2019(7):481-485.
摘要:社区获得性肺炎是威胁人类健康的重要疾病,单靠病原学诊断存在诸多问题。基于宿主对病原学侵袭产生的生物标志物,可以实时反映病情进展、预测可能的病原微生物、指导临床用药及预后判断。本文从宿主生物标志物的动态改变、宿主转录组学和社区获得性肺炎临床评分系统方面,探讨宿主标志物对诊断和管理社区获得性肺炎的价值。
2019(7):486-490.
摘要:乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)在宿主体内的复制以病毒颗粒的形式存在,血清中的病毒复制产物是实验室诊断和监测慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B, CHB)的基础。寻找血液中能够有效反映肝内病毒转录活性和药物疗效的生物学标志物一直是热点和难点。本文对HBV颗粒性产物在CHB患者血清中的存在形式及其对CHB抗病毒药物的疗效监测和停药时机判断的意义,特别是新标志物如HBV RNA、HBV核心相关抗原(HBcrAg)和空病毒颗粒等的发现及应用作一述评。
2019(7):491-494.
摘要:病原微生物感染危害严重,基于核酸的早期快速检测是其防控关键。近年来,纳米材料因其特殊的光、电、热、磁等性质,被广泛应用于病原微生物核酸的快速、灵敏检测。本文结合纳米材料在核酸快速检测中的纳米尺寸效应,总结了近年来纳米技术在病原微生物核酸检测中的应用,旨在为病原微生物感染的有效防控提供帮助。
2019(7):495-498.
摘要:摘要:目的 基于光激化学发光技术平台初步建立血清催乳素(PRL)的分析方法,并评估其性能指标。方法 将发光纳米微球和生物素分别标记于一对人PRL单抗,两者与血清中待检泌乳素、链霉亲和素标记的感光微球(通用感光溶液)在均相条件下形成双抗体夹心的检测体系,并对该检测体系的性能指标和相关性进行评价。结果 本方法的批内及批间精密度(变异系数)分别为4.60%和5.25%;检测范围为2.48~ 4240 μIU/ml;加标回收试验的回收率在96.25%-97.16%;胆红素<20 mg/dL、血红蛋白<200 mg/dL、甘油三酯<3000 mg/dL时,均无干扰现象发生;且该方法与贝克曼Unicel Dxi 800 Access 2酶促化学发光免疫系统分析法具有良好的相关性。 结论 光激化学发光法检测血清PRL的方法具有良好的分析性能,可满足临床诊断需求。
2019(7):499-503.
摘要:目的:了解新疆结核病患者全血环状RNA (circRNA)差异表达谱,并预测其靶基因,探索circRNA与结核病发生发展的关系。方法:选取新疆肺结核患者43例与健康对照者40例,利用表达谱芯片对病例组和对照组各3例全血circRNA进行检测,筛选差异表达的circRNA,同时选择43例肺炎患者全血进行qRT-PCR验证,再用circRNA靶基因预测数据库进行差异circRNA靶microRNA的预测。结果:芯片结果显示新疆结核病患者全血中存在差异表达的circRNA 835个,其中249个表达上调,586个表达下调,筛选出4个有显著差异的circRNA进行qRT-PCR验证,结果表明hsa_circ_0008276、hsa_circ_0003452、hsa_circ_0001846(P<0.05)和hsa_circ_0090508表达均下调(P<0.05)。circRNA 靶基因预测结果提示,has-miR-1294、has-miR-604、has-miR-616、has-miR-663b、has-miR-486-3p可能是hsa_circ_0090508的潜在靶基因。结论:hsa_circ_0090508在结核病患者的表达下调显著,并且相较于其他三个circRNA特异性更高,其可能通过靶基因影响结核病的调控机制。
程晨 , 谭枝微 , 刘颖梅 , 纵帅 , 姜飞 , 谢硕硕 , 顾兵
2019(7):504-507.
摘要:目的 明确万古霉素耐药肠球菌(Vancomycin resistant enterococci,VRE)耐药基因型别及耐药性,指导临床用药。 方法 收集北京中日友好医院2016年10月至2017年10月临床分离的17株VRE,使用VITEK2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统检测其对临床常用14种抗菌药物的敏感性,用E-test法确证其对万古霉素和替考拉宁的药物敏感性,及应用质谱仪鉴定出肠球菌的临床类型;采用PCR方法检测17株VRE的耐药基因vanA,vanB,vanC1,vanC2/3,并经测序验证。 结果 17株VRE均为耐万古霉素屎肠球菌,均对环丙沙星,左氧氟沙星,莫西沙星(喹诺酮类),克林霉素(林克酰胺类),青霉素(青霉素类)等100%耐药,对利奈唑胺,奎奴普丁,替加环素等敏感;其耐药基因型均为vanA型,有4株vanB表型-vanA基因型,国内较为罕见。结论 本研究所收集VRE均对万古霉素高水平耐药,耐药型均为vanA型,应加强临床分离株的耐药监控,合理使用抗生素。
陆志萍 , 龚燕萍 , 徐国新 , 许国华 , 钱建平 , 蒋廷旺
2019(7):508-511.
摘要:目的 流式细胞术检测类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)患者外周血IL-10+CD19+B细胞(regulatory B cells, Breg)的表达情况,并分析其与患者疾病活动程度的相关性。方法 选择40例活动期RA患者和30例健康体检者作为对照组(Health Controls, HCs),抽取患者外周血,并分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC),以合成CpG寡脱氧核苷酸2006(CpG ODN 2006)和佛波醇酯(PMA)进行体外共培养,流式细胞术分析作用前后Breg的表达情况,并与疾病严重程度指标血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)和关节活动度评分(DAS28)做相关性分析。结果 体外诱导前RA组和HCs组PBMC中Breg的表达比例分别为1.92%(1.58%-2.56%)和2.04%(1.73%-2.93%),差异无统计学意义(P=0.258);经体外培养诱导后,Breg表达显著升高,RA组为13.00%(9.75%-14.85%),HCs组为9.12%(6.83%-10.22%),差异有统计学意义(P<0.001)。对RA组Breg与ESR、CRP、DAS28进行Spearman相关性分析发现,Breg与DAS28呈负相关关系(P=0.002),而与ESR和CRP无显著相关(P>0.05)。结论 RA患者中诱导后调节性B细胞在类风湿性关节炎患者中显著升高,并且与类风关活动性呈负相关关系,可能在RA的发生、发展中具有重要的免疫调节作用。
王维伊 , 钟山亮 , 闫林萍 , 庞吉 , 朱淼林 , 赵建华
2019(7):512-517.
摘要:摘要:目的:探讨卵巢癌微环境中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)促进M2型巨噬细胞的极化和浸润,及其对于癌细胞侵袭、转移的影响。 方法:选取卵巢癌细胞系A2780和SKOV3与THP-1来源巨噬细胞,在体外构建共培养模型,ELISA和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测培养基中M-CSF含量及其mRNA的表达水平。流式细胞术分析CD68+CD163+M2型巨噬细胞的极化比例。Transwell迁移试验检测2种卵巢癌细胞系与M2型巨噬细胞共培养后侵袭、转移能力的变化。免疫组化染色法检测卵巢癌(52例)及同期卵巢良性肿瘤(18例)石蜡组织切片中M-CSF、CD68+、CD163+和E-钙黏蛋白(E-cad)的表达及其相关性,并分析M-CSF与卵巢癌患者临床病理特征的关系。 结果:A2780和SKOV3细胞与巨噬细胞共培养后,其上清中M-CSF浓度明显高于2种癌细胞单独培养组(t分别为14.315、12.338,P均<0.01)。荧光定量PCR结果显示,升高的M-CSF来源于共培养后卵巢癌细胞的分泌(t分别为29.915、36.826,P均<0.01)。CD68+CD163+M2型巨噬细胞在A2780和SKOV3共培养组的极化比例分别为(6.14±0.50)%和(7.32±0.67)%,明显高于单独培养组(1.82±0.34)%,差异有统计学意义(t分别为12.289、12.711,P均<0.01)。Transwell试验结果显示,2种卵巢癌细胞共培养后其侵袭能力增强(24.00±4.81 vs 75.20±6.42,t=11.058;18.40±2.31 vs 61.60±9.66,t=7.537,P均<0.01)。卵巢癌组织中M-CSF的表达与CD68+、CD163+阳性细胞数正相关且均高于对照组(r分别为0.690、0.596,P均<0.01),而E-cad阳性表达则与之呈负相关且低于对照组(r=-0.566,P<0.01)。M-CSF表达在不同肿瘤FIGO分期、分化程度和淋巴结转移情况组间差异有统计学意义(χ2分别为6.240、6.612、4.544,P均<0.05)。 结论:卵巢癌微环境中M-CSF的表达升高诱导CD68+CD163+M2型巨噬细胞的极化和浸润,进而促进癌细胞的侵袭、转移。
2019(7):518-520.
摘要:目的 评估不同培养基上类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei,BP)Vitek 2 compact的鉴定结果。方法 收集2010年1月-2017年5月间海南省人民医院类鼻疽伯克霍尔德菌127株,分别将其接种于三种不同培养基上,以多位点序列分型(MLST)为金标准,评估不同培养基上生长的类鼻疽伯克霍尔德菌,采用Vitek 2 compact VT2.R7.01版的 GN卡进行鉴定并比较其准确性。结果 哥伦比亚羊血平板(CBA)上的类鼻疽伯克霍尔德菌鉴定准确率最高,为98.4%,2株被鉴定为洋葱伯克霍尔德菌;麦康凯平板(MAC)次之,准确率为94.5%,其中4株被错误鉴定为洋葱伯克霍尔德菌,2株无法鉴定到种,1株被错误鉴定为铜绿假单胞菌;流感嗜血巧克力平板(CHA)鉴定准确率最低,为91.3%,其中4株被错误鉴定为洋葱伯克霍尔德菌,3株无法鉴定到种,4株鉴定不出结果。结论 该研
黄燕华 , 王伟佳 , 温冬梅 , 陈康 , 谢晋烨 , 韩慧 , 董谦
2019(7):521-524.
摘要:目的 评价抗细胞膜DNA抗体(anti-cmDNA)、抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)单指标及多指标联合方案在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用价值。 方法 选取2017年9月至2017年12月于中山大学附属中山医院就诊的门诊和住院的101例SLE患者,94例非SLE自身免疫疾病患者,78名健康人,检测血清中anti-cmDNA、ANA及anti-dsDNA的水平。其中anti-cmDNA和anti-dsDNA检测采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,ANA检测采用间接免疫荧光法。检测方案分为单指标以及双指标、三指标检测,共18种方案。检测结果组间比较采用四格表配对卡方(χ2)检验。结果 SLE患者组中的anti-cmDNA阳性率(68%)明显高于非SLE自身免疫疾病组和健康对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。在单指标检测方案中,anti-cmDNA检测的准确率(82%)、约登指数YI(0.58)均最高。在多指标联合检测方案中,以下5种方案:anti-dsDNA /anti-cmDNA、ANA+(anti-dsDNA/anti-cmDNA)、anti-dsDNA/(ANA+anti-cmDNA)、anti-cmDNA /(ANA+anti-dsDNA)和(ANA+anti-cmDNA)/(anti-dsDNA+anti-cmDNA)/(ANA+ anti-dsDNA)的准确度(84%),YI(0.65)均最高。结论 Anti-cmDNA无论单指标还是以其为基础的多指标联合检测方案对SLE诊断均有突出的价值。
张 凯 , 邱 玲 , 李雪梅 , 杨 筱 , 王丹晨 , 葛增梅 , 李洪雷 , 卢 洁
2019(7):525-527.
摘要:目的 报道2例胡桃夹综合征患者随机尿微量白蛋白肌酐比(ACR)和尿总蛋白肌酐比(PCR)两项与24h尿总蛋白定量(24hUTP )结果不一致的临床案例并对患者不同体位时随机尿蛋白日内变异进行分析。方法 首先多普勒超声确诊2位患者为胡桃夹综合征,然后留取2位患者分别在平卧和正常活动24h期间的每次尿中的1ml标本分别检测ACR和PCR,其余并入24h总尿检测24hUTP ,分析不同体位下ACR和PCR的变异性及与24hUTP 的一致性。 结果 平卧期间,2位患者随机尿ACR,PCR和24hUTP均在参考范围内,结果均一致;正常活动期间,2位患者随机尿ACR和PCR都有个别异常升高超出参考范围,24hUTP分别是0.21g/24h和0.05g/24h,结果严重不一致。结论 胡桃夹综合征会引起体位性蛋白尿,从而导致患者随机尿蛋白日内变异较大,会出现个别随机尿蛋白与24h尿总蛋白结果不一致,建议患者用晨起第一次尿和24h尿来监测尿蛋白的排泄情况。
2019(7):528-530.
摘要:目的 比较心血管疾病患者载脂蛋白E(apolipoprotein E, ApoE)不同基因型的血脂水平,分析ApoE基因型与心血管疾病的相关性。方法 连续入选本院就诊的心血管疾病患者,于清晨空腹采集静脉血,检测血清中4项血脂指标及ApoE基因型。结果 共收集2016年10月至2017年4月心血管疾病患者222例。ApoE基因型频率为,ε2/ε2型0.9%,ε2/ε3型11.3%,ε3/ε3型73.0%,ε3/ε4型13.1%,ε4/ε4型1.4%,ε2/ε4型0.5%。根据基因型确定的表型频率分别是,E2型(ε2/ε2型,ε2/ε3型)12.16%,E3型(ε3/ε3型,ε2/ε4型)73.42%,E4型(ε3/ε4型,ε4/ε4型)14.41%。按基因型分组比较血脂水平,三种常见基因型的LDL-C水平差异有显著统计学意义(P <0.01);按表型分组比较血脂水平,除LDL-C,TG水平差异亦有统计学意义(P <0.05)。在住院患者中,χ2检验未发现ApoE基因型与5种心血管疾病之间存在明确的相关性。结论 在心血管疾病患者中,ApoE基因型与血清LDL-C水平具有较强相关性,与TG水平亦有一定相关性。但ApoE基因型与4种心血管疾病不存在明显相关性。
2019(7):535-538.
摘要:摘要:目的:探讨IFN-γ对诱导结肠癌细胞系CT26中IL-33表达的影响。 方法:分别用IFN-γ、IFN-γ联合PKA抑制剂H89处理CT26细胞(分别设为IFN-γ组和IFN-γ+H89组),同时设置阴性对照组(NC);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CT26细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA表达;western blot检测CT26细胞中PKA、CREB、p-CREB和IL-33蛋白的表达;免疫荧光共聚焦试验检测CREB蛋白在CT26细胞中的定位。 结果:IFN-γ组细胞中PKA、CREB和IL-33 mRNA相对表达量分别为2.50±0.11、3.10±0.08和2.80±0.22,均明显高于NC组(P均<0.05); IFN-γ+H89组PKA、CREB和IL-33 mRNA相对表达量分别为0.21±0.02、0.59±0.05和0.35±0.04,均明显低于NC组和IFN-γ组(P均<0.05)。western blot检测PKA、CREB、IL-33蛋白的表达水平与mRNA的表达结果均一致。免疫荧光共聚焦检测结果显示,IFN-γ组CREB的表达较NC组增加;与IFN-γ组相比,IFN-γ+H89组CREB的表达减少(P均<0.05)。 结论:IFN-γ通过PKA-CREB通路诱导结肠癌CT26细胞表达IL-33。
2019(7):539-545.
摘要:目的 研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能。方法 通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白;纯化的重组蛋白免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA法检测效价、western blot法分析抗原反应特异性;重组蛋白与GES-1细胞共培养,检测其对细胞炎症因子的表达及细胞增殖的影响。结果 virD4基因全长为1728bp,序列与Shi470菌株的virD4基因同源性较高;成功构建原核表达载体,经诱导及纯化获得相对分子量为63 kDa的重组蛋白;成功免疫小鼠制备多克隆抗体,效价为1:512 000,抗原抗体反应具有特异性;virD4能诱导GES-1细胞分泌炎症因子和增殖。结论 成功克隆并表达了virD4基因,制备了抗体,其重组蛋白能诱导细胞因子分泌及细胞增殖。
2019(7):546-549.
摘要:目的 探讨肠道菌群在3-甲基腺嘌呤(3-MA)改善四氯化碳(CCl4)介导小鼠肝纤维化过程中的作用。方法 15只小鼠随机分为正常对照组、肝纤维化组和3-MA处理组;用CCl4构建肝纤维化模型,3-MA处理组第3周开始额外给予3-MA。8周后处死小鼠并取其血液、肝组织及肠道内容物,分析血清转氨酶、肝组织病理及肠道菌群情况。结果 3-MA处理组血清ALT和AST明显低于肝纤维化组(68.6 ± 4.2U/L VS 111.0 ±7.8U/L ,179.0 ± 12.9U/L VS 253.2 ± 26.7 U/L,P<0.01),且肝组织病变程度减轻。PCoA及NMDS分析将3组小鼠肠道菌群区分。与正常对照组比较,肝纤维化组肠道群落Alpha多样性降低,毛螺菌丰度显著下降,放线菌门、脱硫弧菌等肠道菌丰度显著升高(P<0.05)。与肝纤维化组比较,3-MA处理组肠道群落Alpha多样性增高,毛螺菌、Blautia菌丰度明显增高,双歧杆菌丰度减低;较正常对照组乳酸杆菌丰度明显增高(P<0.05)。结论 3-MA改善了CCl4介导的小鼠肝纤维化,而肠道菌群可能在此过程中起着积极作用。
2019(7):550-552.
摘要:目的 解读2017年国际血液标准化委员会(the International Committee for Standardization in Hematology,ICSH)发布的关于红细胞沉降率改良和替代法测定指南对实验室的要求,并以此为依据评价魏氏替代法ALIFAX Test 1血沉仪性能。方法 收集2018年6月至12月期间,南京医科大学第一附属医院健康体检标本2326例及40例就诊患者样本,建立参考区间,并分别进行准确度、测量范围、携带污染率和精密度的验证,以及风湿免疫科临床适用性评估。利用人新鲜血进行室内质控。结果 AFLEX Test 1血沉仪的准确度、精密度、携带污染率、室内质控均在要求范围内,参考范围与年龄、性别有关。对于风湿免疫科患者,Test 1与魏氏血沉法结果相关性良好。结论 按照ICSH 指南,ALIFAX TEST1 血沉仪的性能验证结果良好,基本可以满足本实验室的需求。
2019(7):553-556.
摘要:目的 介绍嗜肺军团菌引起社区获得性肺炎的快速、特异实验室诊断方法。 方法 回归性分析2018年5月至2018年9月CAP确诊为重症嗜肺军团菌社区获得性肺炎3位患者临床资料。分别检测患者急性期及恢复期嗜肺军团菌血清抗体。应用聚合酶链反应(PCR)分别扩增嗜肺军团菌基因。应用体外快速免疫层析法检测尿中嗜肺军团菌抗原。取患者急性期痰标本进行细菌培养,应用常规方法分离鉴定细菌。 结果 3例患者皆有高热(39.4-40.3℃)、CPR升高、LDH升高、血小板下降、低钠血症、腹泻和咳嗽,提示有军团菌感染。嗜肺军团菌尿抗原和(或)PCR检测确认了临床拟诊,证实患者为嗜肺军团菌感染。启动喹诺酮类药物治疗后,3位患者病情均好转。结论 根据“高热、CPR升高、LDH升高、血小板下降、低钠血症和咳嗽”组成的6项指标对患者进行拟诊,快速病原学实验进行确认,尽快启动靶向抗生素治疗,是成功诊治嗜肺军团菌引起的重症肺炎的关键。
2019(7):557-558.
摘要:
2019(7):559-560.
摘要:目的 对一例冷凝集标本进行输血前相容性检测,分析干扰因素,并探讨处理对策。方法 分别用37℃温盐水洗涤法及2-巯基乙醇处理患者红细胞以期消除自凝现象,然后以微柱凝胶法完成正定型的检测,对弱阳性的结果采用吸收放散试验加以验证,以试管预温法完成反定型的检测。再以试管抗人球蛋白法结合预温技术完成不规则抗体筛查及主侧配血。结果 37℃温盐水洗涤后盐水自身对照为弱阳性,2-巯基乙醇处理后盐水自身对照为阴性,经两种方法处理后血型格局均为ABweak型,后经吸收放散试验检测确定为AB型。微柱凝胶法不规则抗体筛查出现弱阳性结果,经自体吸收后复查为阴性,试管预温法不规则抗体筛查为阴性,且与4单位O型洗涤红细胞主侧配血相合。结论 遇强冷凝集标本时37℃温盐水洗涤法盐水自身对照不易处理至阴性,当正定型出现弱凝集时不能与冷凝集干扰相区别,易使检验者将弱凝集误判为假阳性而漏检,2-巯基乙醇处理冷凝集红细胞后进行正定型检测的方法优于前者。试管法与预温技术相配合可以用于冷凝集患者的输血前相容性检测。冷凝集标本往往伴随网织红细胞不同程度的增高,在考虑冷凝集干扰的同时需警惕可能存在血型抗原的减弱。