对等方法确定菌株耐药基因型。 结果:110株碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌中,MHT阳性77株(70.0%)。31株大肠埃希菌、1株产气肠杆菌和1株黏质沙雷菌检出blaKPC-2基因,5株阴沟肠杆菌和1株产气肠杆菌分别检出blaIMP-26和blaVIM-2基因。36株32.7%菌株ESBLs表型试验阳性,主要检出blaCTX-M-15、blaSHV-12和blaCTX-M-3 3种ESBLs基因型。 结论:本项研究碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌以blaKPC-2基因型为主,其次为blaIMP-26和blaVIM-2基因型。

    • 携带blaADC基因鲍曼不动杆菌可移动遗传元件研究

      2013, 31(10):740-743.

      摘要 (1072) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的: 了解携带blaADC基因的鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)中整合子、转座子、插入序列及接合性质粒等可移动遗传元件的携带情况。 方法:收集临床分离的179株Ab,用PCR扩增检测blaADC基因,对blaADC扩增阳性的菌株用PCR检测4类可移动遗传元件整合子遗传标记(intI 1、intI 2、intI 3、qacE△1-sul1)、转座子遗传标记(merA、tnpU、tnp513、tnpA)、插入序列遗传标记(ISAba1、IS26)及接合性质粒遗传标记(traA、trbC)等基因,并用K-B纸片扩散法对blaADC扩增阳性菌株分别进行药物敏感性试验。 结果:179株Ab中共检出blaADC基因阳性117株。其中,intI 1、qacE△1-sul1、merA、tnpU、tnp513、ISAba1、IS26检出阳性率分别为71.8%、98.3%、94.9%、93.2%、76.9%、98.3%、100.0%,其余5种可移动遗传元件未检出。每株最少检出可移动遗传元件3种,占总株数的0.9%;最多检出7种,占总株数的50.4%。 结论:携带blaADC基因的Ab易检出各类可移动遗传元件,其耐药性可能与可移动元件的存在有关。

    • 金黄色葡萄球菌sasX、psm-mec、pvl三种毒力基因的检测与分析

      2013, 31(10):744-750.

      摘要 (1074) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:分析54株金黄色葡萄球菌的mecA基因与sasX、psm mec、pvl三种毒力基因分布及临床相关性。 方法:收集2013年1~5月南京医科大学第一附属医院临床分离的54株金黄色葡萄球菌,用PCR及测序的方法分析mecA、sasX、psm-mec、pvl基因的携带情况,并结合患者的临床资料,探讨其临床相关性。 结果:54株金黄色葡萄球菌中有23株mecA基因检测阳性,31株mecA基因阴性。mecA基因阳性菌株较mecA基因阴性株体外药敏试验呈多重耐药表型。sasX基因阳性1株,阳性率为1.9%;psm-mec基因阳性10株,阳性率为18.5%;pvl基因阳性38株,阳性率为70.4%。mecA基因阳性菌株psm-mec基因阳性率显著高于mecA基因阴性菌株(P<0.01),pvl基因阳性率显著低于mecA基因阴性菌株(P<0.05)。mecA基因和psm-mec基因与临床感染严重程度显著相关(P均<0.01)。 结论:联合检测mecA、psm-mec和pvl基因有利于金黄色葡萄球菌感染的诊断、治疗和预后综合评估。

    • >临床检验技术研究
    • 多重荧光定量PCR快速诊断唐氏综合征患儿

      2013, 31(10):747-750.

      摘要 (591) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨用多重荧光定量聚合酶链反应(QF-PCR)对唐氏综合征(DS)患儿进行快速诊断的可行性。 方法:对21号染色体上D21S1442、D21S1432、D21S11、D21S1435、D21S1412和D21S1809 6个短串联重复序列(STR)位点进行多重QF-PCR扩增,PCR产物进行毛细管电泳,用GeneMapper软件对STR DNA进行多态性分型,并对患儿外周血进行淋巴细胞培养和染色体核型分析。 结果:6个STR位点检测198例DS患儿的敏感性为99.0%,特异性为100%;181例标准型DS患儿共检出180例,检出率为99.5%;14例异位型DS患儿的检出率为100%;2例嵌合型DS患儿,检出1例;另检出1例特殊核型DS患儿。 结论:多重QF-PCR检测具有快速、准确等特点,可用于DS患儿的临床诊断。

    • >临床实验研究
    • 缺血性脑卒中患者血清氧化脂蛋白(a)水平升高

      2013, 31(10):751-754.

      摘要 (626) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:观察血清氧化脂蛋白(a)[ox-Lp(a)]水平及其与缺血性脑卒中(CIS)严重程度间的关系。 方法:分别检测93例CIS患者[按美国国立卫生研究院卒中量表(NIHS)评分分为轻型48例,重型45例],脑出血患者30例和体检健康者48例血清ox-Lp(a)、Lp(a)水平并进行统计学分析。 结果:CIS轻型、重型患者血清ox-Lp(a)(t分别为-2.147、-5.082,P均<0.05)、Lp(a)(t分别为-2.347、-4.187,P均<0.05)水平均高于体检健康者,CIS重型患者血清ox-Lp(a)、Lp(a)水平均高于轻型组(t分别为-2.700、-0.231,P均<0.05)和脑出血组(t分别为4.205、-2.180,P均<0.05)。CIS患者血清ox-Lp(a)与Lp(a)水平呈正相关(r=0.429,P<0.01),与HDL-C水平呈负相关(r=-0.149,P<0.01);NIHSS与血清ox-Lp(a)、Lp(a)水平呈正相关(r分别为0.324、0.299,P均<0.01)。多元线性回归分析显示血清ox-Lp(a)、Lp(a)共同决定了13.6%的NIHSS变化[β分别为0.246、0.243,P均<0.05;决定系数(R2)=0.136)]。多元Logistic回归分析显示,校正年龄、性别和血脂水平等因素后,高ox-Lp(a)水平是CIS重型组的危险因素[风险比(OR)=1.209,95%可信区间(CI)=1.033~1.414]。 结论: CIS患者血清ox-Lp(a)水平升高,并与疾病严重程度相关。

    • 血清nectin-4、CA15-3、CEA联合检测在乳腺癌诊断中的价值

      2013, 31(10):755-756.

      摘要 (605) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨血清nectin-4、CA15-3、CEA在乳腺癌诊断中的应用价值。 方法:收集62例乳腺癌患者、59例乳腺良性疾病患者及30例体检健康者的临床样本,用ELISA法检测血清nectin-4的表达水平,用电化学发光免疫分析法检测血清CA15-3、CEA的表达水平。 结果:乳腺癌组血清nectin-4、CA15-3浓度均显著高于乳腺良性疾病组(P均<0.05);单项指标检测时血清nectin-4的Youden指数最高(0.452),其敏感性和特异性分别为77.4%和67.8%;nectin-4/CA15-3/CEA联合检测对乳腺癌诊断的敏感性、特异性和Youden指数分别为77.4%、69.5%和0.469,均高于单独检测指标。 结论:血清nectin-4/CA15-3/CEA联合检测比单一指标能提高乳腺癌的检测效能。

    • >基础实验诊断研究
    • Twist、Slug基因在宫颈癌中的表达及与预后的关系

      2013, 31(10):757-760.

      摘要 (625) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨Twist、Slug基因在宫颈癌中的表达水平及与临床预后的关系。 方法:用实时定量PCR检测56例宫颈癌患者、120例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者组织和血浆中Twist、Slug mRNA的表达,以35例正常宫颈及慢性宫颈炎组织和血浆作为对照。免疫组化染色检测Twist、Slug蛋白在宫颈癌组织中的表达,并分析其与宫颈癌复发的关系。 结果:对照组、CIN组、宫颈癌组组织中Twist mRNA表达水平分别为(1.98±0.48)×10-3、(3.89±0.86)×10-3、(6.53±1.25)×10-3,血浆中Twist mRNA表达水平分别为(1.62±0.55)×10-4、(1.76±0.68)×10-4、(2.08±0.90) ×10-4;3组组织中Slug mRNA表达水平分别为(1.33±0.32)×10-2、(3.02±0.95)×10-2、(4.69±1.02)×10-2,血浆中Slug mRNA表达水平分别为(2.08±0.75)×10-3、(2.30±0.78)×10-3、(3.09±1.02)×10-3;宫颈癌组、CIN组组织中Twist、SlugmRNA表达水平均高于对照组(F分别为46.69、55.30,P<0.01);宫颈癌组血浆中Twist、SlugmRNA 相对表达水平最高(F分别为10.56、17.97,P<0.01),且术前血浆中Twist、Slug相对表达水平高于术后2周的水平(t分别为2.12、2.03,P<0.05)。宫颈癌组Twist mRNA与SlugmRNA呈正相关(r=0.483, P<0.01);免疫组化结果表明,宫颈癌组织Twist、Slug蛋白表达阳性率(55.4%、78.6%)高于对照组的表达阳性率(8.6%、37.1%)(χ2分别为20.15、15.80,P<0.01)。宫颈癌组Twist蛋白阳性者复发率高于Twist蛋白阴性者(29.0% vs 4.0%,χ2=5.91,P<0.05)。 结论:Twist、Slug基因在宫颈癌组织和血浆中表达上调,Twist阳性表达与宫颈癌的复发关系密切。

    • miR-544a对非小细胞肺癌细胞系Wnt信号通路抑制因子GSK3β表达的调控作用

      2013, 31(10):761-764.

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      摘要:摘要:目的:探讨微小RNA-544a(miR-544a)对肺癌干细胞的自我更新能力影响及其可能的机制。 方法:通过生物信息学预测miR-544a的靶向基因,用荧光素酶报告系统及western blot验证其靶向关系;构建稳定表达miR-544a的非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系95C和95D,并用荧光定量PCR验证;用肿瘤球悬浮培养实验检测miR-544a在形成肿瘤球中的作用。 结果:生物信息学预测发现,miR-544a可以靶向调节Wnt信号通路的抑制子GSK3β,并通过荧光素酶报告系统得到了验证(F=201.37,P<0.01);western blot结果显示,miR-544a可以下调GSK3β的表达,而β-catenin、CD133蛋白表达水平明显上调(F分别为7.73,3.37,9.43,P均<0.01);荧光定量PCR结果显示,95C、95D细胞在转染miR-544a后,miR-544a表达水平增高,分别为20.51±0.97、15.16±1.38 (F=418.05,P<0.01)。肿瘤球悬浮培养实验发现,稳定表达miR-544a的细胞能够反复形成具有肿瘤干细胞特性的肿瘤球。 结论:miR-544a可以通过直接下调GSK3β的表达来激活Wnt信号通路,以维持肺癌干细胞自我更新能力。

    • 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对缺氧/复氧肾小管上皮HK-2细胞自噬作用的影响

      2013, 31(10):765-768.

      摘要 (781) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对缺氧/复氧肾小管上皮细胞HK-2自噬水平的影响,探讨NGAL在肾小管上皮细胞缺氧/复氧过程中发挥的作用。 方法:构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,并转染HK-2细胞。将HK-2细胞分为未转染组和转染组,每组再分为缺氧/复氧处理组和未处理组。用western blot法检测转染后NGAL蛋白表达水平和缺氧/复氧后细胞自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC-3-Ⅱ)表达水平,并用CellTiter Blue细胞活性检测系统检测细胞活力。 结果:成功构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,转染HK-2细胞后,细胞NGAL蛋白表达水平高于未转染组(t=8.959,P<0.05)。缺氧1 h/复氧24 h后,转染组细胞LC-3-Ⅱ表达水平高于未转染组(t=21.721,P<0.05),而细胞活力低于未转染组(t=-6.238,P<0.05)。 结论:在HK-2细胞缺氧/复氧状态下,NGAL能增强细胞自噬水平,导致细胞损伤加重甚至死亡。

    • >综述
    • MicroRNA调控肿瘤干细胞凋亡的研究进展

      2013, 31(10):769-771.

      摘要 (555) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要: 微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非蛋白质编码小RNAs,主要在转录后水平负性调控基因表达。miRNAs表达水平的改变与许多人类疾病尤其是癌症密切相关。肿瘤干细胞(CSCs)亦称为肿瘤起源细胞,是存在于肿瘤细胞中的一小群具有干细胞特性的亚群细胞,具有高度致瘤性及耐药性。近年来,miRNAs在CSCs凋亡调控中的作用逐渐成为研究热点。靶向miRNAs的分子疗法有望成为校正CSCs调节异常的有力工具。了解CSCs凋亡信号系统的分子机制对开发新型癌症疗法尤为重要。本文就miRNAs与CSCs凋亡相关研究作一综述。

    • 硒蛋白基因多态性与恶性肿瘤遗传易感性的关联性研究进展

      2013, 31(10):772-791.

      摘要 (570) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要: 硒是人体必需的微量元素,以硒代半胱氨酸的形式存在于硒蛋白中,发挥重要的生物学功能,硒不但与机体的免疫应答及抗氧化作用等生理功能密切相关,而且能够降低癌症的发生率。缺硒被认为会增加癌症风险,但其机制目前尚不清楚。本文简要介绍硒蛋白的分子生物学特点和生物学功能,并对硒蛋白基因多态性与恶性肿瘤易感性的关联性研究作一综述。

    • >研究生园地
    • 驱动蛋白分子6基因rs20455位点基因多态性与江苏地区汉族人冠心病的相关性研究

      2013, 31(10):774-777.

      摘要 (654) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:观察江苏地区汉族人群驱动蛋白分子6(KIF6)rs20455位点基因多态性与冠心病(CHD)的关系。 方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)分别检测556例冠心病患者和322例体检健康者KIF6 rs20455基因型,计算等位基因分布频率;用全自动生化分析仪检测研究对象血脂、血糖水平。 结果:冠心病组和健康人对照组KIF6基因 rs20455位点TT、TC、CC基因型频率分别为0.291、0.507、0.201和0.323、0.450、0.227(χ2=2.647,P=0.266);T、C等位基因频率分别为0.545、0.455和0.548、0.452(χ2=0.017,P=0.898)。Logistic回归分析显示,C等位基因不是发生CHD的危险因素(OR=0.862,P=0.326,95%CI为0.641~1.160),年龄、高血压、LDL-C和HbA1c是冠心病发生的主要危险因素(OR分别为1.079、6.239、4.734、11.128,P均<0.05)。 结论: KIF6 rs20455位点基因多态性与江苏地区汉族人群CHD的发生无关。

    • 丝氨酸羟甲基转移酶1基因C1420T位点和3′-非翻译区3个位点单核苷酸多态性与儿童急性白血病易感性的关系

      2013, 31(10):778-781.

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      摘要:摘要:目的:研究深圳地区汉族儿童丝氨酸羟甲基转移酶1(SHMT1)基因C1420T位点和3′-非翻译区(UTR)3个位点单核苷酸多态性(SNP)与急性白血病(AL)易感性的关系。 方法:以110例AL患儿、120例上呼吸道感染患儿和健康体检儿童为研究对象,用PCR、变性梯度凝胶电泳(DGGE)及DNA测序检测研究对象SHMT1 C1420T(rs1979277)和3′-UTR 3个位点(rs3783、rs1979276及rs12952556)基因型和等位基因频率,分析其与AL易感性的关系。 结果:AL患儿SHMT1编码区C1420T位点CT(杂合型)和TT(纯合型)基因型频率较对照组升高(17.3% vs 10.8%和1.8% vs 1.7%),但差异无统计学意义(χ2分别为2.006和0,P均>0.05);CT和TT基因型与儿童AL发病风险无相关性,其风险比(OR)分别为0.580(0.271~1.240)、0.848(0.117~6.140)。3′-UTR rs3783、rs1979276及rs12952556与C1420T具有相同的基因型分布状态,即在同一个体内该4个位点同为野生、杂合或纯合型基因。经SNPStats在线软件分析,该4个SNP位点两两间的连锁不平衡系数均为D′=1和r2=1。 结论: 深圳地区汉族儿童SHMT1 4个位点SNP与AL易感性无关,但可能呈完全连锁不平衡。

    • HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达

      2013, 31(10):782-785.

      摘要 (806) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因(HABP1)干扰载体及表达载体,建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0。 方法:合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列,与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1(-)-HABP1-Flag,将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上,组成重组表达载体pCDH-HABP1;酶切鉴定及DNA测序后,转染293T细胞,收集慢病毒颗粒感染786-0细胞,嘌呤霉素筛选稳定细胞系,western blot验证HABP1蛋白的表达水平。 结果:构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1;与随机序列对照组比较pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P<0.05),pCDH-HABP1转染786-0细胞后,HABP1的表达水平(3.20±0.40)明显升高(t=10.34,P<0.05)。 结论:成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体,且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1。

    • >质量管理研究
    • 四种方法检测糖化血红蛋白的干扰性能评价

      2013, 31(10):786-787.

      摘要 (814) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨亲和层析法、高效液相色谱法(HPLC)、免疫比浊法和酶法检测糖化血红蛋白A1c(HbA1c)对游离胆红素(F-Bil)、结合胆红素(C-Bil)、血红蛋白(Hb)和乳糜微粒(CM)的抗干扰能力。 方法:收集EDTA-K2抗凝新鲜血,制备HbA1c 10.4%和6.2%的高、低浓度标本,对4种方法检测HbA1c进行干扰实验。 结果:4种干扰物对亲和层析法、HPLC法检测HbA1c无干扰。CM≥15 000 FTU时,免疫比浊法测定HbA1c有干扰。F-Bil、C-Bil≥121.3 μmol/L时,酶法检测高浓度HbA1c有干扰;F-Bil≥196.8 μmol/L、C-Bil≥121.3 μmol/L时,酶法检测低浓度HbA1c有干扰。 结论:酶法检测HbA1c抗胆红素干扰能力有待改进,应剔除黄疸标本。免疫比浊法则应避免高CM标本。

    • >调查研究
    • 1株泛耐药肺炎克雷伯菌质粒介导耐药的机制研究

      2013, 31(10):788-791.

      摘要 (644) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:观察质粒与1株泛耐药肺炎克雷伯菌(PRKP)耐药机制间的关系。 方法:用纸片扩散法和微量肉汤稀释法对1株临床分离的PRKP进行药敏试验。用PCR检测PRKP携带的碳青霉烯酶基因GES-1~9、GES-11、OXA-48-like、IMP、VIM、KPC-1~5和NDM,以及广宿主质粒IncN家族的复制酶基因repA。提取该菌株质粒并行琼脂糖凝胶电泳,进行质粒接合、转化试验,PCR检测转化接合子碳青霉烯酶基因和repA。 结果:从PRKP菌株分离到pIncN-XM和pKPC-XM质粒,前者可经接合转移到E.coli J53,PCR检测显示其为一种具广宿主质粒IncN特征的质粒,并携带喹诺酮类抗性基因;后者接合试验阴性,但可经转化导入感受态细菌E.coli DH5α,携带blaKPC-2型基因。 结论: 该PRKP菌株泛耐药的机制与其含携带blaKPC-2型基因的质粒和携带喹诺酮类抗性基因并具有广宿主质粒IncN特征的质粒密切相关。

    • 宁波地区急性腹泻患者副溶血弧菌表型及分子特征研究

      2013, 31(10):792-794.

      摘要 (551) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:了解宁波地区急性腹泻患者中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus, VP)分布及分子分型特征。 方法:对2012年4~10月宁波地区VP临床分离株进行血清型分型;用PCR检测毒力基因tlh、tdh和trh;对所有菌株进行多位点序列分型(MLST)分析。 结果:962份急性腹泻患者粪便标本中71份VP阳性,分离率为7.38%;71株菌分属17种血清型,O3:K6是最主要的血清型,共44株(61.97%),其次是O4:K8(5株);毒力基因检测发现71株tlh均呈阳性(100%),70株tdh阳性98.59%,仅3株trh阳性。MLST分析发现13种序列型(STs),主要为ST3型45株,占63.38%。 结论:宁波地区急性腹泻患者中VP分离株以O3:K6血清型为主,ST3型为优势序列型。

    • 结直肠病变患者的肠镜活检及联合检测血清CEA、CA19-9、CA72-4

      2013, 31(10):795-796.

      摘要 (671) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:探讨用肠镜活检技术分析结直肠病变患者的病理参数及与血清CEA、CA19-9、CA72-4表达水平的关系。 方法:收集经肠镜活检及病理切片诊断的结直肠病变患者122例,同时检测其血清CEA、CA19-9、CA72-4的表达水平,并进行统计学分析。 结果:经肠镜活检诊断为高级别上皮内瘤变(HGIN)组、无蒂组、最大径>30 mm组及浸润性癌组血清CEA、CA19-9和CA72-4的表达水平分别高于低级别上皮内瘤变(LGIN)组、有蒂组、最大径≤30 mm组和腺瘤伴上皮内瘤变组(P均<0.05);血清CEA、CA19-9、CA72-4联合检测诊断浸润性癌的阳性率高于单项检测(P均<0.05)。 结论:肠镜活检技术结合血清CEA、CA19-9、CA72-4联合检测,有助于浸润性癌的术前判断。

    • 肝细胞肝癌患者行肝动脉化疗栓塞治疗前后血清VEGF和AFP表达水平

      2013, 31(10):797-797.

      摘要 (502) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • >病例报告
    • 双路普雷沃菌血流感染1例

      2013, 31(10):798-799.

      摘要 (662) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 非O1非O139型霍乱弧菌致败血症1例

      2013, 31(10):800-800.

      摘要 (452) HTML (0) PDF 0.00 Byte (0) 评论 (0) 收藏

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