摘要:摘要： 随着测序技术的不断发展，成本低、速度快、通量高的新一代测序(NGS)技术在肿瘤临床领域显现出很高的应用价值。本文对NGS在肿瘤临床中的应用和研究进行了综述，主要包括检测胚系突变和单核苷酸多态性用于肿瘤预测预防，检测血浆中循环肿瘤DNA（ctDNA）用于肿瘤的早期诊断,基于NGS的单细胞测序技术检测体细胞突变用于指导个体化、靶向治疗及疗效预测。同时也简要介绍了NGS技术在临床应用中面临的挑战，为其更好地服务于临床提供思路。

摘要:摘要:目的：建立检测人杯状病毒(human calicivirus, HuCVs, 主要包括SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ)的一步法多重荧光定量RT-PCR(rRT-PCR)法。 方法：用Primer Express 3.0 软件设计特异性引物和探针，通过合成的对应病毒基因的质粒来评价该方法的灵敏度、特异性和重复性，检测临床标本并对阳性结果进行基因测序验证。 结果：建立的rRT-PCR法检测SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ的灵敏度均达到10³ copies/mL，特异性为100%，且变异系数（CV）均≤1.275%。HuCVs检出率为21.43%（75/350），其中SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ分别为14.67%(11/75)、21.33%(16/75)和64.00%(48/75)。随机选择检测阳性结果进行测序，结果均与该法检测结果一致。 结论：建立的rRT-PCR法可同时检测并区分SV、NoV-GⅠ和NoV-GⅡ病毒，可用于HuCVs引起的急性腹泻散发和暴发疫情的监测。

摘要:摘要:目的：探讨microRNA-21（miRNA-21，miR-21）在非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺癌组织和血浆中的表达及临床意义。 方法：用荧光定量PCR检测100例NSCLC患者肺癌组织及癌旁组织miR-21的相对表达量，并检测100例NSCLC患者及100例健康人血浆miR-21的相对表达量，用t检验比较其表达水平的差异，用卡方检验分析肺癌组织miR-21表达量与各临床病理资料之间的关系， ROC曲线评价miR-21对NSCLC的诊断价值。 结果：miR-21在肺癌组织的表达水平高于癌旁组织（t=10.154，P<0.05），且在NSCLC患者血浆中的表达水平高于健康人（t=13.444，P<0.05）；肺癌组织中miR-21高表达患者肺癌复发转移率明显高于低表达患者（χ²=11.335，P<0.05）；生存分析显示，肺癌组织或血浆中miR-21高表达患者较低表达者生存期明显缩短（χ²为6.685和5.692，P<0.05）；ROC曲线表明，miR-21对NSCLC诊断价值中等。 结论：miR-21在NSCLC患者癌组织及血浆中均有高表达，肺癌组织miR-21高表达与NSCLC复发转移具有密切关系，可作为NSCLC诊断及评价预后的指标。

摘要:摘要:目的：建立软骨发育不全（ACH）患者的FGFR3基因检测方法。 方法：用PCR扩增和测序技术对临床上疑似ACH的14例患者的FGFR3基因突变进行测序。 结果：FGFR3基因的外显子10测序结果显示，14例疑似ACH患者中10例检出FGFR3基因1138位G→A突变。对4例未检出突变的样本进行FGFR3基因的全部外显子测序，有2例样本检出FGFR3基因882位T→C杂合突变，最后确定其为已知的单核苷酸多态性（SNP）位点（rs2234909）。对4例样本中的1例进行了后续检查，证实该受检者不是ACH患者。 结论：FGFR3基因的突变检测有助于疑似ACH患者的明确诊断，对遗传咨询具有重要意义。

摘要:摘要：目的：观察急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者入院时血清铁（SF）水平与急性心力衰竭（AHF）发生率的相关性。 方法：对203例首次住院的急性STEMI患者资料进行回顾性分析，按住院期间是否发生AHF将患者分为AHF组和无AHF（NAHF）组，比较两组SF降低（＜8.95 μmol/L）的百分率；按SF水平的四分位数分为Q1（＜6.1 μmol/L）、Q2（6.1～9.2 μmol/L）、Q3（9.3～12.8 μmol/L）和Q4（＞12.8 μmol/L）组，比较不同SF水平组的院内AHF发生率；分析SF水平与Hb、B型钠尿肽（BNP）、心肌肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、C反应蛋白（CRP）水平和左室射血分数（LVEF）等参数的相关性。 结果：AHF组SF降低的发生率比 NAHF组高（55.6% vs 33.8%， P＜0.05）；Q1~ Q4组院内AHF的发病率分别是78.4%、76.0%、56.9%和54.9%（P＜0.05）；在SF较低的组，前壁心肌梗死的发生率较高（P＜0.05），CRP水平较高（P＜0.05），LVEF较低（P＜0.05）。相关分析表明SF水平与CRP呈负相关（r=－0.571，P＜0.05），与LVEF呈正相关(r=0.267, P＜0.05)，与 BNP和住院天数呈负相关（r=－0.286、－0.233, P＜0.05）。 结论：急性STEMI患者入院SF水平越低，院内心力衰竭发病率越高。

摘要:摘要：目的：评价血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子-1（TIMP-1）与2型糖尿病心肌病的关系及两者相关性。 方法：用竞争ELISA法检测44例2型糖尿病心肌病（DCM组）患者、44例2型糖尿病非心肌病（NDCM组）患者及40例体检健康者（CON组）血清MMP-2与TIMP-1水平。 结果：CON、NDCM、DCM 3组血清MMP-2水平依次降低，差异有统计学意义（P<0.05）；血清TIMP-1水平依次升高，且DCM组高于NDCM组，差异有统计学意义（P<0.05）。 血清TIMP-1与MMP-2呈高度负相关（r〗=-0.752，P<0.05）。Logistic回归分析提示，血清TIMP-1水平升高是DCM的独立危险因素，MMP-2/TIMP-1比值降低是DCM的高危因素。结论：血清TIMP-1与MMP-2是DCM的独立危险因素，对评估DCM的发生有一定价值。

摘要:摘要:目的：观察D-二聚体（D-D）、N-末端B型钠尿肽前体（NT-proBNP）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）及降钙素原（PCT）联合检测在急性主动脉夹层（AAD）预后判断中的价值。 方法：回顾性分析143例AAD患者（出院时好转患者91例，死亡52例）凝血功能、心功能、炎性指标，判断D-D、NT-proBNP、cTnT和PCT在AAD预后判断中的价值。 结果：死亡组D-D、纤维蛋白原降解产物（FDP）、cTnT、NT-proBNP、PCT高于生存组（P<0.05）。D-D+PCT、D-D+NT-proBNP、D-D+cTnT、NT-proBNP+cTnT、NT-proBNP+cTnT+D-D及NT-proBNP+cTnT+D-D+PCT并联法联合检测（1项为阳性即判定为阳性）对AAD预后判断的敏感性分别为100%、98.1%、96.2%、78.8%、98.1%及100%；序贯法联合检测（各项均阳性判定为阳性,1项阴性即判为阴性）对AAD预后判断的的特异性为70.3%、44.1%、92.3%、94.5%、94.5%及97.8%。 结论：联合检测D-D、cTnT、NT-proBNP、PCT有助于判断AAD的预后。

摘要:摘要：目的：观察急性冠脉综合征（ACS）患者血清缺血修饰清蛋白和清蛋白比值（IMARs）与总抗氧化能力（TAS）、超氧化物歧化酶(SOD)的相关性。 方法：检测92例ACS患者、44例非缺血性胸痛（NICP）患者和45例体检健康者血清缺血修饰清蛋白（IMA）、TAS、SOD和清蛋白（Alb），对数据进行统计学分析。 结果：ACS组血清IMARs水平高于健康人对照组（t=5.465，P<0.05），TAS、SOD、Alb低于健康人对照组(t分别为2.593、4.027、6.511，P<0.05)。所有研究对象血清IMA与Alb呈负相关（r=-0.775），IMARs与氧化应激指标SOD、TAS存在负相关（r分别为-0.758、-0.633），SOD与TAS呈正相关(r=0.886),P均＜0.05。 结论：ACS患者氧化应激指标TAS、SOD降低的同时，伴随血清IMARs升高；血清IMARs或可作为反映ACS患者氧化应激状态的指标之一。

摘要:摘要：目的：研究胃癌组织来源的间充质干细胞(GC-MSC)培养上清液对胃癌细胞系HGC-27的作用。 方法：以GC-MSC培养的上清液和HGC-27常规培养基等体积混合配制后培养的HGC-27作为处理组；GC-MSC培养基与高糖DMEM培养基等体积混合配制后培养的HGC-27作为对照组。收集处理组与对照组中HGC-27细胞，用平板克隆形成和MTT增殖试验检测细胞增殖能力；Transwell法检测细胞迁移能力；western blot检测细胞中上皮-间质转化（EMT）相关蛋白质的表达。 结果：处理组HGC-27细胞的克隆形成能力、细胞增殖活力和迁移能力均明显强于对照组（P均<0.01）。EMT相关蛋白检测分析显示，处理组HGC-27细胞中vimentin、N-cadherin和α-SMA蛋白表达水平显著增高，E-cadherin蛋白表达显著降低（P均<0.01）。 结论：GC-MSC可通过旁分泌的作用方式促进胃癌细胞的增殖、迁移及EMT。

摘要:摘要：目的：研究RhoA、 RockⅠ促进大鼠Leydig细胞增殖的机制，探讨膜联蛋白5调控Leydig细胞增殖的新途径。 方法：用1 nmol/L膜联蛋白5处理原代培养大鼠Leydig细胞12、24、48 h后，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期，western blot检测RhoA和RockⅠ的蛋白质表达情况。 结果：MTT法结果显示，1 nmol/L膜联蛋白5呈显著的时间依赖的促进Leydig细胞增殖作用，且24 h组细胞增殖能力与对照组差异最为显著（0.251±0.019 vs 0.207±0.009，t=4.380，P＜0.01）；流式细胞分析发现，1 nmol/L膜联蛋白5作用于Leydig细胞，以作用24 h时对细胞周期的影响最为显著，可使G2+M期比例比对照组升高(12.24±0.84 vs 7.79±1.15，t=5.407)，G0/G1期比例下降(67.61±0.37 vs 74.49±0.73，t=-14.64)，P均＜0.01；western bolt结果表明，膜联蛋白5作用12、24、48 h后Leydig细胞RhoA表达结果分别为1.39±0.29、2.21±0.38、1.46±0.19，与0 h组结果0.89±0.41比较，均有升高（t=2.028，P＜0.05；t=4.736，P＜0.01；t=2.550，P＜0.05)；膜联蛋白5作用24、48 h后Leydig细胞Rock表达结果分别为1.14±0.18、1.03±0.17，与0 h组结果0.72±0.22比较均升高（t=2.944，P＜0.01；t=2.246，P＜0.05)。 结论：RhoA、RockⅠ可能参与膜联蛋白5促进细胞周期G0/G1进程，最终促进Leydig细胞的增殖。

摘要:摘要：目的：探讨慢性乙型肝炎患者IL-10-592各基因型与血清中IL-10表达水平的关系。 方法：以117例HBV感染者作为疾病组，81例体检健康者（仅抗HBc为阳性的既往感染者）作为对照组。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测两组IL-10-592基因型，ELISA法检测两组血清IL-10的浓度。结果：疾病组血清IL-10水平为348.28（231.9，411.76）pg/mL，与对照组的228.74（160.59，364.18） pg/mL比较，差异有统计学意义（H=14.49，P＜0.05）。患者IL-10-592 CC基因型血清IL-10水平为448.64（402.51，584.78） pg/mL，与AA基因型294.78（190.49，354.36） pg/mL和AC基因型297.01（205.99，385.33） pg/mL比较，差异均有统计学意义（H分别为37.87和30.92，P均＜0.05）。而AA基因型与AC基因型比较，差异无统计学意义（H=0.10，P>0.05）。 结论：慢性乙肝患者IL-10启动子592位点的多态性影响血清IL-10的水平，CC基因型促进IL-10高表达，AA基因型引起IL-10低表达。

摘要:摘要:基因测序技术是描绘基因组特征的有力工具，可有效检测出导致肿瘤发生、发展的基因突变，在肿瘤发病机制研究、药物治疗靶点筛查、临床诊疗及疾病预防等方面发挥重要作用。肺癌是一种发病率和死亡率极高、预后极差的恶性肿瘤，目前临床存在早期诊断困难、治疗效果不佳等问题。随着新一代基因测序技术的发展，测序时间缩短、费用降低，基因测序技术已成为研究肿瘤致病基因的重要方法。利用基因测序技术筛选肺癌的致病基因，研究肺癌的发病机制，进而指导肺癌的诊疗，可有望改进肺癌的诊疗现状。近年来，关于肺癌基因组测序方面的研究取得了巨大进展，本文就基因测序技术及其在肺癌中的应用作一综述。

摘要:摘要：基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）是一种新型的微生物鉴定技术，具有准确、快速、高通量等特点，目前在细菌和真菌的鉴定方面已比较成熟，但在病毒方面应用较少。本文从病毒的诊断、分型及耐药基因检测3个方面对MALDI-TOF-MS在临床病毒学中的应用作一综述。

摘要:摘要：目的：探讨铁稳态调节分子铁调素(hepcidin)在促红细胞生成素(EPO)抵抗的维持性血液透析（MHD）患者中的表达及其与机体慢性炎症、铁稳态的关系，分析铁调素对EPO抵抗的MHD患者的影响。 方法：ELISA法测定30例EPO抵抗MHD患者、30例无贫血MHD患者以及30例健康人对照者的血清铁调素和IL-6水平，分析其与Hb、肾小球滤过率（GFR）和血清铁蛋白（SF）的相关性。 结果：MHD组患者铁调素、IL-6、SF均高于健康人对照组，EPO抵抗MHD组铁调素、IL-6、SF均高于无贫血MHD组，差异均有统计学意义(P<0.01)。血清铁调素水平在所有标本中与SF、IL-6呈正相关(r=0.929、0.962)；与GFR、Hb呈负相关(r=－0.649、－0.736)，均有统计学意义(P<0.01)。铁调素和IL-6预测MHD患者EPO反应性的ROC曲线下面积为0.933及0.917，通过临床治疗后EPO抵抗MHD组铁调素、IL-6、SF表达降低，Hb升高(P均<0.05)。 结论：EPO抵抗患者铁调素表达升高，铁调素与机体炎症水平、铁代谢状态及肾功能损害程度相关，或可用于预测MHD患者EPO反应性。

摘要:摘要：目的：分析SLE患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-132和miR-212的表达水平及临床意义。 方法：提取PBMC中的总RNA，运用茎环逆转录实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测24例健康人及48例SLE患者PBMC中miR-132和miR-212的相对表达水平，分析其与临床检验指标的相关性。 结果：SLE患者中miR-132相对表达量为1.72±0.071，与健康人对照组0.99±0.037比较，差异有统计学意义（t=-6.881, P=0.000）。健康人和SLE患者miR-212相对表达水平分别是0.99±0.020和1.03(0.982,1.048)，差异未见统计学意义（Z=1.302，P=0.197）。相关性分析结果显示，SLE患者中miR-132的表达量与抗双链DNA（dsDNA）抗体以及SLE患者疾病活动指数（SLEDAI）呈正相关（r分别为0.740和0.526，P均＜0.05）；而miR-212的表达量与抗dsDNA抗体（r=0.106, P=0.474）和SLEDAI（r=0.005,P=0.973）等临床指标无相关性。 结论：miR-132在SLE患者PBMC中的表达水平升高，可能参与SLE的致病过程。

摘要:摘要：目的：调查云南省育龄人群地中海贫血（地贫）患病率。 方法：对孕前咨询的育龄夫妇和产前诊断孕妇进行Hb电泳和血常规检测，将Hb电泳阳性和（或）血常规指标阳性定义为筛查阳性,根据检测结果进行统计学分析。 结果：在5 450例完成筛查的受检者中，筛查出地贫携带者或患者570例（10.5%）。地贫筛查阳性率较高的民族依次为傣族（29.0%）、傈僳族（26.7%）、壮族（25.0%）、回族（13.4%）；筛查阳性率较高的地区依次为德宏州（25.0%）、西双版纳州（21.7%）和文山州（20.1%）。 结论: 云南省育龄人群地贫患病率较高，用血常规联合Hb电泳技术进行地贫筛查，可以有效地筛查出地贫。

摘要:摘要：目的：调查赣州市城镇居民地中海贫血（地贫）基因携带率、突变类型及分布特征。 方法：2011年8~11月连续采集3 655例赣州市城镇健康体检者外周血进行红细胞参数分析，以平均红细胞体积（MCV）<82 fL或平均红细胞血红蛋白含量（MCH）<27 pg为地贫表型阳性筛查指标。阳性标本用导流杂交技术检测5种α和15种β珠蛋白基因突变。 结果：表型筛查阳性标本771例，检出α地贫246例，β地贫82例，α复合β地贫8例。检出5种α地贫等位基因-^SEA/、-α^3.7/、-α^4.2/、αα^QS/和αα^CS/；检出6种β地贫突变类型ⅣSⅡ-654(C>T)、CD41-42( CTTT)、-28(A>G)、CD17(A>T)、CD27-28(+C)、-29(A>G)。赣州市城镇居民地贫基因携带率为9.44%，其中α地贫6.98%，β地贫2.46%。 结论: 查明赣州市城镇居民地贫的分子流行病学特征，为地贫防控提供了参考资料。

摘要:摘要：目的：探讨耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)携带psm-mec基因的情况及产细菌生物膜（biofilm，Bf）的能力，为进一步分析psm-mec与Bf的关系奠定基础。 方法：收集临床分离并经全自动微生物鉴定系统准确鉴定的表皮葡萄球菌84株，通过PCR扩增esp和mecA基因准确鉴定和区分甲氧西林敏感表皮葡萄球菌（MSSE）和MRSE，常规PCR检测psm-mec基因确定携带psm-mec菌株，PCR扩增fudoh基因及测序检测psm-mec上游有无基因突变，96孔培养板半定量法评估菌株产Bf的能力。 结果：84株表皮葡萄球菌中esp基因均阳性，mecA基因阳性64株，故MRSE为64株(76.2%)。MRSE中psm-mec基因的携带率为39.1%（25/64）。Bf半定量检测发现，25株psm-mec阳性MRSE中产Bf 20株（80%），39株psm-mec阴性MRSE中产Bf 13株（33.33%），差异有统计学意义（χ²=13.28，P<0.05）。fudoh基因序列分析发现，20株产Bf且携带psm-mec的MRSE均未发现基因突变，另有3株不产Bf的psm-mec阳性MRSE在psm-mec上游存在点突变（G>A）。 结论: psm-mec广泛存在于临床分离的MRSE中，绝大部分携带psm-mec的MRSE具有Bf形成能力。

摘要:摘要：目的：探讨3株对碳青霉烯类药物不敏感的产气肠杆菌的耐药机制及同源性。 方法：用生化和16S rDNA测序的方法鉴定细菌；用Bio Mérieux公司全自动药敏分析仪测定最小抑菌浓度（MIC），对亚胺培南和美罗培南的MIC用E-test法验证；双纸片协同实验测定金属酶的表型；PCR法扩增bla_IMP、bla_VIM、bla_GIM、bla_SPM、bla_SIM、bla_OXA-51-like、bla_OXA-23-like、bla_OXA-40-like、bla_OXA-58-like和bla_NDM-1，阳性产物克隆转化后提取质粒进行测序和BLAST比对分析；用肠杆菌基因间重复一致序列PCR(enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR，ERIC-PCR)进行菌株分型。 结果: 两种方法鉴定3株细菌均为产气肠杆菌，对左氧氟沙星、环丙沙星、多黏菌素B敏感，对青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类均表现耐药或中介。双纸片协同实验均为阳性，扩增和序列比对的结果证明均携带bla_NDM-1，其余金属β-内酰胺酶和OXA类β-内酰胺酶基因的扩增均为阴性。ERIC-PCR分型获得的条带完全一致，证明3株产气肠杆菌为同一克隆。 结论: 产Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶（NDM-1）的产气肠杆菌为院内交叉感染获得，应加强产NDM-1细菌的监控。

摘要:摘要：目的：通过扩增阻滞突变系统PCR（ARMS-PCR）检测Hb New York病，并对阳性患者进行表型分析。 方法：用毛细管电泳筛查出可疑Hb New York患者，用ARMS-PCR和基因测序技术同时对可疑阳性患者进行检测,并对确诊患者进行表型分析。 结果：在23 026例标本中共筛检出可疑Hb New York病例28例，用ARMS-PCR和基因测序技术确诊24例，二者吻合率达100%。 结论：ARMS-PCR可快速检测Hb New York病，适于推广应用。

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摘要:摘要：目的：评价xTAG呼吸道病毒群快速检测（Respiratory Virus Panel Fast Array，RVP Fast）技术检测呼吸道病毒的临床应用价值。 方法：选取经实时荧光定量PCR/RT-PCR筛查的74份呼吸道病毒阳性和4份阴性鼻拭子标本，用RVP Fast和RT-PCR同时检测78份标本的8种呼吸道病毒及其亚型（共19型），运用McNemar χ²检验，Kappa检验和线性回归方法对检测结果进行统计处理。 结果：两种方法检测78份标本有71份结果完全相符，包括55份单个病毒感染标本，12份混合病毒感染标本和4份阴性标本。两种方法检测结果总体比较无统计学差异（P＞0.05），一致性较好（Kappa=0.960，P＜0.01）,RVP Fast荧光强度中位数（MFI）与实时荧光PCR/RT-PCR阈值循环数（Ct）呈负相关（r=-0.529，P＜0.01）。 结论：RVP Fast芯片技术的检测性能准确可靠，可应用于国内呼吸道病毒感染的快速、高通量检测，具有推广价值。

摘要:摘要:目的：探讨经α-地中海贫血基因诊断试剂盒检测为-α^3.7/αα（右向缺失，静止型）的样本中是否携带anti4.2片段，以判断是否存在漏诊的香港型地中海贫血（HKαα）。 方法: 设计HKαα和anti4.2片段的引物，用巢式PCR检测50例-α^3.7/αα样本中是否存在anti4.2片段，并结合平均红细胞体积(MCV)及血红蛋白A2(HbA2)比较分析。 结果: 巢式PCR结果表明，50例-α^3.7/αα样本中存在8例为HKαα型，漏诊率为16%；且HKαα携带者的MCV明显高于-α^3.7/αα携带者，差异有统计学意义（t=7.04,P＜0.05）。 结论: 巢式PCR可鉴别HKαα与-α^3.7/αα携带者，提高其检出率。

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摘要:摘要：目的：全面鉴定1株尿毒症患者血液中分离的生痰二氧化碳嗜纤维菌。 方法：用血培养仪对尿毒症患者静脉血标本进行需氧和厌氧培养，分离培养阳性培养物，用生化鉴定卡进行生化鉴定，用质谱分析及16S rRNA基因序列分析进行补充鉴定，并用E-test法进行药敏试验。 结果：该菌为革兰阴性长梭状杆菌，常规方法无法鉴定至种。结合质谱分析及16S rRNA基因序列分析结果，鉴定为生痰二氧化碳嗜纤维菌。该菌对阿米卡星最低抑菌浓度（MIC）为64 μg/mL，对其他药物MIC值较低。 结论：质谱分析和16S rRNA基因序列分析为常规方法无法鉴定至种的细菌鉴定提供了可靠依据，成功将本例细菌鉴定为生痰二氧化碳嗜纤维菌。