摘要:摘要：目的：运用多种分子遗传技术对小额外标记染色体（small supernumerary marker chromosome,sSMC）胎儿进行产前筛查和诊断，探讨各分子遗传技术的优缺点。 方法：对2例无创产前基因检测（non-invasive prenatal tests, NIPT）高风险胎儿的孕妇进行羊膜腔穿刺术，采集羊水标本，运用多重连接依赖探针扩增技术（multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA）对2例胎儿进行染色体非整倍体快速诊断，同时进行细胞培养和G显带核型分析；采用染色体微阵列技术（chromosome microarray, CMA）对胎儿1（18三体高风险）进行验证，采用MLPA技术对胎儿2（性染色体异常高风险）进行Y染色体微缺失检测。2例胎儿双亲均进行外周血G显带核型分析。 结果：MLPA技术快速诊断结果为：胎儿1的18号染色体短臂部分三倍体，胎儿2携带2条正常X染色体和1条短臂缺失的Y染色体；胎儿1羊水G显带核型结果为47,XY,+Mar（胎儿1），胎儿2为47,XX,+Mar；胎儿1的CMA检测结果为arr［hg19］18p11.32p11.21 (136,227-15,099)×4；胎儿2的Y染色体微缺失结果为SRY基因和生精区AZFc区缺失。2例胎儿父母双亲的外周血染色体核型均正常。 结论：NIPT检测适用于sSMC胎儿的产前筛查，不同的分子遗传产前诊断技术检测sSMC胎儿各有优缺点，相互补充验证的结果可为sSMC胎儿临床遗传咨询提供更详细的信息。

摘要:摘要：目的：建立离子交换色谱法定量检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根的方法，并对其进行性能分析评价。 方法：采用离子交换色谱法定量检测尿液样本中草酸根、磷酸根和枸橼酸根含量。根据《中国药典》(2015年版)通则中9012“生物样品定量分析方法验证指导原则”对所建方法的线性范围、检出限、精密度、样本稳定性、回收率和携带污染率等基本性能进行确认。 结果：离子交换色谱法检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根的线性范围分别为0.5～50 mg/L、1～100 mg/L、1～100 mg/L，检出限分别为0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.02 mg/L，定量下限分别为0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.0 mg/L，批内变异系数（CV）和批间CV均小于5%，回收率分别为92.00%～101.56%、100.10%～101.80%、97.16%～100.80%。 结论：建立的离子交换色谱法基本性能符合评价标准，能够灵敏且准确地检测尿液草酸根、磷酸根和枸橼酸根含量。

摘要:摘要：目的：探讨染色体微阵列（CMA）检测技术在颈项透明层（NT）增厚胎儿中检测基因组拷贝数变异（CNVs）的临床应用价值。 方法：收集2018年1月至12月郑州大学第三附属医院妊娠早期NT筛查异常(≥2.5 mm)并接受CMA检查的胎儿305例，分析胎儿染色体数目异常及拷贝数异常发生情况；并根据NT值分为以下5组：2.5～2.9 mm、3.0～3.4 mm、3.5～3.9 mm、4.0～4.9 mm、≥5 mm组，分析各组胎儿染色体数目异常及微缺失、微重复发生情况；根据是否合并其他超声异常，分为合并超声异常组和单纯组,分析并比较两组染色体异常发生情况。 结果：NT值2.5～2.9 mm、3.0～3.4 mm、3.5～3.9 mm、4.0～4.9 mm、≥5 mm组染色体异常率分别为5.6%、14.4%、22.4%、25.0%和42.3%；305例NT增厚的胎儿采用CMA技术共检出59例（19.3%）染色体异常；且与常规的染色体核型分析相比，CMA多检出5例致病性CNVs（5/246）及12例临床意义不明（VOUS）变异；此外，合并超声异常的NT增厚胎儿和单纯NT增厚的胎儿染色体异常率分别为44.2%和17.2%。 结论：CMA检测可检出常规的染色体核型分析无法检出的CNVs及临床意义不明的微缺失、微重复。

摘要:摘要：目的：研究肝素诱导的血小板减少症（HIT）抗体在妊娠期患者HIT的临床诊断效能。 方法：纳入疑似HIT的妊娠期患者135例，有34例患者诊断为HIT，其中19例并发血栓栓塞事件。采用ACL TOP 700型血液凝固仪以微粒凝集法测定HIT混合抗体，采用ACL AcuStar发光分析仪以化学发光法测定IgG特异性抗体。 结果：混合抗体和IgG特异性抗体诊断HIT的cut-off值分别为0.865 U/mL和0.885 U/mL时，诊断HIT的敏感性分别为85.3%和94.1%，特异性分别为74.0%和79.4%；预测血栓风险的cut-off值分别为1.810 U/mL和1.680 U/mL时，敏感性为47.4%和57.9%，特异性为60.0%和73.3%。生存分析和Cox回归分析显示，混合抗体和IgG特异性抗体均不能提示患者血栓栓塞事件风险的增加（Log-rank χ²分别为0.154和3.647，P值分别为0.694和0.056），预测血栓风险的风险比（HR）值分别为0.908（95%CI：0.461～1.788）和0.616（95%CI：0.310～1.224），P均＞0.05。 结论：HIT抗体检测对妊娠期人群的临床诊断效能低于其他类型患者，且HIT抗体水平与血栓栓塞事件无关联，不能作为预测妊娠期患者血栓风险的评价指标。

摘要:摘要：目的：检测Linc00462在胃癌患者组织及血清中的表达水平，并分析其生物学功能，评价其作为胃癌筛查及预后判断的生物学标志物的可行性。 方法：收集80例胃癌患者的癌组织及配对癌旁组织标本，另收集48例胃癌患者及22例体检健康者血清标本，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组Linc00462的表达水平；Pearson 相关检测分析Linc00462的表达与胃癌患者临床病理参数以及生存时间的相关性。采用shRNA敲减Linc00462，并采用生长曲线、平板克隆形成试验、Transwell迁移试验及基质胶侵袭试验分别检测胃癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。 结果：胃癌患者癌组织中Linc00462的表达水平显著高于配对癌旁组织（t=4.008,P＜0.001）； Linc00462的表达水平与胃癌患者的肿瘤大小（χ²=9.785，P=0.037）、分化程度（χ²=4.467，P=0.037）、脉管癌栓（χ²=13.745，P=0.004）及神经侵犯（χ²=7.355，P=0.005）密切相关；高表达Linc00462患者的平均生存时间显著短于低表达者（中位生存时间：26.5个月vs 37个月）（χ²=6.005,P=0.014）。胃癌患者血清Linc00462表达水平显著高于体检健康者（t=3.280, P＜0.01），且与患者的肿瘤大小（χ²=16.099，P=0.008）和分化程度（χ²=16.335，P=0.006）相关。Linc00462敲减后，胃癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著下降。 结论：Linc00462在胃癌患者组织和血清中表达升高，可作为胃癌筛查及预后判断的分子标志物。

摘要:摘要：目的：回顾性分析石家庄市新生儿多种遗传代谢病筛查情况，了解遗传代谢病单病种患病率及基因突变情况。 方法：采用串联质谱技术—非衍生法检测滤纸干血斑中11种氨基酸、30种酰基肉碱和游离肉碱的含量及相互之间的比值，对石家庄市2014年1月至2018年5月出生的新生儿进行多种遗传代谢病筛查，采用二代测序技术对疑似患儿进行基因突变检测，并用Sanger测序法验证。 结果：128 399例新生儿中初筛阳性3 811例，阳性率为2.97%；召回3 620例，确诊102例，总体患病率为1/1 259，阳性预测值为2.8%（102/3 620）。102例患儿中氨基酸代谢异常患儿50例，其中苯丙酮尿症患儿35例（70%）；有机酸代谢异常患儿36例，其中甲基丙二酸血症患儿34例（94.4%）；脂肪酸代谢异常患儿16例，其中原发性肉碱缺乏症患儿9例（56.3%）。53例患儿基因测序及父母验证结果发现纯合突变4例、复合杂合突变37例、杂合突变11例，二代测序技术进行基因缺失重复检测时发现基因整体杂合缺失1例。基因测序共发现56种突变，其中11种未见报道。 结论：石家庄市新生儿遗传代谢病患病率较高的为苯丙酮尿症、甲基丙二酸血症和原发性肉碱缺乏症；初步构建了石家庄市遗传代谢病患儿基因突变谱，并发现多个未报道基因突变。

摘要:摘要：目的：探讨卵巢癌患者外周血淋巴细胞亚群及CD4⁺CD25⁺调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)表达水平的变化及其临床意义。 方法：采用流式细胞术检测48例卵巢癌患者外周血标本中Treg细胞占CD4⁺T淋巴细胞的比率及淋巴细胞亚群分布，分析Treg细胞与卵巢癌患者临床病理参数之间的关系。 结果：与健康人对照组相比, 卵巢癌患者外周血标本中CD3⁺、CD4⁺T淋巴细胞及CD4⁺/CD8⁺比值均升高(P均＜0.01)，且Treg细胞占CD4⁺T淋巴细胞的比率明显升高(P＜0.01)，而CD16⁺CD56⁺NK细胞的表达水平显著降低(P＜0.01)；卵巢癌患者外周血标本中Treg细胞占CD4⁺T淋巴细胞的比率与患者年龄、组织类型、肿瘤大小、淋巴结转移及是否合并CA125升高均无关(P＞0.05)，而与FIGO分期、分化程度及是否存在腹水密切相关(P＜0.05)。 结论：检测外周血Treg细胞可用于评估卵巢癌患者的病情进展。

摘要:摘要：目的：探讨血清长链非编码RNA（long non coding RNA，LncRNA）结直肠肿瘤差异表达基因（colon rectal neoplasia differentially expressed，CRNDE）在鼻咽癌患者血清及组织中的表达水平及其临床应用价值。 方法：采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测鼻咽癌患者（n=78）和健康人群（n=78）血清和组织中CRNDE的表达水平，并分析CRNDE与鼻咽癌患者临床病理参数的相关性；采用CCK8增殖试验检测鼻咽癌细胞系CNE-2Z(WT)和CNE-2Z(Cas9-CRNDE)的细胞增殖能力的差异。ROC曲线分析CRNDE在早期鼻咽癌患者筛查中的临床应用价值。 结果：鼻咽癌患者血清CRNDE的表达水平明显高于健康人群（5.27±0.89 vs 1.01±0.12，P＜0.001）；且CRNDE表达与T分期、N分期、TNM分期、淋巴结转移、侵犯颈动脉鞘、侵犯颅底相关（P均＜0.05）；鼻咽癌患者癌组织中CRNDE的表达水平亦明显高于癌旁组织(4.56±0.38 vs 1.82±0.21，P＜0.05)；经CRNDE敲除后，与阴性对照组细胞相比，鼻咽癌系细胞的增殖速率明显降低（2.42±0.13 vs 5.81±0.48，P＜0.05）；血清CRNDE筛查鼻咽癌的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.835（95%CI：0.598～0.984），当cut-off值为11.25时，敏感性和特异性分别为93.1%、81.7%。 结论：鼻咽癌患者血清和组织中CRNDE的表达明显升高，有助于鼻咽癌早期筛查及病情评估。

摘要:摘要：目的：探讨后循环短暂性脑缺血发作（TIA）患者血浆D-二聚体、纤维蛋白原和血小板相关参数的表达，并分析其临床意义。 方法：收集72例TIA患者作为实验组，68例脑梗死患者作为疾病对照组，60例体检健康者作为健康人对照组。比较各组血小板相关参数、血浆D-二聚体及其纤维蛋白原表达水平的差异，并对患者的临床病理参数进行统计学分析。 结果：TIA患者、脑梗死患者和健康人血浆中的D-二聚体、纤维蛋白原水平差异均有统计学意义（F分别为621.855和92.277，P＜0.01）；组间两两比较发现，TIA和脑梗死患者血浆D-二聚体及纤维蛋白原的表达水平明显高于健康人群(P＜0.01)；TIA患者血浆纤维蛋白原水平明显低于脑梗死患者(P＜0.05)。TIA患者、脑梗死患者和健康人血小板相关参数中血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）的表达水平差异均有统计学意义(F分别为267.634、128.213，P＜0.01)，而血小板分布宽度（PDW）及血小板压积（PCT）的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)；组间两两比较发现，TIA和脑梗死患者PLT、MPV及PDW的表达水平明显高于健康人群(P＜0.05)；TIA患者PLT水平高于脑梗死患者(P＜0.05)，但PDW、MPV水平低于脑梗死患者（P＜0.05)。 结论：D-二聚体、纤维蛋白原和血小板相关参数在TIA患者中的表达水平存在差异，可为其早期诊治提供实验依据。

摘要:摘要：遗传代谢病涉及多种物质代谢异常，临床症状复杂多样，造成患儿生长发育障碍，严重影响着人口的素质和生存质量，因此对遗传代谢病的防控极为重要。近年来，遗传代谢病的筛查与诊断技术不断有新的进展。质谱技术在遗传代谢病中的广泛应用极大地提高了检测效率，分子诊断技术在遗传代谢病筛查和诊断中具有不可替代的作用，微流体技术也开始应用于遗传代谢病筛查领域。该文从遗传代谢病的筛查与诊断新技术，包括质谱技术、分子诊断技术、微流体技术等方面作一综述，探讨实验室筛查与诊断新技术在遗传代谢病中的应用，面临的挑战以及未来发展方向。

摘要:摘要：协同刺激分子B7-H7是B7家族成员，其受体为跨膜和免疫球蛋白结构域2(transmembrane and immunoglobulin domain containing 2，TMIGD2)。B7-H7在多种人类肿瘤中（如肺癌、乳腺癌及骨肉瘤等）表达，并与肿瘤进展及预后相关。B7-H7通过与受体的相互作用影响T细胞增殖及调节细胞因子的产生，B7-H7可能成为肿瘤免疫治疗的新方向。

摘要:摘要：成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats, Crispr)/Crispr相关蛋白(Crispr-associated proteins, Cas)系统彻底变革了基因编辑和基因表达的方式，其中靶向切割DNA特定位点的Crispr/Cas9系统的研究日趋成熟，而目前靶向切割RNA的Crispr/Cas13系统研究较少。Cas13由crRNA(Crispr RNA, crRNA)引导，特异性识别靶向RNA片段，激活后特异性剪切靶向片段，随后对附近的RNA片段进行无差别的“附带剪切”，在分子诊断及个体化治疗上具有广阔的应用前景。该文主要对靶向RNA的Crispr/Cas13系统的作用特点及机制进行阐述，并对在临床分子诊断及疾病治疗中的研究进展进行综述。

摘要:摘要：目的：探讨胃癌间质干细胞（gastric-cancer-derived mesenchymal stem cells，GC-MSCs）活化Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞增殖、迁移的作用。 方法：采用贴壁培养法从胃癌组织中分离GC-MSCs，成骨、成脂培养基诱导GC-MSCs分化。收集GC-MSC上清，胃癌细胞系HGC-27分别经L-DMEM培养液（Control组）、GC-MSC上清（GC-MSC组）、GC-MSC上清及20 μmol/L ICG001（GC-MSC+ICG001组）处理24 h，克隆形成试验和Transwell迁移试验分别检测细胞增殖、迁移能力，免疫荧光染色或western blot检测Wnt/β-catenin信号相关蛋白（β-catenin、CD44、CyclinD3）的表达水平。 结果：GC-MSC上清处理组HGC-27细胞增殖形成的克隆数［（203.700±8.762）个］显著高于Control组［（33.670±1.856）个］（t=18.98，P＜0.01），且其迁移细胞数［（349.700±7.881）个］较Control组［（145.000±3.712）个］亦显著增多（t=23.46，P＜0.01）。GC-MSC上清可促进HGC-27细胞β-catenin入核，诱导Wnt/β-catenin信号下游蛋白CD44、CyclinD3的表达。Wnt/β-catenin信号抑制剂ICG001可下调上述分子的表达，逆转GC-MSC上清对HGC-27细胞的促增殖、促迁移作用。与GC-MSC组［（203.000±3.606）个］相比，GC-MSC+ICG001组的克隆细胞数［（70.667±2.603）个］显著减少（q=39.24，P＜0.01），且迁移细胞数［（166.000±3.215）个］较GC-MSC组［（352.700±4.096）个］显著降低（q=47.73，P＜0.01）。 结论：GC-MSCs活化Wnt/β-catenin信号并促进胃癌细胞增殖及迁移。

摘要:摘要：目的：利用室间质量评价评估上海地区临床实验室[STBX]PIK3CA[STBZ]基因突变的检测能力。 方法：选用含有特定[STBX]PIK3CA[STBZ]突变型的福尔马林固定石蜡包埋细胞样本作为室间质评样本，对其均匀性和稳定性进行评价后，将5个样本随机编号后发送至参评实验室，要求实验室在规定时间内检测并回报结果，综合分析评价回报结果。 结果：均匀性和稳定性均符合中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求。2018年和2019年分别收到有效回报结果28份和19份，回报结果完全正确的实验室分别为78.6%（22/28）和89.5%（17/19），成绩不合格实验室分别为17.9%（5/28）和10.5%（2/19）。样本的整体符合率分别为86.4%（121/140）和93.7%（89/95），其中假阳性率为8.6%（12/140）和2.1%（2/95），假阴性率为8.3%（7/84）和5.3%（4/76）。 结论：上海地区临床实验室[STBX]PIK3CA[STBZ]基因突变检测质量整体较好，但部分实验室检测能力尚需提高。实验室通过参加室间质量评价可发现自身问题，持续改进并提高其检测质量。

摘要:摘要：目的：采用间接法建立上海地区甲状腺功能游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素（TSH）指标的人群参考区间，并与厂商提供的参考区间进行比较，以验证间接法建立人群甲状腺功能指标参考区间的可靠性。 方法：选择2015至2017年上海地区进行体检健康人群的FT4和TSH数据，通过K-S检验分析其数据的正态性。非正态数据使用BOX-COX转换成近似正态，通过四分位间距法剔除离群值后建立参考区间。通过非参数检验比较其结果在性别以及年龄间是否存在差异，与厂商给定的参考区间比较其参考变化值（reference change value, RCV）。 结果：采用间接法建立上海地区参考区间，其中，FT4：男性13.2～21.6 pmol/L，女性12.6～20.3 pmol/L；TSH：男性0.63～4.9 μIU/mL，女性0.55～5.04 μIU/mL。结果与厂商提供的参考区间存在差异。 结论：相比于直接应用厂商的参考区间或是转移来的甲状腺功能参考区间，采用间接法建立FT4和TSH参考区间的方法较为可靠，具备经济、简便且更贴近受检人群的特点。

摘要:摘要：目的：探讨体重和分娩方式对新生儿脐动脉血气分析影响，建立相关参数的参考区间。 方法：连续纳入我院2018年分娩的足月、无宫内感染、1 min Apgar≥8、体重≥2.5 kg且无畸形的新生儿，按体重分为正常组（2.5～4.0 kg）和巨大儿组（＞4.0 kg），采集各组脐动脉血标本，使用机载iQM质量管理系统的GEM3500血气分析仪检测脐动脉血pH、PO₂、PCO₂、BE和Lac的表达水平，并比较体重和分娩方式对脐动脉血气水平的影响。以自然分娩的健康新生儿建立脐动脉血气和乳酸水平的统计学参考区间。 结果：符合纳入标准新生儿408例，自然分娩组和剖宫产组脐动脉血气分析及乳酸的差异均有统计学意义（P＜0.01）。剖宫产组pH、BE高于自然分娩组，而PO₂、PCO₂、Lac低于自然分娩组（P＜0.01）。296例足月自然分娩新生儿的脐动脉血气分析及乳酸的参考区间分别为：pH 7.18～7.32，PO₂ 10.06～22.68 mmHg，PCO₂ 43.53～65.33 mmHg，BE -6.81～-1.15 mmol/L，Lac 2.44～5.38 mmol/L。 结论：建立了本院足月自然分娩新生儿脐动脉血气参数的参考区间；乳酸参考区间与诊断阈值的显著差异提示需建立新生儿窒息的临界值。

摘要:摘要:目的：阐明母体胚胎亮氨酸拉链激酶（MELK） mRNA在肺癌中表达的潜在临床意义。 方法：下载来自TCGA和GEO数据库的14个基因表达谱数据，包括8个肺腺癌数据和6个肺鳞癌数据。采用基于R软件(3.5.0版本)的循环算法选择具有最佳预后价值的基因。采用Mante-Haenszel法对每个数据集的HR值进行汇总。 结果：MELK mRNA在肿瘤组织中的表达水平明显高于正常/良性组织(LUAD:t=24.906, P＜0.001; LUSC:t=26.401, P＜0.001)，并从Ⅰ～Ⅳ期逐渐升高(LUAD:F=3.779, P=0.011; LUSC:F=4.195, P=0.002)。在肺腺癌中，MELK mRNA高表达与较差的总生存率(OS)显著相关(单因素：HR=2.025;95%CI:1.712～2.394; 多因素：HR=2.162;95%CI:1.796～2.604)。在肺鳞癌中MELK mRNA与OS差异无统计学意义(单因素：HR=1.271;95%CI:0.947～1.707;多因素：HR=1.304;95%CI:0.953～1.786)。 结论：MELK mRNA的高表达与肺腺癌的不良预后相关，并可作为肺腺癌的潜在治疗靶点。