韩丹丹 , 李芳秋 , 史利宁 , 张国勇 , 李伟 , 胡毓安
2014(4):241-244.
摘要:摘要:目的:建立检测人血清中抗烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ(dipeptidyl peptidases Ⅴ,DPPⅤ)肽段IgG类抗体(抗DPPⅤ)的ELISA法,评估其对侵袭性曲霉病(IA)的早期诊断价值。 方法:用重组烟曲霉DPPⅤ肽段作为包被抗原,建立检测血清中抗DPPⅤ的ELISA法,检测105例IA患者、200例非IA患者及200例健康人血清中抗DPPⅤ水平,确定cut off值,考查方法的精密度和特异性。部分IA患者抗DPPⅤ结果与抗烟曲霉硫氧还蛋白还原酶(TR)抗体(抗TR)检测和曲霉半乳甘露聚糖(GM)检测结果对比,评价其临床应用价值。 结果:以建立的ELISA法检测吸光度(A)值为6.688、0.709的2份抗DPPⅤ抗体阳性血清,批内变异系数(CV)为4.1%和8.0%,批间CV为7.1%和10.7%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率>90%。以A值0.542为cut off值,对IA诊断的敏感性为66.7%,特异性为90.7%。非中性粒细胞缺乏的IA患者抗DPPⅤ阳性率(75.3%,55/73)高于中性粒细胞缺乏的IA患者(46.9%,15/32),差异有统计学意义(χ2=8.11,P<0.05);92例IA患者血清抗DPPⅤ、抗TR和GM测定总阳性率分别为63.0%、60.9%和73.9%,差异无统计学意义(P>0.05);中性粒细胞缺乏的IA 患者GM阳性率(89.7%)显著高于抗DPPⅤ、抗TR的阳性率(41.4%和34.5%),χ2分别为14.96、18.75,P均<0.01。抗DPPⅤ与抗TR联合检测阳性率达到82.6%,抗DPPⅤ、抗TR和GM试验三者联合检测的阳性率可提高到96.7%。 结论: 检测抗DPPⅤ抗体的ELISA法精密度和特异性较好,对侵袭性曲霉感染具有潜在的辅助诊断价值,联合多个指标检测可提高诊断的敏感性。
2014(4):245-248.
摘要:摘要:目的:用高保真DNA聚合酶介导的PCR检测β地中海贫血基因热点突变。 方法:选取已知中国人群β珠蛋白基因CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26热点突变位点为检测靶点,分别设计3′末端与野生型基因位点或突变型基因位点完全配对的引物,并用硫化磷酸修饰,进行高保真DNA聚合酶介导的引物延伸反应。用多重PCR反应体系检测临床已知分别含CD26和TATAbox-28突变热点患者的DNA标本。 结果:对野生模板而言,仅有野生型等位基因相关引物有产物产生,而突变型等位基因位点特异性引物无产物产生。反之,使用突变模板,仅突变型等位基因位点相关引物有产物产生,而野生型等位基因位点特异性引物无产物产生。高保真DNA聚合酶介导的多重引物延伸反应筛查含有CD26或TATAbox-28突变的患者DNA标本时显示,突变引物混合物只有相应突变位点的产物产生,而野生引物混合物则有除突变位点以外的其他5个位点的产物产生。 结论:建立了基于高保真DNA聚合酶的筛查β地中海贫血基因热点突变的PCR技术。
2014(4):249-251.
摘要:摘要:目的:建立检测肿瘤慢性贫血患者铁调素(hepcidin)mRNA表达水平的荧光定量PCR法,初步观察肿瘤慢性贫血患者淋巴细胞铁调素mRNA水平。 方法:建立荧光定量PCR检测铁调素mRNA的标准曲线,评价其灵敏度、特异性及重复性;检测50例体检健康者、49例肿瘤慢性贫血患者外周血淋巴细胞铁调素mRNA水平,同时检测血清白细胞介素6(IL-6)及血清铁(SI)水平。 结果:荧光定量PCR检测铁调素mRNA的灵敏度为10 copies/μL,线性范围为 101~107 copies/μL;熔解曲线示扩增峰单一;检测3份低、中、高浓度的阳性质粒批内CV分别为1.83%、1.27%、1.39%,批间CV分别为6.13%、7.48%、6.87%。肿瘤慢性贫血组铁调素 mRNA水平为[10.51(8.02~16.31)]×10-3 copies/cell,高于健康人对照组[2.57(2.20~3.20)]×10-3 copies/cell,P<0.01;外周血铁调素mRNA水平与IL-6水平呈正相关(r=0.92,P<0.01),与SI呈负相关(r=-0.83,P<0.01)。 结论: 建立了定量检测外周血淋巴细胞铁调素mRNA的荧光定量PCR法,肿瘤慢性贫血患者铁调素mRNA水平高于健康人,可能与炎症反应有关。
韩冉冉 , 黄元姣 , 陈铃 , 肖晓兰 , 易翔 , 蔡红武 , 吴勇浒
2014(4):252-254.
摘要:摘要:目的:探讨鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平与临床分期及血浆EB病毒VCA-IgA抗体的相关性。 方法:用ELISA法检测鼻咽癌患者(Ⅱ期36例,Ⅲ期104例,Ⅳ期104例)和104例体检健康者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度和EB病毒VCA-IgA抗体水平,用SPSS 16.0统计软件进行数据分析。 结果:鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度分别为0.44(0.25,0.78) ng/mL和202.71(185.79,238.54) pg/mL,显著高于体检健康者0.29(0.18,0.44) ng/mL和192.43(170.66,193.42) pg/mL(P均<0.05)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌患者血浆S100A8、S100A9蛋白浓度均高于体检健康者(P均<0.05),且Ⅱ、Ⅲ期鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度高于Ⅳ期(P<0.05);Ⅲ期S100A9蛋白浓度高于Ⅱ期(P<0.05)。相关分析结果显示,鼻咽癌患者血浆中S100A8、S100A9蛋白浓度与EB病毒VCA-IgA抗体水平无相关性(r分别为-0.04,-0.07, P均>0.05)。 结论:鼻咽癌患者血浆中S100A8和S100A9蛋白水平升高,且与临床分期有关。
2014(4):255-258.
摘要:摘要:目的:探讨microRNA-141(miR-141)在结肠癌患者血清中的表达及意义。 方法:用荧光定量 PCR(SYBR Green法)检测60例结肠癌患者和60例健康对照组血清中miR-141的表达。 结果:miR-141在结肠癌患者血清中的相对表达量为3.29±0.52,与健康对照组的1.02±0.23相比,显著升高(t=11.34,P<0.05);随着结肠癌分化程度的降低,血清miR-141的表达增高;血清miR-141在淋巴结转移组的相对表达量为4.45±0.32,在无淋巴结转移组为2.39±0.23,差异有统计学意义(t=2.34,P<0.05);结肠癌术后血清miR-141表达明显下降(t=8.53,P<0.01)。 结论:miR-141在结肠癌血清中高表达,且与结肠癌分化程度和淋巴结有无转移有关。有望作为一种新的生物标志物用于结肠癌辅助诊断。
沈洪远 , 王妍 , 黄红宇 , 马宁 , 韩志君 , 严子禾
2014(4):259-261.
摘要:摘要:目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者手术前后血浆D-二聚体(D-D)水平的变化及与预后相关性。 方法:收集77例初诊NSCLC患者及98例体检健康者血浆标本。检测NSCLC患者手术前后血浆D-D的水平变化,并探讨其与临床分期、组织分化程度的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析术前血浆D-D水平与NSCLC患者发生死亡事件的关系。 结果:NSCLC患者术前血浆D-D水平为(1.04±0.71) mg/L,显著高于术后第9天的(0.62±0.47) mg/L (t=4.350, P<0.01);也高于健康对照组的0.37±0.11 mg/L (t=9.294, P<0.01)。初诊NSCLC患者血浆D-D水平随着肿瘤临床分期递进而增加(F=9.028,P<0.01),而与肿瘤组织分化程度无明显关系(F=0.532,P>0.05)。血浆D-D为≤0.87 mg/L的NSCLC患者预后明显优于D-D>0.87 mg/L的患者(χ2=9.72,P<0.01)。 结论: D-D水平对NSCLC患者预后评估有一定价值。
2014(4):262-266.
摘要:摘要:目的:建立耐氨甲蝶呤(MTX)对映体的人白血病BALL-1和CCRF-CEM细胞,观察其生物学特性,分析不同MTX对映体耐药细胞表皮生长因子受体(EGFR)信号通路相关基因的表达。 方法:用浓度递增结合低剂量持续诱导的方法建立L(+)-MTX、D(-)-MTX耐药细胞并绘制细胞生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期,用RT-PCR法检测各细胞EGFR、KRAS、TGF、PI3K mRNA的表达情况。 结果:L(+)-MTX、D(-)-MTX耐药细胞自第4日增殖速度明显较亲本细胞慢,而L(-)-MTX耐药细胞增殖速度明显较D(+)-MTX耐药细胞慢。与亲本细胞BALL-1、CCRF-CEM相比,两种耐药细胞周期分布中G0/G1 期所占比例增加,S期细胞所占比例减少。L(+)-MTX/BALL-1、D(-)-MTX/BALL-1间EGFR、K-Ras mRNA 差异有统计学意义(P均<0.05)。L(+)-MTX/CCRF-CEM、D(-)-MTX/CCRF-CEM组间EGFR、K-Ras mRNA 差异有统计学意义(P均<0.05)。BALL-1细胞组、CCRF-CEM细胞TGF mRNA表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05),而两种细胞均无PI3K mRNA表达。结论:耐D(-)-MTX细胞增殖能力大于L(-)-MTX细胞;耐L(-)-MTX、D(-)-MTX细胞EGFR、K-Ras mRNA表达存在差异。
2014(4):267-271.
摘要:摘要:目的:筛选并构建肝再生增强因子(ALR)基因的最佳RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,为研究ALR基因表达下调后对肝癌细胞生物学特性的影响提供依据。 方法:针对ALR基因序列设计并合成4个siRNA靶点,酶切连接GV118-GFP载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定;在包含ALR基因的质粒中以PCR法扩增出ALR基因,克隆至慢病毒载体GV143,构建AL基因的过表达质粒,将RNAi重组慢病毒载体和ALR的基因表达质粒共转染293T细胞,用western blot检测其对目的基因ALR的敲减效率。 结果:酶切鉴定证实成功构建了ALR RNAi慢病毒载体及ALR基因过表达载体。不同浓度干扰质粒(0.4 μg和0.8 μg)的western blot结果显示,相较于阴性对照组,KD1组ALR蛋白的表达水平(0.51±0.02,0.36±0.09)、KD2组ALR蛋白的表达水平(0.65±0.04,0.49±0.02)、KD3组ALR蛋白的表达水平(0.62±0.07,0.52±0.02)均降低(P均<0.05),而以KD1组蛋白表达量最低。 结论:成功筛选并构建了能有效沉默ALR基因的最佳RNAi重组慢病毒载体,为后续实验奠定基础。
伍仕敏 , 项杰 , 周虹 , 吴志强 , 李虹泽 , 刘为勇 , 吴建国
2014(4):272-276.
摘要:摘要:目的:了解武汉地区手足口病(HFMD)患儿柯萨奇病毒A16型(CA16)的基因型及重组特点。 方法:收集2011年4月至2012年3月武汉地区1 844例HFMD患儿的咽拭子标本,用实时荧光定量PCR检测CA16核酸,阳性标本进行病毒分离,对分离株进行VP1基因序列测序,选择2株来自重症和1株来自轻症患儿的CA16病毒株构建VP1序列系统进化树并分析其全基因组序列的重组特点。 结果:1 844例HFMD患儿的咽拭子标本中分离出42株CA16,VP1序列系统进化分析显示,所有分离株均属于B1亚型,其中13株属于B1a亚群,29株属于B1b亚群。重组分析表明,3株CA16分离株均为亲本株CA16 A型毒株FY18/AH/CHN/2008和EV71 A型毒株Hubei-09/HB/CHN/2009型间重组所产生,重组交叉位点为基因组P2区2A和2B基因交界处。 结论:武汉地区的CA16分离株均为 B1亚型,其中B1b亚群占明显优势,且CA16分离株存在亲本株CA16 A型和EV71 A型毒株的型间重组。
2014(4):277-280.
摘要:摘要:目的:研究人单核细胞THP-1细胞系源性M2型巨噬细胞与卵巢癌SKOV3细胞相互作用后,肿瘤细胞Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)mRNA表达水平的改变。 方法:用佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞,用免疫荧光技术检测THP 1细胞膜表面CD206分子的表达;用Transwell小室建立巨噬细胞与卵巢癌SKOV3细胞体外非接触式共培养模型;相互作用24 h后提取SKOV3细胞总RNA,用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法检测TLR1~TLR9 mRNA的表达水平并通过相对定量法(2-△△Ct)进行分析。 结果:PMA诱导后,THP-1细胞巨噬细胞化,CD206分子高表达;卵巢癌细胞经共培养后TLR2、TLR3、TLR4、TLR5 mRNA表达水平显著增高,2-△△Ct分别为25.99±1.09、7.11±0.27、16.92±0.11、44.80±0.78。 结论:卵巢癌SKOV3细胞与M2型巨噬细胞相互作用后,肿瘤细胞TLR2~TLR5 mRNA表达显著增加,可能参与卵巢癌发生、发展过程。
2014(4):281-283.
摘要:摘要: 嗜吞噬细胞无形体(AP)主要引起人类经蜱叮咬传播的人粒细胞无形体病(HGA)。快速、准确的针对HGA的检测技术能够有效地控制其爆发,减少死亡病例。目前AP感染的诊断方法有临床诊断、血清学诊断、形态学诊断、分子生物学诊断等。其中AP分子检测技术特异性高、操作简便,快速,是目前对AP感染诊断的常用方法。针对AP分子检测主要方法包括巢式PCR (nested PCR)、实时定量荧光PCR(real-time PCR)、环介导等温扩增技术(LAMP)等。三类分子检测技术各有优缺点,应根据具体情况选用适当的检测手段,提高AP感染的早期诊断准确率。
2014(4):284-286.
摘要:摘要: 甲胎蛋白(alpha fetoprotein, AFP)阳性胃癌(AFP-producing gastric carcinoma, APGC)患者的主要临床特征是血清AFP水平明显增高,生存期短,晚期病例多,术后复发率高,转移率高。研究显示,AFP是影响APGC高侵袭性生物学行为的一个独立因素,其具体分子机制可能与调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、c-Met、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription factor 3, STAT3)、Fas、AT基序结合因子1 (AT motif binding factor 1, ATBF1)等分子的异常表达及癌细胞的遗传表型有关,但尚需进一步阐明。本文对近年来国内外有关APGC高侵袭性生物学行为的研究进展做一综述,为后续研究其具体分子调控机制提供理论依据。
张萍 , 徐敏 , 严孝岭 , 高德玉 , 高文博 , 虞伟 , 李晓军
2014(4):287-290.
摘要:摘要:目的:提纯并鉴定类风湿关节炎(RA)患者血清中免疫复合物(s-IC),并研究其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖功能的影响。 方法:用G蛋白亲和层析法分别从抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)阳性(ACPA+)RA患者、SLE患者及健康人对照血清中提取IC,用SDS-PAGE对提取的s IC进行纯度鉴定,用化学发光免疫分析法测定s-IC中ACPA含量,用western blot法鉴定纯化IC中的瓜氨酸化蛋白质。体外培养HUVEC,分别用RA患者血清IC(RA-IC)、SLE患者血清IC(SLE-IC)、健康人血清IC(C-IC)刺激HUVEC,培养24 h后,用CCK-8细胞增殖法检测细胞的增殖水平。 结果:用G蛋白亲和层析法可自血清中提取出纯度较高的IC,ACPA+RA患者血清经G蛋白柱纯化后,IC中ACPA的回收率可达56.85%。western blot结果显示,RA患者s-IC中在相对分子质量(Mr)25 000~55 000间出现较多SLE-IC和C-IC中未有的条带。用s-IC刺激体外培养的HUVEC,当s-IC浓度为50 μg/mL时,RA-IC与SLE-IC组HUVEC的增殖水平均显著高于C-IC组(P均<0.01);当IC浓度为100 μg/mL时,RA IC组的HUVEC增殖水平显著高于SLE-IC与C-IC组(P均<0.01)。结论:成功提取ACPA+RA患者s-IC,RA-IC能显著促进HUVEC增殖。
李里明 , 蒋留留 , 祝源 , 严永敏 , 叶惠慧 , 贾浩源 , 薛建国 , 朱伟 , 许文荣 , 钱晖
2014(4):291-294.
摘要:摘要:目的:探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)来源的外体(exosomes,hucMSC-Ex)对脂多糖(LPS)诱导的人肝星状细胞系LX2活化的抑制作用及其可能机制。 方法:体外培养LX2细胞,分别设PBS对照组、LPS组(100 ng/mL)及hucMSC-Ex组(LPS+150 μg/mL hucMSC-Ex),48 h后收集细胞并提取相应的RNA及蛋白质。western blot检测LX2活化相关指标(α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白)和凋亡指标(Bcl2、Bax及caspase3蛋白)的表达情况;RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测α-SMA mRNA表达水平;MTT法分析hucMSC-Ex对LX2细胞活化后增殖的影响。 结果:LPS可刺激LX2细胞活化,活化后的LX2细胞形态由不规则形状向成纤维细胞样改变,并高表达α SMA、ColΙα1及TGF β1蛋白,其灰度值分别上升约2.45、2.34、2.77倍(P均<0.05);Bax及caspase3蛋白表达下降而Bcl2蛋白表达增强;LX2增殖能力增强;经hucMSC-Ex处理后,细胞形态由细长向不规则形态转变,α-SMA、ColΙα1及TGF-β1蛋白表达减弱,高表达Bax及caspase3蛋白而Bcl2蛋白表达下降,且细胞增殖减少(F=23.44,P<0.05)。 结论:hucMSC-Ex能够抑制LPS诱导的LX2细胞活化,降低其增殖能力并促进细胞凋亡。
秦绪珍 , 程倩 , 徐二木 , 叶阿里 , 高尚 , 高学慧 , 齐志宏 , 谢少伟 , 邱玲
2014(4):295-298.
摘要:摘要:目的:通过复现碱性磷酸酶(ALP)国际参考方法评价4种常规测量方法的正确度。 方法:实验室内复现国际临床化学联合会(IFCC)公布的ALP参考方法;参考临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A2文件用患者新鲜血清标本将Roche Modular系统、Beckman AU系统、Siemens Dimension系统、迈克试剂-Beckman AU系统与参考方法进行比对,评价常规方法与参考方法的相关性和偏移,根据回归方程调整常规方法的系数,重新比较与参考方法的相关性和偏移。 结果:4种检测体系与参考方法的相关系数r均大于0.99。与参考方法相比,Roche系统存在负偏移,Beckman AU系统、Siemens Dimension系统存在正偏移,国产迈克试剂-Beckman AU仪器系统偏移最小。通过线性回归方程调整系数后,常规方法与参考方法的结果偏移降低。 结论:实验室通过建立参考方法并与常规方法进行方法学比较,调整仪器参数,可最大程度地保证检测结果的可比性和准确性,是实验室内质量控制的有效手段。
王彦 , 张葵 , 徐志晔 , 魏红霞 , 张正芳 , 顾广煜 , 谭婷婷
2014(4):299-301.
摘要:摘要:目的:探讨不同温度、不同贮存时间保存标本对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定糖化血红蛋白A1c(HbA1c)结果稳定性的影响。 方法:收集5例HbA1c水平不同的全血标本,用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪于当日3 h内测定结果,然后将各标本充分混匀后分装成4小管,分组贮存在室温(20~22 ℃)、冷藏(4~6 ℃)、冷冻(-18~-20 ℃)和低温冷冻(-74~-76 ℃)条件下,分别在贮存的第1、2、5、6、7、14、20、21、60和180天进行测定。以低温冷冻保存标本所测结果为标准,每个标本的HbA1c结果在低温冷冻组x±0.2%范围内为可接受结果。当每组5个标本的结果都在可接受范围内,说明标本在特定时间、特定温度下稳定。 结果:标本用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定的稳定性分别为:室温和-18~-20 ℃可稳定5 d,4~6 ℃可稳定20 d;-74~-76 ℃至少可稳定180 d。 结论:不同温度、不同贮存时间对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c结果稳定性有影响。
王炳龙 , 陈守涛 , 马跃飞 , 张建东 , 王玉琴 , 方东萍 , 杨滨 , 欧启水
2014(4):302-305.
摘要:摘要:目的:在实验室信息系统(LIS)中以检验全过程和标本的流转为主线,对关键环节进行时间节点监控,建立“精确到点、责任到人”的检验标本全过程监控系统。 方法:LIS与医院信息系统(HIS)实现无缝连接,设置关键时间节点并加以监控,准确记录以条码为唯一标识的检验标本在临床科室、运送员工、检验科室等各环节、各部门之间交接的时间和责任人。比较节点监控前后标本遗漏率、标本平均流转时间、结果审核及时率、门诊等待抽血的耗时及门诊标本平均结果审核时间。 结果:对检验标本实现时间节点监控后,减少了标本在交接过程及结果报告等各环节的主观随意性,在对临床科室和患者进行的调查反馈中发现,满意度由96.0%提高为97.6%;检验标本遗漏率由1.34%下降为0.57%;标本平均流转时间由47.2 min缩短为38.6 min;结果审核及时率由97.5%提高为98.6%;门诊患者等待抽血的时间由40~50 min缩短为20~30 min;门诊标本的平均结果审核时间由42.2 min缩短为37.1 min。 结论:LIS中建立关键时间节点监控,实现“精确到点、责任到人”的监控,可提高标本周转的效率,保证检验结果的可靠性和及时性,对保障患者安全目标具有重要意义。
宁长秀 , 胡龙华 , 汪红 , 钟桥石 , 杭亚平 , 王小中 , 胡晓彦 , 余方友
2014(4):306-310.
摘要:摘要:目的:探讨临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制及同源性。 方法:收集南昌地区4家教学医院耐碳青霉烯类抗菌药物(亚胺培南和/或美罗培南)的肺炎克雷伯菌29株,双纸片增效法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、三维实验检测AmpC酶、改良Hodge实验和双纸片协同法检测碳青霉烯酶,PCR扩增耐药基因,并对扩增产物测序,确定其基因型。脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行同源性分析。 结果:29株分离菌除对阿米卡星的耐药率较低(37.9%)外,对其他13种抗菌药物的耐药率均大于69%,其中对头孢呋辛、亚胺培南的耐药率为100%,多重耐药肺炎克雷伯菌的检出率为62.1%(18/29)。29株分离菌中有19株携带碳青霉烯酶基因,占65.5%(19/29),以blaKPC-2为主(44.8%,13/29),其次为blaNDM-1、blaIMP-26及blaIMP-4,携带率分别为17.2%(5/29)、10.3%(3/29)及6.9%(2/29),另有3株同时携带blaKPC-2和blaIMP-26,1株同时携带blaKPC-2和blaIMP-4。17株除携带碳青霉烯酶基因外,还携带ESBLs基因和(或)AmpC基因,占58.6%。未检测到VIM、GES、SPM及OXA等其他碳青霉烯酶基因。29株分离菌中有27株被PFGE成功分型,分别属于20个不同克隆,其余2株分型不成功。属于同一克隆型且携带blaKPC-2基因的4株菌来自同一医院。 结论: CRKP耐药及多重耐药现象严重;携带碳青霉烯酶基因是肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类药物的主要原因,blaKPC-2携带率高,且在局部有短暂流行。本地区已监测到携带blaNDM的肺炎克雷伯菌,值得关注。
2014(4):311-313.
摘要:摘要:目的:探讨miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a与SLE治疗的相关性。 方法:采集17例健康对照者和22例治疗前、后SLE患者外周血,分离单个核细胞(PBMC),用real-time PCR检测各组PBMC中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达情况。 结果:SLE患者PBMC 中miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a的表达均低于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前SLE患者组miRNA-155、miRNA-181a的表达低于治疗后SLE患者组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前SLE患者组miRNA-146a、miRNA-31的表达与治疗后SLE组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论:miRNA-146a、miRNA-155、miRNA-31、miRNA-181a在SLE患者PBMC中表达普遍降低,治疗后患者PBMC中miRNA-155、miRNA-181a的表达明显高于治疗前,提示上述miRNA有望成为SLE患者治疗监测指标。
李娜 , 吴秋月 , 曹翔 , 李天赋 , 张翠 , 李卫巍 , 崔英霞 , 李晓军 , 许豪勤 , 夏欣一
2014(4):314-316.
摘要:摘要:目的:对1例成骨不全(OI)患者Ⅰ型胶原基因(COL1A1和COL1A2)进行基因突变检测,为研究中国人群的OI基因突变特点提供线索。 方法:患者具有OI典型的蓝巩膜、易骨折、牙本质发育不全等临床表现,临床诊断为OI,提取患者外周血基因组DNA,对所有启动子区、外显子及外显子 内含子边界区进行DNA测序,通过序列特异引物PCR(PCR-SSP)法进一步验证,以患者的父母、妹妹及200例体检健康者作为对照。 结果:DNA测序结果显示,OI患者COL1A1基因45号外显子发生单核苷酸替代突变(c.3263 G>A, p.Gly1088Glu),而患者的父母、妹妹及200例健康对照者未发现相同的突变位点。同时PCR SSP也证明了此位点的杂合性。 结论:c.3263 G>A突变位点是一个OI患者COL1A1基因的新突变位点,与OI临床表型具有一定相关性。
2014(4):317-318.
摘要:摘要:反应面法(response surface methodology,RSM)可应用于临床生化检验方法学的开发及研究,优化检验测量程序,了解测量程序中各检验影响因子的相互作用关系,以较少的实验成本及时间,获得较好的效果,可作为传统的单因素分析法的补充。本文介绍完整的RSM实验设计流程,并总结常用实验设计方式:3k因子设计、Box-Behnken设计、中央合成设计(central composite design,CCD),进行3种设计方式实验次数的比较,为在临床生化检验科研设计中选择合适的反应面设计方式提供参考。