摘要:摘要：目的：对高保真酶介导的突变敏感性分子开关技术检测线粒体DNA(mtDNA)A1555G位点条件进行优化。 方法：利用3′硫代磷酸化修饰的突变型引物和野生型引物作为下游引物，在其上游设计一条公共引物分别构成突变引物对和野生引物对，以构建好的包含mtDNA A1555G位点的突变型质粒和野生型质粒为模板，进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应，对PCR体系中的退火温度、引物浓度、模板浓度等条件优化，通过凝胶成像系统对其PCR结果进行分析确定最佳反应条件。 结果：分子开关技术检测mtDNA A1555G位点的最佳PCR条件：退火温度为61.0 ℃，引物浓度为0.6 μmol/L，检测模板浓度为10³~10⁶ copies/μL。 结论: 确定了分子开关技术检测mtDNA A1555G位点的最佳反应条件，为该技术在线粒体DNA的突变筛查中的应用提供依据。

摘要:摘要：目的：建立一种耐多药结核分枝杆菌检测方法。 方法：设计并构建含有katG315、rpoB526、rpoB531耐药基因突变位点的质粒；通过PCR扩增及纯化、等位基因特异性引物延伸反应（ASPE）、荧光微球杂交反应及液相芯片系统Luminex 200检测；并对该方法反应条件进行探索及方法学评价。 结果：ASPE反应中Tsp DNA聚合酶最适浓度为0.025 U/μL，杂交荧光微球浓度为每μL 100个，链霉亲和素藻红蛋白浓度及杂交时间分别为2 μg/mL和20 min；所建立方法的检测灵敏度最低可达1 ng/mL；当质粒浓度为1.5×10⁵ ng/mL时，批间和批内变异系数（CV）分别为6.48%~12.15%和0.35%~6.92%；当质粒浓度为2 ng/mL时，批间和批内变异系数（CV）分别为5.73%~10.77%和0.97%~8.91%；特异性引物探针与其他突变位点均无交叉反应。 结论：液相芯片技术联合等位基因特异性引物延伸反应检测耐多药结核分枝杆菌灵敏且具有成本低、高通量等特点，极具临床应用潜力。

摘要:摘要：目的：自制Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒并评价在全血样本中DNA提取效果，进一步研究开发磁珠法检测HBV DNA的技术。 方法：采用溶剂热法自制Fe₃₄磁性纳米颗粒，并用表面化学修饰法制备Fe₃₄@SiO₂磁性复合颗粒；利用该颗粒经吸附、洗涤、洗脱等步骤提取全血样本中DNA，并通过电泳、PCR扩增等传统技术检测DNA提取效果，与煮沸法提取血清DNA样本的效果进行对比。 结果：成功制备出直径约550 nm的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒，该颗粒分散均匀；自制的磁性纳米颗粒可用于全血DNA提取与纯化，实验操作简便。自制磁性纳米颗粒提取全血DNA浓度为150.56 ng/μL，纯度为1.53；该提取方法与传统煮沸裂解法对96份样本进行对照研究，证实其灵敏度有较大提高。 结论：利用自制的Fe₃₄@SiO₂磁性纳米颗粒和合适的缓冲液体系，可成功地提取纯度较高的DNA，通过PCR扩增及对比实验表明，该磁性纳米颗粒及其提取工艺经优化后，可用于传染病的体外分子诊断研究。

摘要:摘要：目的：试分离培养胃癌患者周围淋巴结组织中的间充质干细胞（hGCL-MSCs）,并鉴定其生物学特性。 方法：采用组织块贴壁法分离培养24例胃癌患者周围淋巴结组织，通过测定生长曲线、细胞周期、RT-PCR、染色体分析、免疫组化染色、成骨成脂诱导染色及裸鼠致瘤等实验，评价其生物学特性，并与人骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）进行比较。 结果：24例胃癌患者周围淋巴结组织中分离培养出3例hGCL-MSCs；生长曲线试验发现，hGCL-MSCs增殖速率高于hBM-MSCs；染色体分析示其核型正常，裸鼠致瘤实验未见致瘤；RT-PCR检测其表达Oct-4、Nanog、ABCG2、CD44、CD73、α-SMA、Bmi-1等干细胞相关基因；免疫组化染色结果表明，hGCL-MSCs中α-SMA、P53、ABCG2染色呈强阳性，PCNA染色呈弱阳性。 结论：hGCL-MSCs与hBM-MSCs的生物学特性相似，对研究胃癌微环境及其发生具有重要意义。

摘要:摘要:目的：探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。 方法：脂质体转染寡核苷酸片段NC-mimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞，定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力，western blot检测转染后细胞上皮间质转化（EMT）指标。 结果：miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平（900.10±240.40）明显高于NC-mimics转染组（1.01±0.18），差异有统计学意义（t=6.48，P＜0.01）。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平（0.65±0.04）明显低于NC-inhibitor转染组（1.01±0.14），差异具有统计学意义（t=4.19，P＜0.05）。miR-1-mimics 转染组迁移细胞数量［（362±10）个］明显高于NC-mimics转染组［（112±10）个］，差异有统计学意义（t=21.65，P＜0.01）。miR-1-inhibitor 转染组迁移细胞数量［（64±8）个］明显低于NC-inhibitor转染组［（133±14）个］，差异有统计学意义（t=17.07，P＜0.01）。与NC-mimics转染组比较，miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白（E-cadherin）表达减弱（t=19.28，P＜0.01），神经钙粘蛋白（N-cadherin）和波形蛋白(Vimentin)表达增强（t=5.43，P＜0.01；t=23.14，P＜0.01）；与NC-inhibitor转染组比较，miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强（t=6.14，P＜0.01），N-cadherin和Vimentin表达减弱（t=6.78，P＜0.01；t=7.94，P＜0.01）。结论：miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移；miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移；miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。

摘要:摘要：目的：探讨低浓度5-氟尿嘧啶（5-FU）对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。 方法：用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度（IC50），实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平，平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。 结果：5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为（28.82±1.25）和（23.95±1.34）；低浓度5-FU（0.5、1 μmol/L）处理后，胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强，差异具有统计学意义（P＜0.05）；平板克隆形成实验结果表明，经低浓度5-FU（0.5、1 μmol/L）作用后胃癌细胞的增殖能力变强，形成的克隆数增多，差异有统计学意义（P＜0.05）；但5-FU浓度为2 μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱，且克隆形成能力也有下降。 结论：低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。

摘要:摘要：目的：构建原核表达PAPP-A重组蛋白，并对蛋白质进行纯化。 方法：根据DNAstar软件分析获得的编码PAPP-A特异抗原表位，利用Primer Premier 5.0软件设计引物，以PAPP-A cDNA质粒转化菌液为模板，进行PCR扩增。PAPP-A的DNA和pET42a质粒分别双酶切，经琼脂糖凝胶电泳及胶回收后进行连接反应，转化至大肠埃希菌Top10，筛选阳性克隆经测序鉴定正确后，转化至大肠埃希菌BL21，诱导产生PAPP-A重组蛋白，利用镍柱初步纯化及离子交换层析柱进一步纯化，用SDS-PAGE及DEAE层析鉴定重组抗原蛋白。 结果：筛选出抗原表位集中区，在大肠埃希菌BL21中高效表达了重组的PAPP-A蛋白，经过镍柱及离子交换层析纯化后，PAPP-A浓度为0.22 g/L，DEAE层析分析证实其纯度较高。 结论：成功筛选出PAPP-A的抗原表位集中区，并制备了重组抗原蛋白，为PAPP-A的后续临床研究提供依据。

摘要:摘要:目的：探讨血栓弹力图(TEG)在成人心脏瓣膜置换术后监测凝血功能及指导临床输血中的应用价值。 方法：回顾分析经体外循环行心脏瓣膜置换手术的118例成人患者，依据指导患者术后在ICU期间输血的凝血检测方法不同，分为血栓弹力图组（TEG组）62例与标准凝血试验组（SCT组）56例，对两组间人口统计学特征、术前凝血功能、术中血液出入量的差异进行比较，同时统计并分析两组患者于ICU期间的引流量与血制品输注情况及气管插管时间、住ICU时间等指标。 结果：与SCT组相比，TEG组患者术后于ICU期间血浆输注量减少（P＜0.01），血小板输注量虽未达统计学差异水平但有明显减少，两组红细胞输注量无差异（P＞0.05）。未发现两组患者间短期转归指标如引流量、气管插管时间、住ICU时间及ICU后出院时间等存在明显差异（P＞0.05）。 结论：可以运用TEG来监测成人患者心脏换瓣手术后的凝血功能并且指导输血，其对患者术后转归无明显影响且可减少血浆与血小板的使用量，对精准输血具有重要意义。

摘要:摘要：目的：了解胰岛素样生长因子2（IGF-2）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、白血病抑制因子（LIF）、血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子β1（TGF-β1）7种细胞因子对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的影响。 方法：用ELISA法检测接受IVF-ET者卵泡液、取卵日血清以及移植日血清中7种细胞因子浓度水平，比较分析临床妊娠成功和未临床妊娠两组7种细胞因子浓度水平。用化学发光法检测卵泡液中雌二醇、孕酮和睾酮浓度。 结果：未临床妊娠组卵泡液中VEGF和TGF-β1浓度均高于临床妊娠组（P均＜0.05）。卵泡液中VEGF浓度与雌二醇、睾酮浓度呈负相关（r分别为－0.161、－0.224， P均＜0.05）。卵泡液中TGF-β1浓度与睾酮、IL-1β、IL-6和TNF-α浓度呈正相关（r分别为0.162、0.716、0.405、0.402，P均＜0.05）。 结论：卵泡液中VEGF和TGF-β1的浓度水平可能影响IVF-ET妊娠结局。

摘要:摘要： 长链非编码RNA（lncRNA）可以从表观遗传学层面实现对基因表达的调控，从而影响正常细胞或疾病细胞的发育或发展。新近的研究表明，许多lncRNA在恶性血液系统疾病中可出现特异性地表达失调，与急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia，AML）的发生和发展密切相关。lncRNA不仅可作为AML诊断和预后的标志物，还可作为AML治疗的新靶标。本文就近年来lncRNA在AML中的研究进展作一综述。

摘要:摘要： 鼻咽癌是一种在中国南部尤其是广州地区多发的恶性肿瘤，其发生、发展是环境、遗传、病毒和信号通路异常等多因素共同作用的结果。研究发现，长链非编码RNA（lncRNA）在人类肿瘤中发挥重要的调控作用，广泛参与肿瘤的侵袭、转移、预后等进程。本文就近年来在鼻咽癌中发现的异常表达lncRNA及其潜在的作用机制作一综述。

摘要:摘要： 4次跨膜蛋白亚型A（membranespanning 4domains subfamily A，MS4A）基因家族是一个新的基因家族，自2001年被定义以来，在人类中迄今共有16个成员被发现，包括MS4A1（CD20）、MS4A2（FcεRIβ）和MS4A3（HTm4）等。MS4A基因家族在细胞增殖和分化过程中起到重要作用，而其异常表达也与多种临床疾病密切相关，本文就MS4A家族与临床疾病的关系作一综述。

摘要:摘要：：长链非编码RNA（long noncoding RNA, lncRNA）与肿瘤的发生、发展密切相关。H19是位于人类染色体11p15.5上，长度为2 300 bp，并可与胰岛素样生在因子2（IGF-2）相互作用，表现出父系印记的lncRNA分子。近年来的研究发现，H19在多种肿瘤中的表达异常，且与患者的不良预后紧密相关， H19可与多种癌基因或抑癌基因（如c-Myc、p53）以及microRNA（miRNA）相互作用，从而在肿瘤的生长、增殖、分化凋亡及侵袭转移等过程中发挥重要功能。进一步研究H19的生物学功能及具体作用机制，有助于深入了解肿瘤的特性，为肿瘤的早期诊断、预后判断及基因治疗提供依据。

摘要:摘要： 在现代临床实验室中，设定合适的性能规范是质量管理中的必要前提条件。多年来，全球各地的检验医学专家们就性能规范的设定策略这一话题进行了诸多讨论并提出建议。1999年斯德哥尔摩会议提出了质量规范设定策略的等级结构，并受到了广泛认可。然而随着检验医学的不断发展，性能规范的设定策略也在持续改进和更新。2014年米兰会议重新讨论和评估了性能规范的设定策略，调整和简化了斯德哥尔摩等级结构，并将性能规范的设定从检验中阶段扩展到检验全过程（包括检验前和检验后阶段）。本文描述了性能规范设定策略的新进展，旨在帮助临床实验室选择合适的设定策略并为定量测定项目制定合理的性能规范提供参考。

摘要:摘要：目的：建立艰难梭菌实时荧光定量PCR检测方法，直接检测粪便标本艰难梭菌tcdB基因，并探讨其应用价值。 方法：根据艰难梭菌基因组设计tcdB基因特异性引物及探针，用ATCC-43255标准株评价其敏感性，选取艰难梭菌生物学特征相近的临床菌株验证其特异性；收集2015年10-12月临床腹泻患者稀便标本115份，提取基因组总DNA后进行tcdB基因检测，并以产毒培养法为参考方法，探讨该方法的临床诊断价值。 结果：荧光定量PCR法最低检测限为1×10^-3 ng，并且仅特异性地扩增产毒艰难梭菌；临床样本评价荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为75.0%、99.1%、85.7%和98.1%。 结论：实时荧光定量PCR直接检测稀便标本中的艰难梭菌tcdB基因可用于艰难梭菌相关腹泻的快速诊断。

摘要:摘要：目的：探讨美国临床和实验室标准化协会（CLSI）EP15-A3在临床生化精密度验证中的应用价值。 方法：按照EP15-A3精密度5×5设计方案，利用IFCC提供的Rela A（水平1）和Rela B（水平2）样本，分别对肌酐（Cr）、尿素（Urea）、尿酸（UA）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、葡萄糖（Glu）6个临床常用生化指标进行批内和实验室内不精密度验证。每个样本每天1批，每批重复5次，共5 d，每个样本获得25个数据。Grubbs′法计算离群值，单因素方差分析（ANOVA）计算用户批内不精密度（S_R）和实验室内不精密度（S_WL），分别与厂家声明的批内不精密度（σ_R）和厂家声明的实验室内不精密度（σ_WL）进行比较和判断，如果S_R≤σ_R、S_WLWL，则用户验证了厂家不精密度声明。如果S_R＞σ_R或S_WL＞σ_WLR≤UVL_R、S_WL≤UVL_WL，同样用户验证了厂家不精密度声明。否则，需查找原因或与厂家联系。 结果：6个生化指标的测定结果均通过Grubbs′法离群值检查，各项目无离群值。S_R和S_WL分别与σ_R、σ_WL或UVL_R、UVL_WL比较，批内不精密度验证实验中，除Cr（水平1）、TC（水平2）、Glu（水平2）的S_R＞σ_R、S_R＞≤UVL_R外，其他指标各水平S_R均≤σ_R；实验室内不精密度验证实验中，6个指标两个水平S_WL均≤σ_WL。 结论：实验室现用的6个Roche生化指标批内与实验室内不精密度达到厂家声明要求，符合质量目标要求。

摘要:摘要：目的：试建立适用于表皮生长因子受体基因（EGFR19）体细胞突变焦磷酸测序法日常检测的室内质量控制体系。 方法：选择EGFR19E746_A750del(1)突变为10%的样本作为外部质控品，前20次的检测数据采用即刻法控制其检测质量，建立EGFR19基因体细胞突变焦磷酸测序的L-J质控图。 结果：该质控品前20次的SI上限和SI下限均在n2s内，用L-J质控图计算在即刻法质控的基础上获得的前20次外部质控品9C/14G的突变比例，其均值为11.78%， 标准差（s）为1.70%，变异系数（CV）为14.46%。 结论：用EGFR19质控品绘制L-J质控图，可对实验误差进行控制。

摘要:摘要:目的：探讨NFKB1基因启动子区-94ins/del ATTG多态性与冠心病（CHD）的关联性。 方法：计算机检索PubMed、CNKI、万方等数据库，获取有关NFKB1基因启动子区-94 ins/del ATTG多态性与CHD关联性的病例-对照研究，用Stata 11.0 软件在等位基因、纯合子、显性和隐性基因模型下进行荟萃(meta)分析。根据异质性检验结果选择固定或随机效应模型进行数据合并，并采用Begg′s漏斗图和Egger′s检验评价发表偏倚。 结果：共纳入8篇文献，研究对象共14 649例；Meta分析结果显示，携带D等位基因的人群，CHD易感性增加（OR=1.28，95%CI=1.22~1.35，P_OR＜0.01）；基因型为DD的人群发病风险高于II基因型（OR=1.32，95%CI=1.19~1.47，P_OR＜0.01）；显性模型中DD+ID基因型的人群发病风险高于II基因型的人群（OR=1.15，95%CI=1.07~1.24，P_OR＜0.01）；隐性模型中DD基因型的人群发病风险高于ID+II基因型（OR=1.26，95%CI =1.15~1.38，P_OR=0.002）。亚组分析结果显示，NFKB1基因启动子区-94ins/del ATTG多态性与CHD易感性在亚洲及欧洲人群中有关联，而在北美洲人群中并未表现出这种相关性。 结论: NFKB1基因启动子区-94ins/del ATTG多态性与CHD的易感性显著相关，但主要表现在亚洲和欧洲人群。

摘要:摘要：目的：调查唐山地区冠心病（CHD）人群孤立低高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）血症分布现状及风险因素。 方法：入选2009年1月至2014年12月在唐山市工人医院心内科确诊的急性冠脉综合征（ACS）患者（共5 319例，男3 117例，女2 202例）和体检中心的体检健康者（共25 197例，男11 114例，女14 083例），收集血脂数据，回顾性分析ACS患者和体检健康人群的血脂异常情况。 结果：ACS患者血清HDL-C、TG、LDL-C异常检出率分别高于健康人对照组（55.48% vs 29.69%，χ²=1 298，P<0.01；36.79% vs 24.43%，χ²=343.4，P<0.01；23.90% vs 22.74%，χ²=3.270，P=0.07），且HDL-C异常检出率最高；伴有低HDL-C异常的ACS患者中，男、女性各年龄段（20~55岁、56~65岁、66~80岁）孤立低HDL-C表型分别为40.81%、55.16%、67.84%和47.24%、41.64%、51.33%，呈增长趋势（男性：χ²=100.30，P<0.01；女性：χ²=16.31，P<0.01）；多因素Logistic回归分析显示，孤立低HDL-C血症与ACS风险相关（OR=3.51，95%CI：3.20~3.86，P<0.01）。 结论：低HDL-C异常人群是唐山地区CHD防控的主要对象，孤立低HDL-C血症与CHD风险增加相关。

摘要:摘要：目的：对MALDI-TOF-MS快速检测分枝杆菌属的正确率进行荟萃(meta)评价。 方法：收集1990-2015年，国外公开发表的关于MALDI-TOF-MS检测分枝杆菌的文献，按meta分析的要求对文献进行检索、筛选，对纳入的文献进行质量评价，对符合条件的研究进行meta分析。 结果：共有11篇文献纳入，对各文献的研究进行数据提取后合并MALDI-TOF-MS鉴定分枝杆菌属的正确率，结果正确率为91%。 结论：MALDI-TOF-MS对分枝杆菌属的鉴定有较好的准确性。

摘要:摘要：目的：鉴定1例曾被错误鉴定为类鼻疽伯克霍尔德菌的泰国伯克霍尔德菌。 方法：对1例肺脓肿合并败血症患者的痰液和血液标本进行细菌分离培养、生化鉴定、分子生物学鉴定和药敏试验鉴定。 结果：培养出革兰阴性短小杆菌；生化鉴定特征符合泰国伯克霍尔德菌；测序结果显示与泰国伯克霍尔德菌相似度达100%，与类鼻疽伯克霍尔德菌相似度为99%；全基因组测序结果显示该菌与泰国伯克霍尔德菌E444具有最近的亲缘关系。药敏试验结果显示该菌对亚胺培南、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑敏感。 结论：成功鉴定了1例泰国伯克霍尔德菌。

摘要: