摘要:摘要：目的：建立检测人血清中抗烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ（dipeptidyl peptidases Ⅴ，DPPⅤ）肽段IgG类抗体（抗DPPⅤ）的ELISA法，评估其对侵袭性曲霉病（IA）的早期诊断价值。 方法：用重组烟曲霉DPPⅤ肽段作为包被抗原，建立检测血清中抗DPPⅤ的ELISA法，检测105例IA患者、200例非IA患者及200例健康人血清中抗DPPⅤ水平，确定cut off值，考查方法的精密度和特异性。部分IA患者抗DPPⅤ结果与抗烟曲霉硫氧还蛋白还原酶（TR）抗体（抗TR）检测和曲霉半乳甘露聚糖（GM）检测结果对比，评价其临床应用价值。 结果：以建立的ELISA法检测吸光度（A）值为6.688、0.709的2份抗DPPⅤ抗体阳性血清，批内变异系数（CV）为4.1%和8.0%，批间CV为7.1%和10.7%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率＞90%。以A值0.542为cut off值，对IA诊断的敏感性为66.7%，特异性为90.7%。非中性粒细胞缺乏的IA患者抗DPPⅤ阳性率（75.3%，55/73）高于中性粒细胞缺乏的IA患者（46.9%，15/32），差异有统计学意义（χ²=8.11，P<0.05）；92例IA患者血清抗DPPⅤ、抗TR和GM测定总阳性率分别为63.0%、60.9%和73.9%，差异无统计学意义（P＞0.05）；中性粒细胞缺乏的IA 患者GM阳性率（89.7%）显著高于抗DPPⅤ、抗TR的阳性率（41.4%和34.5%），χ²分别为14.96、18.75，P均<0.01。抗DPPⅤ与抗TR联合检测阳性率达到82.6%，抗DPPⅤ、抗TR和GM试验三者联合检测的阳性率可提高到96.7%。 结论: 检测抗DPPⅤ抗体的ELISA法精密度和特异性较好，对侵袭性曲霉感染具有潜在的辅助诊断价值，联合多个指标检测可提高诊断的敏感性。

摘要:摘要：目的：用高保真DNA聚合酶介导的PCR检测β地中海贫血基因热点突变。 方法：选取已知中国人群β珠蛋白基因CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26热点突变位点为检测靶点，分别设计3′末端与野生型基因位点或突变型基因位点完全配对的引物，并用硫化磷酸修饰，进行高保真DNA聚合酶介导的引物延伸反应。用多重PCR反应体系检测临床已知分别含CD26和TATAbox-28突变热点患者的DNA标本。 结果：对野生模板而言，仅有野生型等位基因相关引物有产物产生，而突变型等位基因位点特异性引物无产物产生。反之，使用突变模板，仅突变型等位基因位点相关引物有产物产生，而野生型等位基因位点特异性引物无产物产生。高保真DNA聚合酶介导的多重引物延伸反应筛查含有CD26或TATAbox-28突变的患者DNA标本时显示，突变引物混合物只有相应突变位点的产物产生，而野生引物混合物则有除突变位点以外的其他5个位点的产物产生。 结论：建立了基于高保真DNA聚合酶的筛查β地中海贫血基因热点突变的PCR技术。

摘要:摘要：目的：建立检测肿瘤慢性贫血患者铁调素（hepcidin）mRNA表达水平的荧光定量PCR法，初步观察肿瘤慢性贫血患者淋巴细胞铁调素mRNA水平。 方法：建立荧光定量PCR检测铁调素mRNA的标准曲线，评价其灵敏度、特异性及重复性;检测50例体检健康者、49例肿瘤慢性贫血患者外周血淋巴细胞铁调素mRNA水平，同时检测血清白细胞介素6（IL-6）及血清铁（SI）水平。 结果：荧光定量PCR检测铁调素mRNA的灵敏度为10 copies/μL，线性范围为 10¹~10⁷ copies/μL；熔解曲线示扩增峰单一；检测3份低、中、高浓度的阳性质粒批内CV分别为1.83%、1.27%、1.39%，批间CV分别为6.13%、7.48%、6.87%。肿瘤慢性贫血组铁调素 mRNA水平为［10.51（8.02~16.31）］×10^-3 copies/cell，高于健康人对照组［2.57（2.20~3.20）］×10^-3 copies/cell,P<0.01;外周血铁调素mRNA水平与IL-6水平呈正相关（r=0.92，P<0.01），与SI呈负相关（r=－0.83，P<0.01）。 结论: 建立了定量检测外周血淋巴细胞铁调素mRNA的荧光定量PCR法，肿瘤慢性贫血患者铁调素mRNA水平高于健康人，可能与炎症反应有关。

摘要:摘要：目的：探讨鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平与临床分期及血浆EB病毒VCA-IgA抗体的相关性。 方法：用ELISA法检测鼻咽癌患者(Ⅱ期36例，Ⅲ期104例，Ⅳ期104例)和104例体检健康者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度和EB病毒VCA-IgA抗体水平，用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。 结果：鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度分别为0.44(0.25,0.78) ng/mL和202.71(185.79,238.54) pg/mL，显著高于体检健康者0.29(0.18,0.44) ng/mL和192.43(170.66,193.42) pg/mL(P均＜0.05)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌患者血浆S100A8、S100A9蛋白浓度均高于体检健康者(P均＜0.05)，且Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度高于Ⅳ期（P＜0.05）；Ⅲ期S100A9蛋白浓度高于Ⅱ期(P＜0.05)。相关分析结果显示，鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度与EB病毒VCA-IgA抗体水平无相关性（r分别为-0.04,-0.07, P均＞0.05）。 结论：鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平升高，且与临床分期有关。

摘要:摘要:目的：探讨microRNA-141(miR-141)在结肠癌患者血清中的表达及意义。 方法：用荧光定量 PCR（SYBR Green法）检测60例结肠癌患者和60例健康对照组血清中miR-141的表达。 结果：miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量为3.29±0.52，与健康对照组的1.02±0.23相比，显著升高(t=11.34,P＜0.05)；随着结肠癌分化程度的降低，血清miR-141的表达增高；血清miR-141在淋巴结转移组的相对表达量为4.45±0.32，在无淋巴结转移组为2.39±0.23，差异有统计学意义(t=2.34,P＜0.05)；结肠癌术后血清miR-141表达明显下降（t=8.53,P＜0.01）。 结论：miR-141在结肠癌血清中高表达，且与结肠癌分化程度和淋巴结有无转移有关。有望作为一种新的生物标志物用于结肠癌辅助诊断。

摘要:摘要：目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者手术前后血浆D-二聚体(D-D)水平的变化及与预后相关性。 方法：收集77例初诊NSCLC患者及98例体检健康者血浆标本。检测NSCLC患者手术前后血浆D-D的水平变化，并探讨其与临床分期、组织分化程度的关系；Kaplan-Meier生存曲线分析术前血浆D-D水平与NSCLC患者发生死亡事件的关系。 结果：NSCLC患者术前血浆D-D水平为(1.04±0.71) mg/L，显著高于术后第9天的(0.62±0.47) mg/L (t=4.350, P<0.01)；也高于健康对照组的0.37±0.11 mg/L (t=9.294, P<0.01)。初诊NSCLC患者血浆D-D水平随着肿瘤临床分期递进而增加(F=9.028，P<0.01)，而与肿瘤组织分化程度无明显关系（F=0.532，P>0.05）。血浆D-D为≤0.87 mg/L的NSCLC患者预后明显优于D-D>0.87 mg/L的患者(χ²=9.72，P<0.01)。 结论: D-D水平对NSCLC患者预后评估有一定价值。

摘要:摘要：目的：建立耐氨甲蝶呤（MTX）对映体的人白血病BALL-1和CCRF-CEM细胞，观察其生物学特性，分析不同MTX对映体耐药细胞表皮生长因子受体（EGFR）信号通路相关基因的表达。 方法：用浓度递增结合低剂量持续诱导的方法建立L(+)-MTX、D(-)-MTX耐药细胞并绘制细胞生长曲线，用流式细胞仪检测细胞周期，用RT-PCR法检测各细胞EGFR、KRAS、TGF、PI3K mRNA的表达情况。 结果：L(+)-MTX、D(-)-MTX耐药细胞自第4日增殖速度明显较亲本细胞慢，而L(-)-MTX耐药细胞增殖速度明显较D(+)-MTX耐药细胞慢。与亲本细胞BALL-1、CCRF-CEM相比，两种耐药细胞周期分布中G0/G1 期所占比例增加，S期细胞所占比例减少。L(+)-MTX/BALL-1、D(-)-MTX/BALL-1间EGFR、K-Ras mRNA 差异有统计学意义（P均＜0.05）。L(+)-MTX/CCRF-CEM、D(-)-MTX/CCRF-CEM组间EGFR、K-Ras mRNA 差异有统计学意义（P均＜0.05）。BALL-1细胞组、CCRF-CEM细胞TGF mRNA表达水平差异均无统计学意义（P均>0.05），而两种细胞均无PI3K mRNA表达。结论：耐D(-)-MTX细胞增殖能力大于L(-)-MTX细胞；耐L(-)-MTX、D(-)-MTX细胞EGFR、K-Ras mRNA表达存在差异。

摘要:摘要：目的：筛选并构建肝再生增强因子（ALR)基因的最佳RNA干扰（RNA interference，RNAi）慢病毒表达载体，为研究ALR基因表达下调后对肝癌细胞生物学特性的影响提供依据。 方法：针对ALR基因序列设计并合成4个siRNA靶点，酶切连接GV118-GFP载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定；在包含ALR基因的质粒中以PCR法扩增出ALR基因，克隆至慢病毒载体GV143，构建AL基因的过表达质粒，将RNAi重组慢病毒载体和ALR的基因表达质粒共转染293T细胞，用western blot检测其对目的基因ALR的敲减效率。 结果：酶切鉴定证实成功构建了ALR RNAi慢病毒载体及ALR基因过表达载体。不同浓度干扰质粒（0.4 μg和0.8 μg）的western blot结果显示，相较于阴性对照组，KD1组ALR蛋白的表达水平（0.51±0.02，0.36±0.09）、KD2组ALR蛋白的表达水平（0.65±0.04，0.49±0.02）、KD3组ALR蛋白的表达水平（0.62±0.07，0.52±0.02）均降低（P均<0.05），而以KD1组蛋白表达量最低。 结论：成功筛选并构建了能有效沉默ALR基因的最佳RNAi重组慢病毒载体，为后续实验奠定基础。

摘要:摘要：目的：了解武汉地区手足口病（HFMD）患儿柯萨奇病毒A16型（CA16）的基因型及重组特点。 方法：收集2011年4月至2012年3月武汉地区1 844例HFMD患儿的咽拭子标本，用实时荧光定量PCR检测CA16核酸，阳性标本进行病毒分离，对分离株进行VP1基因序列测序，选择2株来自重症和1株来自轻症患儿的CA16病毒株构建VP1序列系统进化树并分析其全基因组序列的重组特点。 结果：1 844例HFMD患儿的咽拭子标本中分离出42株CA16，VP1序列系统进化分析显示，所有分离株均属于B1亚型，其中13株属于B1a亚群，29株属于B1b亚群。重组分析表明，3株CA16分离株均为亲本株CA16 A型毒株FY18/AH/CHN/2008和EV71 A型毒株Hubei-09/HB/CHN/2009型间重组所产生，重组交叉位点为基因组P2区2A和2B基因交界处。 结论：武汉地区的CA16分离株均为 B1亚型，其中B1b亚群占明显优势，且CA16分离株存在亲本株CA16 A型和EV71 A型毒株的型间重组。

摘要:摘要：目的：研究人单核细胞THP-1细胞系源性M2型巨噬细胞与卵巢癌SKOV3细胞相互作用后，肿瘤细胞Toll样受体（Toll-like receptors，TLRs）mRNA表达水平的改变。 方法：用佛波酯（PMA）诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞，用免疫荧光技术检测THP 1细胞膜表面CD206分子的表达；用Transwell小室建立巨噬细胞与卵巢癌SKOV3细胞体外非接触式共培养模型；相互作用24 h后提取SKOV3细胞总RNA，用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法检测TLR1～TLR9 mRNA的表达水平并通过相对定量法（2^-△△Ct）进行分析。 结果：PMA诱导后，THP-1细胞巨噬细胞化，CD206分子高表达；卵巢癌细胞经共培养后TLR2、TLR3、TLR4、TLR5 mRNA表达水平显著增高，2^-△△Ct分别为25.99±1.09、7.11±0.27、16.92±0.11、44.80±0.78。 结论：卵巢癌SKOV3细胞与M2型巨噬细胞相互作用后，肿瘤细胞TLR2~TLR5 mRNA表达显著增加，可能参与卵巢癌发生、发展过程。

摘要:摘要: 嗜吞噬细胞无形体（AP）主要引起人类经蜱叮咬传播的人粒细胞无形体病（HGA）。快速、准确的针对HGA的检测技术能够有效地控制其爆发，减少死亡病例。目前AP感染的诊断方法有临床诊断、血清学诊断、形态学诊断、分子生物学诊断等。其中AP分子检测技术特异性高、操作简便,快速，是目前对AP感染诊断的常用方法。针对AP分子检测主要方法包括巢式PCR （nested PCR）、实时定量荧光PCR(real-time PCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)等。三类分子检测技术各有优缺点，应根据具体情况选用适当的检测手段，提高AP感染的早期诊断准确率。

摘要:摘要： 甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)阳性胃癌(AFP-producing gastric carcinoma, APGC)患者的主要临床特征是血清AFP水平明显增高，生存期短，晚期病例多，术后复发率高，转移率高。研究显示，AFP是影响APGC高侵袭性生物学行为的一个独立因素，其具体分子机制可能与调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、c-Met、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3, STAT3)、Fas、AT基序结合因子1 (AT motif binding factor 1, ATBF1)等分子的异常表达及癌细胞的遗传表型有关，但尚需进一步阐明。本文对近年来国内外有关APGC高侵袭性生物学行为的研究进展做一综述，为后续研究其具体分子调控机制提供理论依据。

摘要:摘要：目的：提纯并鉴定类风湿关节炎（RA）患者血清中免疫复合物（s-IC），并研究其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖功能的影响。 方法：用G蛋白亲和层析法分别从抗瓜氨酸化蛋白抗体（ACPA）阳性（ACPA+）RA患者、SLE患者及健康人对照血清中提取IC，用SDS-PAGE对提取的s IC进行纯度鉴定，用化学发光免疫分析法测定s-IC中ACPA含量，用western blot法鉴定纯化IC中的瓜氨酸化蛋白质。体外培养HUVEC，分别用RA患者血清IC（RA-IC）、SLE患者血清IC（SLE-IC）、健康人血清IC（C-IC）刺激HUVEC，培养24 h后，用CCK-8细胞增殖法检测细胞的增殖水平。 结果：用G蛋白亲和层析法可自血清中提取出纯度较高的IC，ACPA+RA患者血清经G蛋白柱纯化后，IC中ACPA的回收率可达56.85%。western blot结果显示，RA患者s-IC中在相对分子质量（Mr）25 000～55 000间出现较多SLE-IC和C-IC中未有的条带。用s-IC刺激体外培养的HUVEC，当s-IC浓度为50 μg/mL时，RA-IC与SLE-IC组HUVEC的增殖水平均显著高于C-IC组（P均<0.01）；当IC浓度为100 μg/mL时，RA IC组的HUVEC增殖水平显著高于SLE-IC与C-IC组（P均<0.01）。结论：成功提取ACPA+RA患者s-IC，RA-IC能显著促进HUVEC增殖。

摘要:摘要：目的：探讨人脐带间充质干细胞（hucMSC）来源的外体（exosomes,hucMSC-Ex）对脂多糖（LPS）诱导的人肝星状细胞系LX2活化的抑制作用及其可能机制。 方法：体外培养LX2细胞，分别设PBS对照组、LPS组（100 ng/mL）及hucMSC-Ex组（LPS+150 μg/mL hucMSC-Ex），48 h后收集细胞并提取相应的RNA及蛋白质。western blot检测LX2活化相关指标（α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白）和凋亡指标（Bcl2、Bax及caspase3蛋白）的表达情况；RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测α-SMA mRNA表达水平；MTT法分析hucMSC-Ex对LX2细胞活化后增殖的影响。 结果：LPS可刺激LX2细胞活化，活化后的LX2细胞形态由不规则形状向成纤维细胞样改变，并高表达α SMA、ColΙα1及TGF β1蛋白，其灰度值分别上升约2.45、2.34、2.77倍（P均<0.05）；Bax及caspase3蛋白表达下降而Bcl2蛋白表达增强；LX2增殖能力增强；经hucMSC-Ex处理后，细胞形态由细长向不规则形态转变，α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白表达减弱，高表达Bax及caspase3蛋白而Bcl2蛋白表达下降，且细胞增殖减少(F=23.44，P<0.05)。 结论：hucMSC-Ex能够抑制LPS诱导的LX2细胞活化，降低其增殖能力并促进细胞凋亡。

摘要:摘要：目的：通过复现碱性磷酸酶（ALP）国际参考方法评价4种常规测量方法的正确度。 方法：实验室内复现国际临床化学联合会（IFCC）公布的ALP参考方法；参考临床和实验室标准化协会（CLSI）EP9-A2文件用患者新鲜血清标本将Roche Modular系统、Beckman AU系统、Siemens Dimension系统、迈克试剂-Beckman AU系统与参考方法进行比对，评价常规方法与参考方法的相关性和偏移，根据回归方程调整常规方法的系数，重新比较与参考方法的相关性和偏移。 结果：4种检测体系与参考方法的相关系数r均大于0.99。与参考方法相比，Roche系统存在负偏移，Beckman AU系统、Siemens Dimension系统存在正偏移，国产迈克试剂-Beckman AU仪器系统偏移最小。通过线性回归方程调整系数后，常规方法与参考方法的结果偏移降低。 结论：实验室通过建立参考方法并与常规方法进行方法学比较，调整仪器参数，可最大程度地保证检测结果的可比性和准确性，是实验室内质量控制的有效手段。

摘要:摘要：目的：探讨不同温度、不同贮存时间保存标本对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定糖化血红蛋白A1c（HbA1c）结果稳定性的影响。 方法：收集5例HbA1c水平不同的全血标本，用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪于当日3 h内测定结果，然后将各标本充分混匀后分装成4小管，分组贮存在室温（20～22 ℃）、冷藏（4～6 ℃）、冷冻（－18～－20 ℃）和低温冷冻（－74～－76 ℃）条件下，分别在贮存的第1、2、5、6、7、14、20、21、60和180天进行测定。以低温冷冻保存标本所测结果为标准，每个标本的HbA1c结果在低温冷冻组x±0.2%范围内为可接受结果。当每组5个标本的结果都在可接受范围内，说明标本在特定时间、特定温度下稳定。 结果：标本用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定的稳定性分别为：室温和－18～－20 ℃可稳定5 d，4~6 ℃可稳定20 d；－74～－76 ℃至少可稳定180 d。 结论：不同温度、不同贮存时间对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c结果稳定性有影响。

摘要:摘要：目的：在实验室信息系统（LIS）中以检验全过程和标本的流转为主线，对关键环节进行时间节点监控，建立“精确到点、责任到人”的检验标本全过程监控系统。 方法：LIS与医院信息系统（HIS）实现无缝连接，设置关键时间节点并加以监控，准确记录以条码为唯一标识的检验标本在临床科室、运送员工、检验科室等各环节、各部门之间交接的时间和责任人。比较节点监控前后标本遗漏率、标本平均流转时间、结果审核及时率、门诊等待抽血的耗时及门诊标本平均结果审核时间。 结果：对检验标本实现时间节点监控后，减少了标本在交接过程及结果报告等各环节的主观随意性，在对临床科室和患者进行的调查反馈中发现，满意度由96.0%提高为97.6%；检验标本遗漏率由1.34%下降为0.57%；标本平均流转时间由47.2 min缩短为38.6 min；结果审核及时率由97.5%提高为98.6%；门诊患者等待抽血的时间由40～50 min缩短为20～30 min；门诊标本的平均结果审核时间由42.2 min缩短为37.1 min。 结论：LIS中建立关键时间节点监控，实现“精确到点、责任到人”的监控，可提高标本周转的效率，保证检验结果的可靠性和及时性，对保障患者安全目标具有重要意义。

摘要:摘要:目的：探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）的耐药机制及同源性。 方法：收集南昌地区4家教学医院耐碳青霉烯类抗菌药物（亚胺培南和/或美罗培南）的肺炎克雷伯菌29株，双纸片增效法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、三维实验检测AmpC酶、改良Hodge实验和双纸片协同法检测碳青霉烯酶，PCR扩增耐药基因，并对扩增产物测序，确定其基因型。脉冲场凝胶电泳（PFGE）对其进行同源性分析。 结果：29株分离菌除对阿米卡星的耐药率较低（37.9％）外，对其他13种抗菌药物的耐药率均大于69％，其中对头孢呋辛、亚胺培南的耐药率为100％，多重耐药肺炎克雷伯菌的检出率为62.1％(18/29)。29株分离菌中有19株携带碳青霉烯酶基因，占65.5%(19/29)，以bla_KPC-2为主（44.8%，13/29），其次为bla_NDM-1、bla_IMP-26及bla_IMP-4，携带率分别为17.2%（5/29）、10.3%(3/29)及6.9%(2/29)，另有3株同时携带bla_KPC-2和bla_IMP-26，1株同时携带bla_KPC-2和bla_IMP-4。17株除携带碳青霉烯酶基因外，还携带ESBLs基因和（或）AmpC基因，占58.6%。未检测到VIM、GES、SPM及OXA等其他碳青霉烯酶基因。29株分离菌中有27株被PFGE成功分型，分别属于20个不同克隆，其余2株分型不成功。属于同一克隆型且携带bla_KPC-2基因的4株菌来自同一医院。 结论: CRKP耐药及多重耐药现象严重；携带碳青霉烯酶基因是肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因，bla_KPC-2携带率高，且在局部有短暂流行。本地区已监测到携带bla_NDM的肺炎克雷伯菌，值得关注。

摘要:摘要：目的：探讨miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a与SLE治疗的相关性。 方法：采集17例健康对照者和22例治疗前、后SLE患者外周血，分离单个核细胞（PBMC）,用real-time PCR检测各组PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达情况。 结果：SLE患者PBMC 中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达均低于健康对照者，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗前SLE患者组miRNA-155、miRNA-181a的表达低于治疗后SLE患者组，差异有统计学意义（P<0.05）;治疗前SLE患者组miRNA-146a、miRNA-31的表达与治疗后SLE组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论：miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a在SLE患者PBMC中表达普遍降低，治疗后患者PBMC中miRNA-155、miRNA-181a的表达明显高于治疗前，提示上述miRNA有望成为SLE患者治疗监测指标。

摘要:摘要：目的：对1例成骨不全（OI）患者Ⅰ型胶原基因（COL1A1和COL1A2）进行基因突变检测，为研究中国人群的OI基因突变特点提供线索。 方法：患者具有OI典型的蓝巩膜、易骨折、牙本质发育不全等临床表现，临床诊断为OI，提取患者外周血基因组DNA，对所有启动子区、外显子及外显子 内含子边界区进行DNA测序，通过序列特异引物PCR（PCR-SSP）法进一步验证，以患者的父母、妹妹及200例体检健康者作为对照。 结果：DNA测序结果显示，OI患者COL1A1基因45号外显子发生单核苷酸替代突变(c.3263 G>A, p.Gly1088Glu)，而患者的父母、妹妹及200例健康对照者未发现相同的突变位点。同时PCR SSP也证明了此位点的杂合性。 结论：c.3263 G>A突变位点是一个OI患者COL1A1基因的新突变位点，与OI临床表型具有一定相关性。

摘要:摘要:反应面法（response surface methodology，RSM）可应用于临床生化检验方法学的开发及研究，优化检验测量程序，了解测量程序中各检验影响因子的相互作用关系，以较少的实验成本及时间，获得较好的效果，可作为传统的单因素分析法的补充。本文介绍完整的RSM实验设计流程，并总结常用实验设计方式：3k因子设计、Box-Behnken设计、中央合成设计（central composite design，CCD），进行3种设计方式实验次数的比较，为在临床生化检验科研设计中选择合适的反应面设计方式提供参考。

摘要: